P16与Ki67的表达在宫颈病变诊断中的临床意义

胡惠敏

（苏州市相城人民医院病理科 江苏 苏州 215131）

宫颈癌作为临床中女性生殖系统常见的一种恶性肿瘤，其发病率颇高，严重威胁着女性的生命健康、工作和生活质量，并且近年来呈现年轻化的发展趋势，调查显示，宫颈癌的病死率是妇科恶性肿瘤病死率最高的，且全球范围内宫颈癌为女性恶性肿瘤中第三位。宫颈癌发病过程为渐进式，调查资料显示由正常宫颈进展为宫颈癌，所需时间大约为10年左右。在高危群体中开展宫颈组织活检和病理学检查，对于早期发现宫颈病变、防治宫颈癌具有重要意义。资料表明，癌症的发生、发展受到多种抑癌基因的影响，抑癌基因P16与增殖细胞核抗原Ki67与宫颈癌发病、进展和预后有一定的相关性。采用免疫组化方法对P16与Ki67的表达在宫颈病变诊断中的临床意义进行探讨，报道如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

标本来自我院2016年1月－2018年12月收治的80例行宫颈活检或手术患者，其年龄平均（43.76±6.56）岁；病程（2.73±1.05）年。其中诊断为宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasias，CIN）64例，分期为CINⅠ期患者20例，CINⅡ期患者23例，CINⅢ期患者21例，宫颈鳞癌16例。另选择同时期内我院20例正常宫颈组织作为对照组，平均年龄（43.15±5.46）岁。各组年龄、文化水平等指标无统计学差异（P＞0.05）。所有组织标本均以10%的甲醛溶液固定和常规石蜡包埋。之前所有患者均未接受放、化疗和免疫治疗。

1.2 方法

本试验标本采取10%的甲醛溶液固定、石蜡包埋后，进行连续3～4 um厚度的切片，Envision免疫组化染色，使用已经检测的阳性片作为阳性对照，PBS缓冲液作阴性对照，将切片交由两名副高级以上的病理医师进行阅片，若其意见不统一则再经过科室3名副高级以上病理医师会诊最终确定诊断。

1.3 诊断标准

P16在宫颈上皮细胞核、细胞质中呈集中阳性表达，为弥漫的棕黄色；Ki67阳性表达集中于细胞核，呈棕黄色颗粒状。以染色细胞数量、强弱来进行定性判断：阴性（-）是指染色细胞5%以下，弱阳性（+）是指染色细胞5%～25%，阳性（++）是指染色细胞26%～50%，强阳性（+++）是指染色细胞50%以上［1］。

1.4 统计学方法

数据采用SPSS20.0统计软件进行统计学分析，计数资料采用率（%）表示，进行χ2检验，计量资料采用（±s）表示，进行t检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2.结果

2.1 P16与Ki67的表达

P16与Ki67在正常宫颈、CIN、宫颈鳞癌组织中的阳性表达率存在统计学差异（P＜0.05），见表。

表 各组P16与Ki67的表达情况比较

2.2 P16、Ki67表达与宫颈病变的关系

在宫颈病变的检测诊断中，P16检测的敏感性为83.8%（67/80)，采用spearman法分析相关性得知，P16的表达与病变的严重程度呈明显正相关（r=0.594，P＜0.05）；Ki67检测的敏感性为88.8%（71/80），采用spearman法分析相关性得知，Ki67的表达与病变的严重程度呈显著正相关（r=0.416，P＜0.05）。

3.讨论

宫颈癌的发展呈缓慢渐进的形式进行，早期病变表现往往缺乏特异性，从而容易被患者忽视或在临床漏诊，尤其是那些没有症状和体征的早期宫颈病变患者；不利于患者及时接受积极治疗，提高患者预后。临床对宫颈病变的筛查一般采取液基薄层细胞学检查和人乳头状瘤病毒（human papillomavirus，HPV）病毒检测，但前者具有主观性倾向，检测结果易受医生水平的影响，误差率较大；后者只是对HPV的感染做出提示而并不能反映HPV在宿主细胞中的存在状况；此外，数据表明有90%的HPV感染者可通过自身清除病毒而达到疾病自限［2］。因此，采用高敏感度的标志物进行辅助筛查宫颈病变，对于提高临床诊断率具有重要意义。

P16是最早由Kamp报道的一种位于染色体部位的抑癌基因，又称为多肿瘤抑制基因，是人类恶性肿瘤中最为常见的突变基因；是一种细胞周期依赖性激酶抑制蛋白，可直接参与人体细胞调控，对细胞分裂增殖起控制作用，有研究证明P16的缺失或发生突变，均可引起细胞增殖周期紊乱，使细胞陷入无限增殖，乃至于发生癌变。Ki67属于增殖细胞核抗原，是一种有丝分裂相关蛋白，能够反映出细胞的增殖程度与活性，阳性表达反映了细胞活跃的增殖状态。

宫颈癌常用的诊断方法阴道镜及宫颈细胞学检查对一些无临床症状及体征的宫颈癌患者可能出现误诊；因此，急需寻找可有效提高宫颈癌早期诊断率的诊断手法，以期提高宫颈癌诊断率，为患者积极治疗提供可能。研究发现，宫颈癌的发生发展过程中抑癌基因的失活及多癌基因的激活在其中发挥重要作用，临床常用的近年来P16与Ki67被研究证明在宫颈上皮内病变组织中的表达有增高趋势［3］。

本文通过免疫组化方法检测了我院近年来行宫颈活检或手术的80例患者中P16与Ki67的表达情况，结果表明，P16与Ki67在正常宫颈、CIN、宫颈鳞癌组织中的阳性表达率存在统计学差异（P＜0.05）；通过进行相关性分析得知，P16与Ki67的表达与病变的严重程度呈明显正相关（P＜0.05）。

综上所述，P16与Ki67用于宫颈病变检测的敏感性较高，且其表达可反映宫颈上皮内病变的严重程度，能够作为临床诊断宫颈病变的重要参考依据。