SOD、GSH-Px、MDA 在胃癌患者血清中的表达及与临床分期的关系

刘静，吴建平，寇耀，全信保，黄丽

1遂宁市中心医院普通外科，四川 遂宁 629000

2成都大学附属医院消化内科，成都 610000

流行病学研究表明，胃癌的发病率较高[1]，在有消化道恶性肿瘤家族史的患者中，胃癌的发病率相对更高。胃癌的发生发展进程将直接影响到胃癌患者的生存时间[2]。在胃癌的发生发展机制中，细胞因子的改变发挥一定的调控作用。超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）的改变能导致还原型复合物浓度下降，进而提高胃黏膜上皮细胞的损伤风险，促进肿瘤细胞的早期异常分裂。丙二醛（malondialdehyde，MDA）是氧化型复合物，能够通过诱导游离自由基的形成，增加游离自由基对胃黏膜上皮细胞的浸润和损伤程度，进而促进消化道肿瘤的进展[3]。本研究探讨SOD、GSH-Px、MDA的表达与胃癌发生发展的关系，旨在为胃癌的诊疗提供参考，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2017年9月至2018年11月在遂宁市中心医院治疗的87例胃癌患者作为胃癌组。纳入标准：所有患者均符合胃癌的诊断标准[4]。排除标准：合并有其他恶性肿瘤、自身免疫性疾病、甲状腺疾病等疾病；2周内应用过抗生素。87例胃癌患者中，男44例，女43例；年龄59～73岁，平均年龄（64.58±2.23）岁；TNM分期：Ⅰ期21例，Ⅱ期19例，Ⅲ期23例，Ⅳ期24例。同时选取86例健康体检者作为对照组，其中男46例，女40例；年龄58～73岁，平均年龄（63.97±2.53）岁。两组研究对象的年龄、性别比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经过医院医学伦理委员会批准，且所有受试者均签署知情同意书。

1.2 检测方法

入组后，抽取所有研究对象的空腹肘静脉血5 ml，室温下静置30 min，以3000 r/min的速度离心10 min，提取上层血清待检。采用酶联免疫吸附测定法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清SOD、GSH-Px、MDA水平。采用十字交叉法测定抗原浓度，碳酸盐缓冲液稀释抗原，加入96孔的酶标板中，盖好酶标板盖后置于4℃冰箱过夜，蒸馏水冲洗3次，每次5 min，轻轻叩击酶标板甩干。每孔中加入5%脱脂牛奶200 μl，置于4℃冰箱过夜，蒸馏水冲洗3次，每次5 min，加入稀释好的抗体（浓度1∶800），蒸馏水冲洗3次，每次5 min，每孔加入100 μl底物，显色后在酶标仪上检测吸光度。

1.3 统计学分析

采用SPSS 19.0统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，两组比较采用t检验，多组比较采用方差分析；计数资料以例数表示。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组研究对象血清SOD、GSH-Px、MDA水平的比较

胃癌组患者血清SOD、GSH-Px水平均低于对照组，MDA水平高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（表1）

表1 两组研究对象血清SOD、GSH-Px、MDA水平的比较（±s）

表1 两组研究对象血清SOD、GSH-Px、MDA水平的比较（±s）

组别SOD（nmol/ml）GSH-Px（AU）MDA（nmol/ml）对照组（n=86）93.23±15.32401.62±10.064.23±0.89胃癌组（n=87）76.15±38.3194.47±40.427.10±0.31 t值3.84268.40528.387 P值<0.01<0.05<0.05

2.2 不同TNM 分期胃癌患者血清SOD、GSH-Px、MDA 水平的比较

胃癌组患者血清SOD、GSH-Px水平随TNM分期的升高而降低，MDA水平随TNM分期的升高而升高，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（表2）

表2 不同TNM分期胃癌患者血清SOD、GSH-Px、MDA水平的比较（±s）

表2 不同TNM分期胃癌患者血清SOD、GSH-Px、MDA水平的比较（±s）

TNM分期SOD（nmol/ml）GSH-Px（AU）MDA（nmol/ml）Ⅰ（n=21）82.28±15.96100.43±12.386.59±0.62Ⅱ（n=19）78.42±12.2695.29±12.816.83±0.56Ⅲ（n=23）74.13±13.6193.71±11.737.01±0.47Ⅳ（n=24）70.93±11.8589.34±10.787.85±0.86 F值2.9943.31416.137 P值0.0350.0240.000

3 讨论

长期的不良饮食习惯、吸烟或高蛋白饮食均是形成消化道恶性肿瘤的诱因，在合并有幽门螺杆菌感染的患者中，胃癌的发病率可进一步上升[5]。长期的临床随访发现，中晚期胃癌患者的5年病死率可超过35%，同时胃癌患者的总生存时间不足48个月[6-7]。对于胃癌的血清学评估具有一定的参考意义，其能够在指导胃癌的诊疗及预后随访中发挥作用。虽然糖类抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9，CA19-9）或者癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）等肿瘤标志物能够在胃癌的诊疗过程中发挥一定的血清学评估价值，但仅依靠CA19-9或CEA评估胃癌病情的灵敏度不足45%，一致性率不足30%[8-9]。本研究对胃癌患者血清中SOD、GSH-Px、MDA的表达进行了分析研究，具有下列两个方面的价值：①能够为临床胃癌的病情评估提供新的参考性指标；②能够为进一步阐明胃癌的发生机制提供新的思路。

SOD能够通过影响超氧化酶的活性，导致体内氧化型复合酶活性下降，稳定氧化还原反应，减少氧化还原反应平衡紊乱导致的肿瘤细胞异常增殖。SOD能影响肿瘤细胞内核DNA的转录激活程度，降低肿瘤细胞异常转录激活的风险。GSH-Px是谷胱甘肽还原酶家族成员，其浓度下降能够通过影响谷胱甘肽还原酶的活性，促进胃黏膜上皮细胞损伤。MDA是丙二醛相关因子，其对含醛类化合物功能的调控能够显著影响游离自由基的释放程度[10-11]。相关研究探讨了SOD在胃癌中的表达情况，认为在胃癌中SOD的表达明显下调[12]，而缺乏SOD、GSH-Px、MDA的表达与胃癌患者临床分期的关系研究。

本研究发现，在胃癌患者血清中，SOD、GSH-Px水平均下降，而MDA水平上升，高于健康人群，提示了SOD、GSH-Px、MDA的表达均能够影响胃癌的病情进展过程，这主要考虑由于SOD、GSH-Px的表达下降，MDA的表达上升，能够通过影响胃黏膜上皮细胞的损伤修复能力，导致胃黏膜上皮细胞肿瘤基因突变，最终促进早期胃癌的发生和中晚期胃癌进展。李珏等[13]研究者也发现，在胃癌患者中GSH-Px的表达可下降40%以上，同时在合并远处转移或腹腔内淋巴结转移的患者中，GSH-Px的表达下降更为明显。在探讨SOD、GSH-Px、MDA的表达与胃癌患者临床分期的关系中，发现在临床分期较高的患者中，其SOD、GSH-Px表达水平可进一步下降，而MDA表达水平进一步上升，提示了SOD、GSH-Px、MDA的表达与胃癌患者临床分期的关系。结合其他文献报道[14-15]，分析其原因可能与以下两个方面有关：①SOD、GSH-Px的表达水平下降能够影响胃黏膜上皮细胞的浸润能力，导致肿瘤浸润深度的增加，促进了胃黏膜肌层组织的浸润和临床分期的进展；②MDA的表达水平上升，能够影响游离氮气自由基或氧气自由基的活性，促进其对于肿瘤细胞上皮-间充质转换的病理进程的进展，进而提高胃癌患者的临床分期。

综上所述，在胃癌患者血清中，SOD、GSH-Px的表达水平均下降，而MDA的表达水平上升，SOD、GSH-Px、MDA的表达与胃癌的发生发展有密切关系，且与临床分期有关。对于SOD、GSH-Px、MDA的表达与胃癌患者预后的关系有待进一步的研究。