桑枝屑不同添加量对桑黄的生物转化率和质量的影响

施阳阳 蒲 彬 刘燕林 叶瑞兴 卢 红 吴丽莉 左少纯

(1.新疆和田蚕桑科学研究所，新疆 和田 848000； 2.新疆和田玉圣科技有限责任公司，新疆 和田 848000)

桑黄因寄生于桑树等阔叶树上的一种多年生药用真菌而得名，别称桑臣、桑耳、桑黄菇[1]，又称作“森林黄金”。《本草纲目》和《中药大辞典》等均有记载桑黄的药用功效，现代医学证明，桑黄具有滋补强壮、延年益寿、养生美容、提高机体免疫等功效，不同树种的桑黄活性物质含量差异较大，以桑树桑黄含量最高[2-4]。桑黄多糖能抑制肿瘤细胞的生长和转移，是国际公认的最有效抗癌真菌，具有较大的药用价值和开发潜力[5]。桑枝富含纤维素、粗蛋白等多种营养物质，同时桑枝富含有铁、钙、铜等16种矿物质元素，尤其以硒的含量高。作为蚕桑副产物，试验用桑枝栽培桑黄,不仅是开拓了一条变废为宝的途径,而且对促进蚕桑产业实现可持续发展具有重要的意义。

1 材料与方法

1.1 供试菌株

野生桑树桑黄采自新疆南部地区桑树上，取子实体内部组织，经分离接种至PDA培养基培养得到桑黄母种。经DNA测序法鉴定[6-8]，测序结果经美国国立生物技术信息中心(National Center of Biotechnology Information, NCBI)数据库比对，与数据库桑黄菌种相似度为98%，经分离鉴定，结合文献资料，判定该野生桑树桑黄为Inonotuslinteus[9]，与裂蹄木层孔菌(Phellinuslinteus)为同种异名。

1.2 供试材料

新鲜桑枝木屑经堆积发酵7d处理，棉籽壳、麸皮、白砂糖、石膏粉、生石灰。

图1 野生桑黄的采集与分离

1.3 供试培养基

试验设5配方组配方(表1)，每配方组500袋，桑树品种为和田白桑，选用新鲜、干燥、无霉变、无虫蛀的桑枝，粉碎备用。

表1 供试培养基配方

注：“-”表示未添加。

1.4 试验方法

1.4.1 栽培袋的制作及接种

先将桑枝屑、棉籽壳和麸皮按比例均匀混合，将白砂糖、石膏粉、生石灰溶解后拌入培养料中，含水量调制50%～65%，pH调制6.0～7.0，充分搅拌均匀，选用高压聚丙烯菌袋(17.00cm×38.00cm×0.05cm)，装袋(每袋料重500g),常规灭菌100℃，12h，灭菌完毕后，待料冷却下来后，取出进行接种。

1.4.2 菌丝培养及生长情况观察

将接种后的菌袋，置于室内按常规进行避光培养,室温控制在20℃～28℃,空气相对湿度65%～70%,每隔7d翻1次菌袋，观察菌丝的生长情况，若有杂菌出现,及时将感染杂菌的菌袋移开。

1.4.3 桑黄子实体和孢子生长情况观察

当菌丝长满菌袋时进行出黄管理, 出黄管理要采用喷雾设施给予桑黄补湿，观察子实体和孢子的生长情况,若有杂菌或病虫害出现,要及时进行处理或防治。

1.4.4 采收

当桑黄菌盖不再增大，此时应采收。统计时每配方组随机选取50袋的桑黄子实体，于60℃烘干至恒重，用于产量和质量的分析。

1.4.5 数据的测定和处理

桑黄的生物学转化率=(鲜子实体重/培养料干重)×100%。桑黄子实体多糖测定，用硫酸-蒽酮分光光度法方法进行[10]，所有数据均采用spss13.0系统进行整理和统计分析。

2 结果与分析

2.1 不同培养基的桑黄菌丝生长情况

从表2中可以看出，除了C配方组和D配方组的菌丝平均生长比对照配方组的慢，其他配方组的菌丝平均生长速度均大于对照配方组，A配方组菌丝平均生长速度最快，为0.36 cm·d-1，D配方组的菌丝平均生长速度最慢为0.27 cm·d-1。随着桑枝屑量的减少，桑黄菌丝生长速度随之下降，添加桑枝屑的A配方组和B配方组的菌丝生长状况优于对照配方组。除A配方组的感染杂菌率低于对照组为2%，其他配方组均高于对照组，随着麦麸的添加量的增加感染杂菌率逐渐增多，D配方组的染菌率最高，为11%。

表2 不同培养基的菌丝生长情况

2.2 不同培养基的桑黄子实体和孢子生长情况

各培养基的桑黄子实体均能正常生长,形状为半圆形,偶见马蹄形,外观形态正，光泽均匀一致,形态特征正常。从表3中可以看出，除了C配方组和D配方组的桑黄子实体的速度小于对照配方组，其他配方组的桑黄子实体生长速度均大于对照配方组，且随着桑枝屑量的增加，桑黄子实体的生长速度相应增加，各配方组出黄率均在92.0%以上，而A配方组的桑枝屑培养基桑黄的出黄率最高，达到99.8%。

表3 不同培养基的子实体和孢子生长情况

2.3 不同培养基的桑黄产量和质量比较

从表4可以看出，A配方组、B配方组的桑黄子实体平均产量、子实体最高产量、平均生物学转化率均高于对照配方组，而C配方组、D配方组的桑黄子实体平均产量、子实体最高产量、平均生物学转化率均低于对照配方组，各配方组分的子实体多糖含量却都高于对照配方组，随着桑枝屑量的减少，各配方组的桑黄子实体平均产量、子实体总产量、平均生物学转化率有所降低。

表4 不同培养基的桑黄产量和质量

3 小结与讨论

试验结果表明,随着桑枝屑代料中的桑枝屑量的增加，各配方组桑黄菌丝生长速度、桑黄子实体的生长速度、桑黄子实体平均产量、子实体最高产量、平均生物学转化率均相应的增加，桑枝屑添加量为80%时，其生物学转化率和产量最高，因此可以得出桑枝屑代料培养基栽培桑黄的最佳配方组为A配方组，在以后的生产中，桑枝屑的添加量控制在80%以内为宜。

实验结果还表明,桑枝屑代料栽培的桑黄的多糖含量却显著性高于对照配方组,而多糖正是桑黄最主要的药理活性成分,原因之一是桑枝中营养成分丰富,存在多糖、维生素、微量元素等特殊诱导因子,促进桑黄胞外多糖的合成。