microRNA-378表达结合DW-MRI对老年直肠癌腹腔镜术前T、N分期的评价

马隽 王凯宇 于鹏飞 杨学良 李洋

(1清华大学附属垂杨柳医院，北京 132011；2北华大学附属医院；3吉林大学第一医院胸外科)

直肠癌目前主要治疗方法是手术切除，辅以放化疗及免疫治疗等方式，治疗前对肿瘤生物学行为(包括肿瘤侵犯深度、肿瘤微循环特性、局部淋巴结转移和远隔转移)的准确评估是提高疗效的关键。本研究分析直肠癌新辅助治疗病人外周血中micro RNA(miR)-378及磁共振弥散加权成像(DW-MRI)的检查评价直肠癌的T、N分期，为腹腔镜手术安全性、有效性提供依据。

1 材料与方法

1.1 研究对象 2016年1月至2019年5月清华大学附属垂杨柳医院及北华大学附属医院经纳入、排除及剔除标准筛选病理证实的直肠癌患者60例，男36例，女24例，年龄62～85〔平均(61.58±5.80)〕岁，随机分成两组各30例。在采用奥沙利铂进行新辅助治疗后A组行DW-MRI检查，B组行外周血miR-378检测、DW-MRI检查。

1.2 检查方法 采用德国西门子公司1.5T磁共振，使用盆腔线圈行MRI。 检查前1 d口服磷酸钠盐口服液150 ml清洁肠道，检查前禁食4 h以上，女性患者应取下节育环。检查前肌注山莨菪碱注射液10～20 mg。40℃左右温水200～500 ml保留灌肠。将患者血清送至检验科，检测外周血中miR-378的表达。

1.3 评估指标 直肠癌术前MRI分期〔依照2012年美国国立综合癌症网络(NCCN)原则〔1〕〕由两名经验丰富医师进行术前分期评估。

1.4 统计学分析 采用SPSS17.0统计学软件行Kappa一致性检验(Kappa值<0.45，说明两者的一致程度很差，Kappa在0.45～0.7之间说明两者的一致性中等，可以实行一般性评估，Kappa值>0.7，说明一致程度很好)、t检验。

2 结 果

2.1 直肠癌DW-MRI主要表现 受侵犯的肠壁环周不同程度增厚、肠腔内肿物凸凹不平呈菜花状、肠腔变窄。T1、T2及弥散加权成像(DWI)上分别表现为中等稍低信号、较高信号、明显的高信号。

2.2 对直肠癌T分期的评价 B组直肠癌T分期总准确率86.67%(26/30),其中4例分错，分别为T1期2例过分期；T2期中2例分期不足；T3期、T4期基本一致。T1期准确率61.43% (5/7)，T2期80.00% (8/10)，T3期100.00% (9/9)，T4 期100.00% (4/4)。Kappa 值为 0.842，显示有较高一致性。见表1。A组T分期准确率为63.33%(19/30)，B组较A组准确率显著高(χ2=4.36,P<0.05)。

2.3 对直肠癌N分期的评价 B组N分期准确率为96.67%(29/30),1例分错，N0期、N1期准确率为100.0%，N2期为88.89%(8/9)。Kappa 值为 0.814，显示有较高一致性。见表2。A组N分期的准确率为76.67%(23/30)，B组较A组准确率显著高(χ2=5.19，P<0.05)。

表1 B组T分期的评价(n)

表2 B组N分期(n)

2.4 良恶性淋巴结患者表观扩散系数(ADC)值比较 b=1 000 s/mm2时，其ADC值的诊断阈值为0.985×10-3mm2/s，良性淋巴结253个、ADC值为(0.94±0.17)×10-3mm2/s，恶性淋巴结70个，ADC值为(0.81±0.12)×10-3mm2/s，良性淋巴结ADC值显著高于恶性淋巴结(P<0.05)。

3 讨 论

直肠癌仍以外科手术为主要的治疗方法，2012年NCCN指南强调对直肠癌的治疗应该进行更加个体化、多样化的治疗方案，但外科手术的选取仍依赖直肠癌术前的准确分期，所以术前准确的分期对提升患者术后生存率非常重要〔2〕。高分辨率磁共振具有较高的软组织分辨率，对于直肠壁(黏膜层、黏膜下层及肌层)能较清晰地显示，并且对于腔内肿瘤病变形态和肠壁浸润深度也能够清楚地显示，对邻近组织的转移、肿瘤的浸润深度、淋巴结有无发生转移及周围脏器的受侵与否，均能较清晰显示〔3〕。而且通过矢状位T2图像，对于直肠癌肿距肛门缘的距离可以较准确测量，术前准确判断手术的远切缘，大幅度地降低术后病灶的复发率，对于手术保肛率也有提升以保障患者的生活质量，提供了直观而可靠的依据。DWI是经宏观成像反映活体组织中水分子的微观扩散运动，也就是组织内水分子的弥散情况〔4〕，是非侵入性的对组织内水分子运动进行监测的一种有效方式，使得水分子可视化与量化，对水分子弥散障碍能够较早地检测，早期发现病变。当原发病灶发生转移时，首先是淋巴结内细胞数量增多，细胞之间间隙减小，能够大幅度降低组织内水分子运动，使水分子的弥散出现障碍，DWI表现为明显的高信号，ADC值下降。因此通过测量淋巴结的ADC值，能够更早更准确发现转移，对分期至关重要，对手术方案的选取极其重要。对于T、N分期较晚并且要采取腹腔镜手术的结直肠癌病人，术前最重要的是采用新辅助治疗来降低肿瘤分期。目前研究发现miRs在直肠癌病灶呈现高表达状态，与直肠癌的发生具有很大关系〔5〕。在直肠癌侵袭中，发现病灶周边组织也呈现高表达〔6〕。其在直肠癌的早期诊断、手术方案的选取及术后患者预后中也有重要的作用〔7〕。其诊断准确性优于目前常见的临床血清标志物糖类抗原(CA)19-9和癌胚抗原(CEA)〔8〕，外周血中miRs的含量对于恶性病变的早期筛查及诊断有较高的准确性，具有标志性意义。Wang等〔9〕用实时荧光定量PCR发现miR-378在原发性直肠癌与转移性直肠癌患者的血清中含量都比正常人高，这可能与癌症细胞选择性释放miR-378入血有关〔10，11〕。研究发现直肠癌患者miR-378低表达者肿瘤体积更大，淋巴结转移阳性率更高，临床分期更高级，总生存期更短〔12〕。miRNA有可能成为直肠癌临床诊断及分期、术前辅助化疗效果、预后评价的生物指标〔13〕。本研究发现外周血中miR-378联合DW-MRI检查能够准确评价直肠癌新辅助化疗后T、N分期，为腹腔镜手术提供安全、有效的依据，是简单、快捷、无辐射、可重复操作的无创方法，易被广大患者接受。