少弱精子症患者精液常规参数与精子形态特点的分析研究

蒋丹丹， 张盼盼， 西尔艾力·买买提， 毛吾兰·买买提依明， 白生宾， 阿地力江·伊明

(新疆医科大学基础医学院， 乌鲁木齐 830011)

少精子症是指禁欲2～7 d，精子浓度小于15×106个/mL，弱精子症是指禁欲2～7 d，前向运动精子率<32%或前向运动+非前向运动精子率<40%，当两者同时发生称为少弱精子症[1]。资料显示，约20%的育龄夫妇受到不育不孕的困扰，其中男性因素占50%[2]。精液异常导致的男性不育约占70%～80%[3]，其中少精子症(oligozoospermia)、弱精子症(asthenozoospermia)、少弱精子症(oligoasthenozoospermia)分别占男性不育的10%、30%和40%[4-6]，由于精液异常导致男性不育的患者数量呈逐年上升趋势。精液质量分析是评估男性生殖功能的一项重要指标，为少、弱及少弱精子症的临床诊断和治疗提供了重要依据[7]。本研究采用计算机辅助精液质量分析系统(computer assisted sperm analysis，CASA)对411例男性精液进行常规检查，对检查结果进行整理分析，以探究少、弱和少弱精子症患者精液常规参数与精子形态改变特征以及精液质量的情况，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选择2017年7月-2018年4月在新疆医科大学第一附属医院产前诊断中心就诊的411例男性为研究对象，年龄21～50岁，平均年龄(32.44±5.50)岁。

1.2 仪器与试药WLJY-9000型彩色精子质量检测系统(北京伟力仪器公司)，HH-W420型恒温水浴锅(金坛市白塔新宝仪器厂)，MACRO型计数板(南京凯尔仪器有限公司)，精子活体染色液(索莱宝公司)。

1.3 测定方法

1.3.1 精液样本外观、体积、pH值等指标的测定方法 研究对象禁欲2～7 d，采用手淫法收集精液，肉眼观察精液颜色，记录标本接收时间及精液体积。标本置于37℃恒温水浴箱中，液化后观察液化状态，同时记录液化时间，观察精液黏稠度情况，采用精密pH试纸测定各组精液pH值。

1.3.2 精子活力、密度及存活率的测定方法 取“1.3.1”项下液化后的精液样本5 μL，使用WLJY-9000型彩色精子质量分析系统配合载物台温控仪以及MACRO 计数板对所有标本进行前向运动的精子个数及比例、非前向运动的精子个数及比例、不活动的精子个数及比例、精子总数、精子密度的检测。精子存活率的测量采用伊红-苯胺黑染色法，取50 μL精液与等体积的伊红-苯胺黑悬液混合，制成涂片后油镜下观察并计数染色和非染色的精子，计算非染色精子所占的百分率。

1.3.3 精子形态的测定方法 采用CASA系统检测并计算各组精子平均大小、平均周长、正常个数、畸形个数、头部畸形、体部畸形、尾部畸形、混合畸形个数及比例等。

1.4 分组方法根据《WHO 人类精液检查与处理实验室手册》[1](第5版)判断标准分为正常组：前向运动精子率≥32% 或前向运动+非前向运动精子率≥40%，精子密度≥15×106个/mL；少精子症组：精子密度<15×106个/mL；弱精子症组：前向运动精子率<32%或前向运动+非前向运动精子率<40%；少弱精子症组：前向运动精子率<32%或前向运动+非前向运动精子率<40%，并且精子密度<15×106个/mL。

2 结果

2.1 各组精液前向运动精子率、前向+非前向运动精子率、精子总数、精子密度的比较根据测定结果将411例研究对象分为正常组(106例)、少精子症组(105例)、弱精子症组(150例)及少弱精子症组(50例)。与正常组比较，少精子症组、弱精子症组和少弱精子症组前向运动精子率、前向+非前向运动精子率、精子密度降低，少精子症组、少弱精子症组精子总数降低，弱精子症组精子总数升高，差异有统计学意义(P<0.05)。与少精子症组比较，弱精子症组和少弱精子症组前向运动精子率、前向+非前向运动精子率降低，弱精子症组的精子总数、精子密度升高，差异有统计学意义(P<0.05)。与弱精子症组比较，少弱精子症组前向+非前向运动精子率、精子总数、精子密度均降低，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 各组精液前向运动精子率、前向+非前向运动精子率、精子总数、精子密度比较

注：与正常组比较，*P<0.05； 与少精子症组比较，#P<0.05； 与弱精子症组比较，△P<0.05。

2.2 各组精液相关指标的比较正常组与少精子症组的精液外观以灰白色为主，弱精子症组、少弱精子症组的精液外观以乳白色为主。与正常组比较，弱精子症组和少弱精子症组的精液外观有差异，少精子症组、弱精子症组和少弱精子症组的精液体积、精液不液化出现率增加，精子存活率降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。各组间精液黏稠度、pH值比较，差异无统计学意义(P>0.05)。与少精子症组比较，弱精子症组和少弱精子症组精子存活率降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与弱精子症组比较，少弱精子症组精子存活率降低，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2、3。

表2 各组精液外观、液化状态、黏稠度的比较/例(%)

表3 各组精液标本体积、pH值、存活率的比较

注： 与正常组比较，*P<0.05； 与少精子症组比较，#P<0.05； 与弱精子症组比较，△P<0.05。

2.3 各组精子形态的比较与正常组相比，少精子症组、弱精子症组和少弱精子症组的精子平均大小、平均周长、正常个数、尾部畸形个数减小，精子畸形个数、精子头部畸形个数、体部畸形个数和混合畸形个数增加，差异有统计学意义(P<0.05)。与少精子症组相比，少弱精子症组的正常个数、尾部畸形个数减少，头部畸形、体部畸形个数增加，差异有统计学意义(P<0.05)，见表4。

表4 各组精子形态的比较

注：*与正常组比较，*P<0.05； 与少精子症组比较，#P<0.05。

3 讨论

少、弱及少弱精子症是男性生殖系统的常见疾病，是男性不育症的主要病因，精液质量是诊断、治疗和评估男性生育能力的重要依据。精液质量除精子密度和活力外，还包括精液体积、液化状态、pH值等内容，是临床对少、弱及少弱精子症和男性不育症的首要检测项目[8]。目前CASA是比较普遍的检测男性精液质量的方法，具有客观、操作简便、重复性好，减少人工误差等优点[9]。

健康男性液化精液多呈灰白色，随着禁欲时间、精子浓度的改变，颜色也有不同，弱精及少弱精子症患者精液外观与健康人群存在一定差异。正常男性一次排精量在2～5 mL，过多或过少都是疾病的表现，本研究结果提示少、弱及少弱精子症患者精液体积增多的原因与附属腺出现炎症或炎性渗出相关。由于精液不液化导致射精后精子不能通过宫颈到达输卵管与卵子结合，是导致男性不育的重要原因[10]。精子存活率作为评估精液质量的一个重要参数[11]，可以反映精子的生存能力和质量优劣，精子存活率降低可以降低受精能力[12]，本研究结果表明少、弱及少弱精子症对存活率的影响程度存在差异。精子具有异质性，即使精液正常的男性也存在异常形态的精子，且精子形态与精子活力、精子密度之间也存在密切的关系[13]。精子形态异常可导致精子膜破坏、精子代谢异常、活力减弱，导致精子质量下降，因此精子形态检测可作为评价精液质量及男性生育力高低的指标[14-15]。

综上所述，本研究通过对精液常规和形态学改变的检测与分析，发现精液常规检测与精子形态学改变特征可有效评价精液质量，为临床诊治和疗效提供重要参考。