影响兽医实验室抗体检测结果因素及对策

杨先霞

摘 要：在我国科学技术飞速发展的社会背景下，兽医的抗体检测工作也得到了很大的进展，而兽医实验室作为动物疫病预防和控制的关键部门，必须要引起相关部门的重视。因为不同的动物抗体检测实验需要不一样的检测环境，而兽医实验室则会直接影响到抗体检测结果的准确性，本文从当前兽医实验室存在的问题入手，对其影响抗体检测结果的因素及对策进行了深入的研究和探讨。

关键词：影响;兽医实验室;抗体;检测结果;因素;对策

一、兽医实验室存在的问题分析

1.缺乏实验室技术人员

通过调查研究发现，各区县的兽医实验室的工作人员大多数都是以兼职的身份工作的，这些工作人员的流动性大，缺乏专业性和技术性，在这种兽医实验室工作人员严重短缺的情况下，一些动物的抗体检测工作根本无法有效的开展，有的实验室只有2名工作人员，并且还身兼数职，不以实验室的工作为主，也有一些区县的兽医实验室只有一名工作人员，这样更无法承担起相应的动物抗体检测工作。再加上这些工作人员不但能力有限，而且缺乏学习和进修的机会，专业能力不能满足新时期兽医工作的需要。

2.缺乏兽医实验室建设经费

在我国经济建设飞速发展的今天，动物的抗体检测工作虽然得到了重视，但在兽医实验室的经费投入上却存在着严重的不足，一些区县表面上将动物的抗体检测及各种疫病监测工作列入经费支持的范畴，但实际拨下来用于兽医实验室建设的经费却非常的少，这就使兽医实验室因为缺乏相应的仪器设备和试剂等等不能进行相应的抗体检测工作，同时也会使一些抗体检测的结果缺乏准确性和可信性，严重制约着兽医抗体检测工作的开展。

3.缺乏相应的仪器设备

上面已经提到，因为缺乏必要的资金支持，使兽医实验室出现缺乏先进的仪器设备的现象。但在现实情况下，许多兽医实验室虽然已经配备了相应的仪器，但因为这些设备采购年限过长，在工作中会出现各种各样的故障和问题，这种设备老化及缺乏维护保养的现状，也成为影响兽医实验室抗体检测结果的一个重要因素。

4.缺乏严格的管理制度

兽医实验室的抗体检测是一项非常严肃工作，只有建立健全相应的管理制度，才能保证其检测结果的可信度，所以作为管理者必须要从当地兽医实验室的现状出发，制定相应的管理制度，提高工作人员的责任心和使命感，提高大家的工作能力，同时开展全面的学习与培养工作，只有这样才能保证兽医实验室工作的顺利进行，提高抗体检测结果的准确率。

二、影响兽医实验室抗体检测结果因素及对策研究

通过对兽医实验室中存在的问题分析发现，要想保证动物抗体检测工作的高效发展，就必须要从影响其检测的各项因素进行分析，并找出相应的解决办法与对策。

1.抗体检测试剂的影响

试剂选择是保证抗体检测质量的关键要素，但不同厂家的试剂在使用效果上仍存在差异， 在购买与ELISA 检测相关试剂时应引起注意，尽量购买与 ELISA 检测试剂盒相配套的化学试剂，注意 ELISA 检测试剂盒相配套的化学试剂生产日期及保存环境温度。保存方式不对均会影响 ELISA 检测结果，过期的试剂也会出现假阳性。

2.抗体检测样本的影响

被检测的样本应该是新鲜的，尤其是血清样本，在采集过程中，应使用无菌采集管和采集针，分离血清后要分装到无菌 EP 管中，由于被检样品的污染可以导致 ELISA 敏感性和准确性降低。因此，采集样品时应注意无菌操作，减少被检验品的污染。被检样品的保存温度要适宜。尤其是抗体检测，样品要进行分装若干份，严禁反复冻融样品，被检样品在反复冻融过程中会破坏蛋白质结构，在检测过程中易形成假阳性。因此，被检样品在严禁反复冻融。

3.抗体检测中人为因素的影响

人为因素也是影响兽医实验室抗体检测结果的主要因素，人为因素主要表现在加样、 温育、洗板、显色、结果判定等众多因素均可以影响实验结果。

（1）加样操作因素。不同类型抗体检测技术被应用于动物传染性疾病抗体效价检测中，在检测过程中加样成为影响动物传染性疾病抗体效价主要因素。 尤其在添加样品过程中，一定要注意加样过程中不能出现气泡，加样要均匀，加样过程中一定要定量，一般为 50μl 样品， 轻轻加到被检样品孔。另外，要注意样品在检测前一定要解冻完全，样品在使用之前提前拿出来，在室温解冻后，混合均匀后，再进行检测。

（2）孵育时间与温度。ELISA 检测相关抗体时，被检样品在加完后，一般进行孵育，使被检样品和所包被抗原或者抗体更好的结合，在被检样品和所包被抗原或者抗体更好的结合时需要合适温度与时间。 不同类型抗体检测过程中应参照说明书要求进行孵育，孵育时间和温度严格按照说明书推荐 进行操作。使ELISA 包被的抗原或者抗体失活后，使被检样品不能与抗体或者抗原结合形成抗原复合物，严重影响实验结果。

（3）洗板次数因素。ELISA 检测相关抗体时，加完二抗进行孵育后需进行洗板，一般情况性有手工洗板和机器洗板两种方式。尤其在洗板过程中，洗涤次数应该合理，洗涤次数过多容易洗掉反应结合的复合物，洗板次数过少导致洗涤不干净，容易造成二抗稀释液的残留，影响反应结果。在洗涤完后注意拍板，把多余洗涤液甩出去，以免影响实验结果。

（4）结果判定因素。在检测过程中，显色反应结束，加终止液，将酶标板放在酶标仪上读取结果要在 15min 内完成，设定的波长要与试剂说明书保持一致，酶标仪使用前先预热 15～30min 后，空白板自检 1～2 次再进行样品测试。

4.抗体检测环境的影响

温度、湿度等外界的环境对 ELISA 检测结果影响极大。实验室温度过高或过低都会影响试剂的稳定性、 敏感性和样品与试剂的有效结合， 实验室检测时适宜的温度是 20～25℃ 。

三、结语

总而言之，兽医实验室是进行动物疫病检测、预防和控制的主要机构之一，承担着重要的学术调查研究以及动物疫病的科学防控工作，只有进一步提高兽医实验室的技术支撑，才能保证其在抗体检测实践操作过程中减少误差，提高实验的准确性和高效性，使兽医实验室的功能发挥到最大化。

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