水产品中铅的检测能力验证实操

□ 马莉 杨帆 新疆维吾尔自治区水产科学研究所 农业部西北地区渔业资源环境科学观测实验站

能力验证是利用实验室间比对，按照预先制定的准则评价参加者的能力［1］。其为判断和监控实验室能力的有效手段，是实验室通过外部措施补充其内部质量控制方法的技术，也是确保实验室质量管理体系持续改进的有效措施之一［2］。

铅元素广泛存在于自然界中，人类会通过食物链摄取铅，也会从被污染的空气中吸入铅。铅对神经系统的损害主要是能够引发末梢神经炎，使人出现运动和感觉障碍。当儿童血液中的铅含量超过60μg/100mL时，将会出现智能发育障碍和行为异常的症状，同时，铅对儿童的骨骼生长发育也会造成损害。无公害食品及绿色食品的认证过程中都将铅设为必检项目：GB 2762-2017《食品安全国家标准 食品中污染物限量》中和NY 5073-2006《无公害食品 水产品中有毒有害物质限量》中均规定，水产品中铅的限量指标为≤0.5mg/kg［3-4］；NY/T 842-2012《绿色食品 鱼》中规定水产品中铅的限量指标为≤0.2mg/kg［5］。因此，提高对水产品中铅的检测准确度十分必要，参加能力验证也是反映检测数据是否准确的一种有效手段。

1 材料与方法

1.1 主要仪器与设备

原子吸收分光光度计（赛默飞，CE 3500）；微波消解仪（CEM，MARS 6）；超纯水仪(Millipore，Q10)；天平（赛多利斯，BS124S）。

1.2 主要试剂

1000μg/mL铅标准溶液（中国计量科学研究院，GBW 08619-15073）；硝酸（国药集团化学试剂有限公司，优级纯）；过氧化氢（国药集团化学试剂有限公司，分析纯）；磷酸二氢铵（国药集团化学试剂有限公司，优级纯）。

本次能力验证样品共2份，各10g左右，且均为肉糜状鲜样，分别装于棕色玻璃瓶中。两份样品中，一份为考核样本，另一份为干扰样本，能力验证工作要求发放样品96小时内报告测试结果。2份样品结果判定时，仅评价考核样本的检测结果，干扰样本不作判定。本单位样品编号分别为Pb48和 Pb57。

1.3 方法

1.3.1 检测依据

采用国标方法GB 5009.12-2017《食品安全国家标准 食品中铅的测定》第一法，石墨炉原子吸收光谱法进行铅的检测。

表1 样品微波消解程序

表2 石墨炉升温程序

1.3.2 检测前的准备工作

所有实验中使用的玻璃器皿均经硝酸溶液（1+4）浸泡过夜，超纯水冲洗干净后晾干备用，注意要充分冲洗，以避免污染，从而降低样品空白值，提高检测时的稳定性。试验用水按照GB/T 6682-2008《分析实验室用水规格和试验方法》的规定使用一级水。

1.3.3 标准溶液的配制

准确吸取2.50mL浓度为1000μg/mL的铅标准溶液置于25.00mL容量瓶中，用1%硝酸溶液稀释至刻度并摇匀，此时溶液浓度为100.00μg/mL；再经多次稀释至浓度为20.00μg/L的铅标准溶液，备用。

1.3.4 样品前处理

准确称取肉糜样品1.000g，同时做3个平行样，放入聚四氟乙烯消解罐中，加8.00mL硝酸过夜（冷消解）。次日，加入2.00mL硝酸和1.00mL过氧化氢（30%），装罐后放入微波消解仪中进行消解（消解程序见表1）。冷却后开盖于150℃的电热板上继续赶酸，至罐内液体剩余约0.25mL左右，用超纯水定容至10.00mL容量瓶中，混匀待测。同时做样品空白对照和标准样品消解。标准样品（缢蛏：国家海洋局第一海洋研究所，AK0248）称样量为0.150g，做7个平行样，消解赶酸后定容至25.00mL容量瓶中。

2 测定与结果

2.1 上机测定

主标液：20.00μg/L铅标准工作溶液；稀释剂：1%硝酸溶液；基体改进剂：20g/L磷酸二氢铵溶液；标准品及样品进样体积：20μL；基体改进剂进样体积：5μL。波长：283.3nm；通带：0.5nm；信号类型：峰高；背景较正：塞曼。标准工作曲线绘制为仪器自动稀释配制，石墨炉升温程序见表2。

干燥阶段分两步进行，选用80℃和100℃进行两步干燥。灰化和原子化阶段采用仪器自带的搜索最佳优化条件，选用700℃为灰化温度，1400℃为原子化温度。

图1 工作曲线

2.2 检测结果

依照上述方法条件，建立工作曲线方程Abs=0.01427C+0.0060，相关系数r=0.9996（见图1）。对样品进行测定，编号为Pb48的样品3平行结果为17μg/kg，相对标准偏差为6.9%；编号为Pb57的样品3平行结果为54μg/kg，相对标准偏差为3.9%，结果见表3；国家标准样品缢蛏（AK0248）6平行样品检测结果为1.36mg/kg，相对标准偏差为3.8%，检测结果在标准样品的标准值区间1.29±0.13mg/kg范围内，见表4。结果表明，该验证实验的精密度、准确度都能达到国家标准的要求，测定结果准确可靠。

2.3 能力验证结果

本次能力验证中，重金属检测结果按Z比分数法统计，∣Z∣≤3判定为满意结果，∣Z∣＞3判定为不满意结果，3≥∣Z∣＞2需开展自查。

表3 样品测定结果（n=3）

表4 标准样品测定结果（n=6）

本单位样品编号为Pb57的样品检测结果54μg/kg的∣Z∣为1.75，判定结果为满意。编号为Pb48的样品为干扰样品，不做判定。

因此得出结论，本实验通过了农业部2018年水产品中铅的检测能力验证。

3 检测注意事项

能力验证样品与其他常规样品差异较大，原因为能力验证样品的某种成分可能含量较高，故检测的称样量和消解后定容体积往往具有不确定性，所以推荐在正式测定前进行预实验。在样品量足够的情况下，可先做3个平行样，上机确定样品大概浓度范围后再进行正式检测，避免一次性将样品用完，由于称样量以及定容体积不合适，造成检测结果有偏差。

铅广泛存在于环境中，检测时极易受到污染，因此整个实验过程中一定要防止污染，例如化妆品中也可能含有铅，这就要避免其他人员接触对样品检测造成污染。同时，所用到的试剂溶液可上机测试铅含量，若发现样品空白值较高（一般来说，铅的空白测定吸光度在0.02以下）则应考虑实验用水和试剂是否受到污染。用水最好为实验室一级水，所用试剂除要考虑试剂级别外，不同生产厂家的试剂也具有一定差异，同一厂家不同批次的药品试剂可能也会存在差异。

检测样品若发现重现性、平行性不好等情况，在排除样品处理过程受污染的前提下，可考虑是否是进样问题，此时可检查进样针注入位置是否合适；进样结束，针头是否有溶液挂壁现象，如有挂壁，则表明实际进样体积不准，这关系到样品检测结果准确性，因此在检测过程中，要经常注意进样情况。

如测定标准样品的结果与实际值不符，则应考虑浸泡容器的酸液是否受到污染。最简单的检查方式，即取一只烧杯，加入少许硝酸放在电热板上加热至近干，用水冲洗烧杯壁合并洗液定容后上机测定，若此溶液铅含量高，则推断浸泡容器的酸液被污染。

检测过程所用的标准样品，最好通过改变称样量和定容体积的方法，将溶液测定浓度调节至与能力验证样品浓度相近，这样更能反映样品检测结果的准确性。实验中，可考虑购买不同浓度的标准样品，从中选取一种与能力验证样品浓度接近的标准样品进行同步检测。

检测时，通过改变样品称样量以及定容体积的方式，尽量使样品的检测浓度位于标准曲线中段，此时样品结果较为可靠。如样品检测浓度靠近标准曲线下端，接近检出限准确度不高；如样品浓度靠近标准曲线上端，吸光度过高时，样品检测浓度可能偏低。

设定石墨炉程序时，由于消解后的样品具有一定的酸度且加入了基体改进剂，为避免样品在干燥阶段发生液体暴沸飞溅，可选取进样溶液沸点附近温度，将干燥温度分别设为两步，采取缓慢阶段升温和延长保温时间的方式保证检测结果的准确性。灰化温度和原子化温度最好进行优化条件搜索，选取在保证吸光度稳定且仪器响应信号值高的温度，在响应值接近的温度区间选取较低的温度，因为灰化温度和原子化温度会直接影响石墨管的使用寿命。

4 小结

本次能力验证采用国标方法GB 5009.12-2017《食品安全国家标准 食品中铅的测定》进行测定，采用方法包括石墨炉原子吸收光谱法、电感耦合等离子体质谱法、火焰原子吸收光谱法和二硫腙比色法4种检测方法［6］。本单位采用石墨炉原子吸收光谱法进行水产品中铅的检测，用标准样品同步实验作为实验室内部质量控制手段，在能力验证举办方发放样品的96小时内按时提交了检测结果并获得满意评定结果。这表明，用此方法进行铅的检测，数据可靠有效。

通过参加能力验证活动，有利于实验室实现自我评定，是实验室检测质量的反映。参加能力验证获得通过，是增强用户对实验室检测能力信任度的一个有力证明，同时增强了实验室对所出具数据的自信心。