血站核酸检测关键控制点浅析

黄唯　来祝檩　韩惠云

[摘要] 血站是采集、储存血液，并向临床或血液制品生产单位供血的医疗卫生机构。随着医疗行业的迅速发展，临床献血与血制品的管理与越来越走向正规化。血站的质检是血站的管理核心，血制品合格输入关系着千千万万家庭的生命安全。目前临床常见血液筛查方式是血清学检测和核酸检测两类，能够检测出献血者是否感染艾滋病、梅毒、乙肝等病原体，确保血制品安全，本文探讨核酸检测在血站的应用。核酸检测可直接检测出病原体的基因组，提高血液检测的工作效率，降低病原体的传播。开展血站核酸检测是保障血液安全的管基金措施，在血站核酸检测中充分做好实验室管理，严格各项无菌操作，能够保障检测的精密度，不断提高血液制品的质量，确保临床今后用血安全。

[关键词] 血站;核酸检测;关键控制点

[中图分类号] R440 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2019）04（b）-0145-02

Analysis of Key Control Points for Nucleic Acid Detection in Blood Stations

HUANG Wei， LAI Zhu-lin， HAN Hui-yun

Jiaozuo Downtown Blood Station， Jiaozuo， Henan Province， 454000 China

[Abstract] Blood station is a medical and health institution that collects and stores blood and supplies blood to clinical or blood product production units. With the rapid development of the medical industry， the management of clinical blood donation and blood products is becoming more and more formalized. The quality check of the blood station is the core of the blood station management， and the qualified input of blood products is related to the life safety of thousands of families. At present， the common clinical blood screening methods are serological detection and nucleic acid detection. It can detect whether blood donors are infected with AIDS， syphilis， hepatitis B and other pathogens to ensure the safety of blood products. This paper discusses the application of nucleic acid detection in blood stations. Nucleic acid detection can directly detect the genome of the pathogen， improve the efficiency of blood testing， and reduce the spread of pathogens. Carrying out blood bank nucleic acid testing is a fund-funding measure to ensure blood safety. In the blood station nucleic acid testing， the laboratory management is fully done， and strict aseptic operations can ensure the precision of testing， continuously improve the quality of blood products， and ensure clinical Use blood safely in the future.

[Key words] Blood station; Nucleic acid detection; Critical control points

隨着无偿献血事业的迅速发展，献血人群也越来越多，输血是抢救和治疗危重患者的重要手段之一，临床献血人群也在逐年增加，为确保血液质量的完好性，血液检测十分重要[1]。血站依据相关规范将采血过程及管理分为很多细节内容，要求每一个环节都应严格管理，确保血制品质量。该站从2014年5月至今已完成30万份核酸样本检测，现结合实际工作，浅谈血站核酸检测实验室需要注意的关键控制点。

1  核酸实验室各区域划分

保证核酸检测结果准确可靠，其重要一点就是防污染，因此要严格按照核酸实验室规范要求合理划分实验室区域。目前该站已建成两个核酸检测实验室，按要求和工作需要均分成三个区域：试剂储存区（一区）、样本处理区（二区）、扩增区（三区）。各区域完全独立，不能相通;各区域具有独立的通风系统：一区到三区压力依次递减，一区、二区保持正压或常压状态，三区保持负压状态。两个核酸实验室分别配备了浩源和华益美两个厂家的核酸检测系统，可以互为备份，以应对紧急情况的发生。

工作人员在实验前应检查各区压力，保持一区>二区>三区，一区、二区保持正压或常压状态，三区处于负压状态。检验人员和物品按照从一区到二区到三区单向流动，不可逆向而行。各区都设有缓冲间，放置工作服和工作鞋，并专区专用，不可将工作服和工作鞋穿到所属区域以外的地方。实验室内所有物品专用，并贴上各区标签，防止混用。

2  核酸实验室操作人员的管理

核酸检测是新兴的分子生物学技术，对检验人员有着严格的要求。核酸室预备检验人员应进行岗前培训，在获得科室负责人同意后进入实验室学习，接受厂家的试剂及设备使用操作培训，可独立操作并经考核合格后方可进入实验室工作。并定期组织实验室功能人员进行业务学校或进修，定期要求每位工作人员进行PPT讲课，讲课内容为实验室工作内容，共同探讨平时工作中遇到的具体问题，大家共同解决，共同提高工作质量。

3  核酸检测实验室质量管理体系

为保证受血者的用血安全以及检验人员的安全，建立了核酸室质量管理体系，它包括管理制度，岗位职责，标准操作规程等。

①管理制度包括核酸实验室防污染及生物安全制度、准入制度和核酸实验室管理制度;每班工作人员记录本班工作任务，做到有据可依、有证可查。

②岗位职责包括标本的接收、保存和处理、标本的核酸检测工作、检验报告的发布、室内质控和室间质评以及检测结果阳性者的告知。

③标准操作规程包括试剂配制操作规程、清洁消毒以及核酸提取和扩增等仪器操作规程。每班人员记录温湿度计的度数，记录冰箱的温度计度数，登记当班标本，取出当天实验须配置和需要使用到的试剂，其余试剂收回冰箱放好。再准备完毕后打开紫外灯消毒，记录消毒灯管使用情况。

④定期消毒处置，每隔段时间使用相关仪器检测标本室及實验室空气指标状况，并根据检测结果进行相应消毒处置。并定期随机抽查实验室工作人员手部卫生状况，对于手部卫生消毒不合格者，实施惩罚制度，提高实验室工作人员无菌原则。

4  核酸检测操作过程

核酸检测标本的质量直接影响检验结果的准确性，因此应采用内含枸橼酸盐或是EDTA抗凝剂的无菌、无DNA酶、无RNA酶、带分离胶的真空采血管。标本留样为5 mL，采集完毕后，应立即慢且轻地颠倒混匀5～8次，4 h之内在低温离心机中进行离心，后保存在2～8℃的冰箱。接收标本的人员如发现标本有严重溶血、脂血、量少以及标本信息不对照的情况，应拒绝接收。标本应在72 h内进行检测，如若不能完成，应将标本置于-20℃以下冻存，再次拿出检验前，标本应提前于2～8℃冰箱或室温条件下复融[2]。

实验过程中，检验人员需注意观察加样吸头是否有堵塞或吸入的标本量不够，有无错加或漏加，并及时处理[3]。拆分试剂包装时注意检查试剂包装是否完好，有无异物，量是否足。切记整个实验过程中，避免手从已开盖的血样标本及试剂上方经过，污染血样和试剂[4]。操作动作轻缓，以免碰倒已开盖的血样标本，造成实验室的污染。处理标本、阴阳性对照、质控品以及试剂耗材时不能使用同一双手套，需及时更换，做到手套专用，不可混用以保证实验质量[5]。严格按照说明书规定进行检测，对可以部分进行复查，对于冰柜取出物品进行检查核对，检查物品的质量，核对物品的名称及有效期。在每个关键位置贴上温馨提示，减少差错发生率。对实验室物品进行统一管理处置。

实验结束后，用75%酒精对实验室进行密集喷洒可有效沉降气溶胶，按比例配制好84消毒液擦拭桌面和地面，10 min后再用清水擦拭桌面清除残留84消毒液。核酸检测设备操作平台用75%酒精喷湿的纱布擦拭完毕后用内置紫外灯照射60 min。当天实验室产生的医疗废物垃圾应及时处理，避免气溶胶对实验室的污染。在实验过程中使用一次性鞋套手套，将接受到的反应管进行扩增分析，在分析完毕后，记录具体结果，并及时发送报告，检查报告无问题时，及时签字，对于检验报告不完整时，及时收回给予纠正后及时发送，并检查报告不全原因，给予针对性处置。实验结束后记录仪器工作时间及完好状况。检验人员离开实验室并开启紫外灯对实验室桌面和空气照射60 min[6]。

血站核酸实验室检测工作的安全有效是血液质量的重要保证。与临床实验室不同，血站实验室出具的接测报告直接关系到血液是否可用于临床，其结果具有非常重要的决策意义。因此应得到检验人员的高度重视，以确保核酸实验的检测质量，保障临床用血安全。在完善各项步骤与物品的管理后，能够有效确保血液制品的安全性，降低不良医疗事故的发生，确保临床患者安全进行输血治疗。

[参考文献]

[1]  中华人民共和国国家卫生与计划生育委员会.卫计生发[2013]22号，全面推进血站核酸检测工作实施方案.

[2]  国家卫生计生委.血站技术操作规程（2015版）（Z）.2015-12-17.

[3]  王瑞，吴硕，高峰，等.血站实验室质量监控指标体系的建立及其应用[J].中国输血杂志，2011，24（8）：713-715.

[5]  门守山，吕连智，陈元锋，等.血站核酸检测实施后献血者血液检测模式的研究[J].中国实验血液学杂志，2017，25（6）：1815-1819.

[6]  李天官.核酸检测技术在基层血站血液筛查中的应用效果[J].临床合理用药杂志，2017，10（24）：107-109.