多囊卵巢综合征患者血清结合珠蛋白、半乳糖凝集素-3水平变化观察

刘侠，金凤斌，韩丽萍，杜冠华，何英慧

(锦州市妇婴医院，辽宁锦州121000)

多囊卵巢综合征(PCOS)是一种以性腺轴紊乱失调为主的全身性的、复杂的神经—内分泌—代谢网络失调症候群，好发于育龄期妇女，主要表现为胰岛素抵抗、性激素水平变化，对机体近期不利影响表现为月经周期紊乱、不孕或流产、多毛和(或)痤疮等，远期不利影响则表现为糖尿病、子宫内膜癌、乳腺癌等[1，2]。既往研究[3]证实，胰岛素抵抗是PCOS的重要发病机制之一，随着对疾病发病机制的不断深入，发现PCOS患者存在性激素、氧化应激等多种生化指标的异常表达。半乳糖凝集素-3(Galectin-3) 是凝集素家族成员，其在调节肥胖、葡萄糖水平以及炎症中起重要作用[4]。结合珠蛋白(Hp)是一种酸性糖蛋白，主要在肝脏合成，其在结合游离血红蛋白、抗氧化应激、抗炎等方面发挥重要作用[5]。目前临床少有血清Galectin-3、Hp表达与PCOS关联性的相关报道。2016年1月～2018年10月我们观察了PCOS患者血清Hp、Galectin-3的水平变化，并分析其与胰岛素抵抗、血清性激素水平的相关性。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2016年1月～2018年10月期间本院收治的初诊PCOS患者107例为PCOS组，另采用分层抽样的方法选取同期因输卵管因素或男方因素致使不孕的妇女90例作为对照组，本研究经我院伦理委员会审核批准。其中PCOS组纳入标准：①均符合《多囊卵巢综合征的诊断和治疗专家共识》[6]的相关诊断标准；②均为育龄期已婚妇女，性生活正常者；③患者及其家属知情本次研究并签署了同意书。对照组纳入标准：①月经周期规律、血清激素水平、基础体温双相正常；②B超结果显示子宫及双侧附件均未见异常。排除标准：①合并恶性肿瘤、肝肾功能不全、心血管疾病者；②合并内分泌疾病或代谢性疾病者；③近3个月内有避孕药、降血脂、降糖、糖皮质激素类药物史者；④合并精神性疾病或认知功能障碍者；⑤因其他疾病引起的Galectin-3、Hp水平升高者。其中PCOS组年龄20～37(31.29±4.83)岁；体质量指数21.6～25.8 (22.91±0.67)kg/m2。对照组年龄21～36(31.56±3.26)岁；体质量指数21.5～25.9(23.06±0.83)kg/m2。两组研究对象一般资料比较差异无统计学意义。

1.2 血清Hp、Galectin-3检测 两组均采集月经周期的第2～6天早晨8～10点空腹肘静脉血6 mL，血标本常温下2 500 r/min离心10 min，有效离心半径8 cm，分离血清，-80 ℃保存备用。采用酶联免疫吸附试验检测血清Hp、Galectin-3水平，试剂盒购自浙江蓝森生物科技有限公司，严格遵守试剂盒操作进行。重复3次，取平均值。

1.3 胰岛素抵抗指标检测 两组于空腹下状态下服用75 g 无水葡萄糖，30、60、120 min后抽取其肘静脉血，采用化学发光法(试剂盒来源于美国DEL公司)检测血清空腹胰岛素(FINs)，采用美国强生稳豪型血糖仪检测空腹血糖(FBG)，测算稳定模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)，HOMA-IR=FBG×FINS/22.5。随后根据HOMA-IR诊断标准：HOMA-IR ≥ 2.69，将PCOS 组分为非胰岛素抵抗和胰岛素抵抗。重复3次取，平均值。

1.4 血清性激素指标检测 两组均采集月经周期的第2～6天早晨8～10点空腹肘静脉血6 mL，血标本常温下2 500 r/min离心10 min，有效离心半径8 cm，分离血清，-80 ℃保存备用。采用免疫化学发光法检测血清卵泡雌激素(Follicle stimulating hormone，FSH)、雌二醇(Estradiol，E2)、促黄体生成素(Luteinizing hormone，LH)、睾酮(Testosterone，T)、催乳素(Prolactin，PRO)，仪器选用东芝40型全自动生化分析仪，严格遵守试剂盒操作进行。重复3次，取平均值。

1.5 统计学方法 采用SPSS24.0统计学软件进行处理。计量资料以描述，组间比较采用检验；Pearson相关分析法分析血清Hp、Galectin-3与PCOS患者胰岛素抵抗指标、性激素指标的相关性。P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清Hp、Galectin-3水平比较 结果见表1。

表1 两组血清Hp、Galectin-3水平比较

注：与对照组比较，＊P<0.05；与非胰岛素抵抗者比较，#P<0.05。

2.2 两组HOMA-IR比较 PCOS组、对照组HOMA-IR分别为2.28±0.82、1.41±0.75(P<0.05)。PCOS胰岛素抵抗、非胰岛素抵抗者HOMA-IR分别为2.42±0.76、2.09±0.89(P<0.05)。

2.3 两组血清FSH、LH、E2、T、PRO水平比较 结果见表2。

表2 两组血清FSH、LH、E2、T、PRO水平比较

注：与对照组比较，＊P<0.05；与非胰岛素抵抗者比较，#P<0.05。

2.4 血清Hp、Galectin-3水平与PCOS患者胰岛素抵抗指标、性激素指标的相关性分析 血清Hp、Galectin-3水平与PCOS患者血清HOMA-IR、LH、T水平均呈正相关(r分别为0.489，0.628，0.426，P均<0.05；r分别为0.473，0.603，0.403，P均<0.05)，与FSH、E2、PRO水平均无显著相关性(r分别为0.105，0.084，0.132，P均>0.05；r分别为0.098，0.187，P均>0.05)。

3 讨论

PCOS是由基因遗传、生活环境、生活习惯等导致的多因素疾病，其病因至今尚未阐明。研究[7]认为，PCOS的发生可能涉及下丘脑-垂体-卵巢轴的调节功能异常、肾上腺内分泌功能异常、胰岛素抵抗等，而这之中胰岛素抵抗可能是PCOS病情发展的始动因素和中心环节。炎症学说已成为PCOS发病机制的研究热点之一。同时最新研究[8]指出，PCOS患者因机体存在糖脂代谢障碍、性激素分泌异常以及胰岛素抵抗，致使机体体内发生的促氧化与抗氧化处于失衡状态，引起氧化应激。氧化应激与低级慢性炎症之间可产生恶性循环，最终可能参与着PCOS的病情进展，而PCOS患者氧化应激反应与胰岛素抵抗关系密切。本次研究中，PCOS组HOMA-IR及血清LH、T水平显著高于对照组，也证实了PCOS患者胰岛素抵抗、性激素指标存在异常变化。

Hp属于血清α2球蛋白的组成成分，其主要生理功能是与游离血红蛋白结合形成较为稳定的Hp-血红蛋白复合物，游离血红蛋白可产生活性氧，因此Hp可降低体内氧化应激水平，发挥抗氧化剂效果[9]。研究[10]发现，Hp可通过与CD162受体与高迁移率族蛋白1结合，结合后产生的复合物可诱导产生抗炎酶以及细胞因子，进而发挥抗炎效应。Carvalho等[11]研究发现，PCOS患者血浆中的Hp呈升高状态，并且与C反应蛋白的表达呈负相关，张丽静等[12]研究也表明，PCOS患者血清Hp表达与胰岛素抵抗密切相关。可见Hp作为一种抗炎因子，可能参与着PCOS的生理病理发展过程。Galectin-3是半乳糖结合凝集素家族中的一员，大约30 kDa，是一种β-半乳糖苷结合蛋白，主要参与细胞分化、迁移、黏附、增殖、凋亡及新生的血管生成等，其可在各种细胞和组织中表达，如嗜酸性粒细胞、巨噬细胞以及胃肠道、女性生殖道、呼吸道等上皮细胞等。近年来不少研究[13]表明，Galectin-3在调节葡萄糖水平、炎症中发挥重要作用，可作为促炎因子与脂多糖结合，激活TLR配体及下游信号分子，促进炎症通路NF-κb的活化，而NF-κb的的激活则可进一步释放如白介素-6、肿瘤坏死因子-α等炎症细胞因子的释放。而刘仲尼等[14]研究亦发现，巨噬细胞中Galectin-3可诱发胰岛素抵抗，巨噬细胞可分泌Galectin-3，而Galectin-3又可通过趋化作用诱导巨噬细胞入侵至胰岛素靶组织，与胰岛素受体结合后，抑制胰岛素及其下游信号通路，致使葡萄糖转运体对葡萄糖的转位作用降低，形成恶性循环，诱发胰岛素抵抗;同时其研究还发现抑制Galectin-3水平对于胰岛素抵抗具有一定的改善效果。故猜测Galectin-3可能作为重要的促炎症介质参与着PCOS的低级慢性炎性状态中。

本次研究结果表明，胰岛素抵抗者HOMA-IR及血清LH、T水平显著高于非胰岛素抵抗者，表明PCOS患者部分性激素指标、胰岛素抵抗指标均存在异常升高，PCOS组血清Hp、Galectin-3水平显著高于对照组，且存在胰岛素抵抗者其水平较无胰岛素抵抗者高，表明PCOS患者存在血清Hp、Galectin-3水平异常升高现象，且血清Hp、Galectin-3水平可能影响着PCOS患者的胰岛素抵抗。PCOS患者Galectin-3水平升高可能因其可直接结合胰岛素受体，抑制胰岛素及其下游转导信号通路，致使葡萄糖转运体-4对葡萄糖的转位作用消失，加重机体胰岛素抵抗[15]。而Hp水平升高的原因可能是因为PCOS患者处于低级慢性炎性状态，炎性因子可通过信号转导与转录激活因子3诱导细胞分泌Hp。

综上所述，PCOS患者血清Hp、Galectin-3水平异常升高。血清Hp、Galectin-3水平与PCOS患者血清FINS、FBG、HOMA-IR、LH、T水平均呈正相关。血清Hp、Galectin-3水平改变可能与患者胰岛素抵抗指标、性激素指标水平有关，Hp、Galectin-3可能在PCOS的发生、发展中发挥重要作用。早期监测血清Hp、Galectin-3水平有助于预测PCOS患者的病情发生与发展，为临床诊疗提供依据。