社区口腔唾液检测幽门螺杆菌感染的效果评估

华明

（上海市静安区卫生事业管理中心医管科 上海 200435）

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)已被证实是一种慢性感染性疾病，幽门螺杆菌感染与消化道一些常见疾病均有密切关系，可引起消化性溃疡、反流性食道炎、慢性胃炎、胃溃疡等，也被确认是成人胃癌发生的一级病因[1]。有报道中国人群感染率为40%～90%。目前国内诊断幽门螺杆菌感染的金标准仍是胃镜下胃窦黏膜活检RUT或组织切片染色。而社区医院应设备技术限制普遍使用13C-或14C-尿素呼气试验和血清HP抗体检测[2]。找到一种患者易于接受，适合各年龄段人群检测，特别是老人、孕妇和儿童，不需要仪器设备，检测快速，特别适合于大范围人群初步筛查的手段尤为重要[3]。本实验使用幽门螺旋杆菌唾液测定试剂盒（干化学法）（Helicobacter pylori in Saliva，HpS）测定120例有消化道症状的患者，同时经胃镜活检组织快速尿素酶试验（rapid urease test，RUT）检测结果进行比较。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选择2016年12月—2017年12月底因消化道症状来社区卫生服务中心全科门诊就诊的患者120例为对象，其中男性66例，女性54例；年龄32～86岁，平均61岁。所有患者均要求完成在本社区卫生服务中心HpS检测，同时全科医生开具转检单于二级综合医院消化内科进行胃镜下RUT。

1.2 排除条件

在最近4周内使用过各类抗生素，H2受体拮抗剂，质子泵抑制剂，口服铋剂或已经行抗HP治疗的患者。

1.3 方法

1.3.1 标本采集 针对需要采集标本的患者，嘱咐患者在标本采集前先使用清水漱口。使用消毒棉签将深入到患者口腔中，在靠近患者脸颊的内侧使用棉签来回的刮拭十几下，同时不停的旋转棉签以收集尽可能多的唾液标本。总共收集患者1～2ml的标本，将收集到的标本置于试管中进行检验。

1.3.2 HpS检测 应用HpS检测试剂盒（本溪泰斯捷特生物科技有限公司生产），参照如下步骤进行相应的检测：取采集到的唾液进行检查，使用吸管吸取2～4滴唾液，将其滴在试剂盒中同充分摇匀，唾液中HP分泌的尿素酶分解试剂盒底部的尿素产生氨气（碱性），使试剂盒顶部的酚红试纸变色，观察3-5分钟，颜色由黄色变为粉红色或紫色为HP感染阳性，不变色为阴性结果。

1.3.3 胃镜下胃窦黏膜活检RUT检测 采用胃幽门螺杆菌快速尿素酶诊断试剂盒（珠海克迪科技开发有限公司生产）做RUT检测。实际检测的时候，相关操作均严格参照说明书进行，持续观察5min后如果颜色显示为为粉色提示检测结果为阳性。

1.4 统计学方法

应用统计软件SPSS20.0进行数据处理，胃与口腔Hp感染检测结果采用配对设计的卡方检验（McNemar检验），一致性采用Kappa分析。以RUT检测为金标准，对HpS进行真实性评价。

2.结果

120例患消化道症状的患者中，使用HpS检出的阳性率为65.83%，RUT检测的阳性率为63.33%（表1）。卡方检测P=0.648（P＞0.05），说明两种方法检测结果无显著差异（表2）。一致性检验kappa值为0.654，（P＜0.01），说明二次测量结果一致性高（表3）。120例患者中HpS检出真阳性68例，灵敏度为89.47%，HpS检出真阴性33例，特异度为75%，漏诊率为13.92%，误诊率为25%（表4）。HpS诊断幽门螺杆菌感染的ROC曲线下面积为0.822（图1），标准误为0.044，P＜0.0001，面积的95%CI为（0.737，0.908），提示诊断价值中等(表5)。

表1 两种幽门螺杆菌检测结果比较

表2 卡方检验

表3 对称度量

表4 HpS法与金标准RUT法的检测结果

图1 HpS法诊断幽门螺杆菌感染的ROC曲线

表5 曲线下的面积检验结果变量: HpS

3.讨论

随着生活方式及饮食方式的改变，临床中受幽门螺杆菌感染的人数呈现逐年上升的趋势，这给人们的生命健康构成巨大的威胁[4]。在以往的研究中，多数的学者与医师常常认为Hp感染的部位是胃部，但是随着临床研究的不断深入，人们在口腔中也经常发现Hp感染，这使得关于口腔Hp的预防也受到人们的广泛关注[5]。针对口腔Hp感染，及时检出感染，给予患者使用合适的抗菌药物是关键。

目前国内诊断 Hp 感染的方法很多，主要分为侵入性检查和非侵入性检测二大类，其中侵入性检查方法包含细菌培养、组织学检查及RUT检查等方式，其中RUT检查需要借助胃镜才能观察到检测结果；非侵入性检测则包括血清学方法、同位素标记法及分子生物学检测等[6]。考虑到侵入性操作常常需要借助精密的仪器进行检测，且检测时间比较长，社区由于自身条件限制，因此基本不进行侵入性检查，而行Hp筛查时多采用13、14C呼气试验及唾液HP检测[7]。近些年来有学者提出HpS方法行口腔Hp检测，该检测方法具有特异性高、敏感性高、操作简便等优点，适用于社区大范围HP感染的筛查工作。HpS检测最早由美国学者叶国钦于2006年研制成，并且申请了专利，其检测的原理为：借助胶体金来标记Hp所释放的尿素酶，当结合物移向固定抗体部位的时候，能够同这一区域的抗体产生特异性的结合，让Hp得到截留并且大量聚集在检测带上面，此时能够使用目测的方式来获得准确的结果，游离的标准物越过检测带可显示检测结果[8]。使用HpS这种手段进行检测，一般在15min内就可以得出结果，且检测的时候并不需要使用到一些特殊的仪器，因此应用价值较高。本中心自2016年底开展HpS方法检测以来，发现同RUT检测，HpS方法检测HP感染同有创的RUT检查在社区人群HP感染初筛中有一定的优势。HpS与RUT二者一致性检验kappa值为0.654，提示二种检查结果高度一致，HpS方法灵敏度为89.47%，特异度为75%，灵敏度相对较高，但特异度不高，HpS诊断幽门螺杆菌感染的ROC曲线下面积为0.822，提示诊断价值中等。

综上所述，在本社区口腔唾液检测的过程中，采用HpS检测法具有一定的价值，在社区HP感染的检测中，可将HpS检测作为人群初筛Hp感染的一个重要手段，故建议HpS检测仅适用于社区大范围初筛。考虑HpS检测结果受多种因素，如患者唾液含量、采购检验试剂质量、操作误差、人为选择检测方式、实验人员辨别试剂结果能力等多方面影响，今后还有待需要进一步的认证其实用性，如扩大样本含量，进行相关研究，如Meta分析等来进一步验证。