仔猪猪瘟病毒和猪圆环病毒2型混合感染的诊断

王 月，李克鑫，李克钦，牛绪东，张元瑞，刘建柱＊

（1．山东农业大学动物科技学院，山东 泰安 271018；2.山东德信生物科技集团，山东 惠民 251700；3.济南鑫宝星动物药业有限公司，山东 济南 250022）

猪瘟是由猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus，CSFV)引起猪的一种急性、热性、高度接触性传染性和致死性疾病[1]。猪圆环病毒病(Porcine Circovirus Diseases)是 由猪圆 环 病 毒2型(Porcine Circovirus type 2，PCV2)感染引起的仔猪多种综合征[2]。猪圆环病毒病是一种条件性疾病，该病病毒主要侵害猪的免疫系统，可造成机体免疫力下降，从而继发如猪伪狂犬病、猪瘟、猪肺炎支原体和猪细小病毒病等疾病，与之发生混合感染，加重疾病的发生和发展，严重危害着猪群的健康程度[3]。

2018年4月，对山东省菏泽市某养殖场一例2月龄重约为25 kg的病死仔猪进行了流行病学调查，病理剖检、PCR检测和PT-PCR检测，最终经实验室确诊为CSFV和PCV2混合感染。

1 发病情况及症状

该场饲养了230头仔猪、育肥猪和母猪，自2018年2月中下旬开始至4月的2个月内，由于正处冬春交替之际，每日温差较大，共有120头仔猪接连出现不同程度的发病症状，发病后死亡了57头，发病率为52.17%，死亡率为24.78%，病死率为47.50%。发病初期，仔猪精神沉郁、采食量明显下降、腹泻、咳嗽、气喘，全身皮肤呈现大量出血斑点（图1）。耳朵发绀，数天后死亡。在此发病期间，畜主曾对仔猪用过氨苄西林钠、替米考星、氟苯尼考、头孢类药物和金银花等中药针剂进行治疗，但病情并未好转。

2 剖检变化

图1 全身皮肤呈现大量出血斑点

图2 肠系膜淋巴结出血、肿大

图3 扁桃体坏死

病死猪腹股沟淋巴结肿大，横断面凸起，边缘钝圆，但不出血，胸前淋巴结出血，下颌淋巴结坏死，肠系膜淋巴结出血、肿大（图2），胃门淋巴结出血；扁桃体表面弥漫大量灰黄色坏死点（图3）；软脑膜出血、水肿；心内淤血（图4），剪开左心室，心内膜正常，心冠脂肪萎缩、水肿、潮红；膀胱黏膜充血潮红（图5）；气管环状出血，管内含有气泡与黏液（图6），肺出血、淤血、水肿、肝样变、胰样变、肉样变（图7）；肝脏表面散在大小不均的灰白色坏死点（图8）；肾髓质部水肿，积尿，肾皮质部贫血性出血、淤血、肿大，肾乳头出血、水肿（图9）；胃出血、溃疡、坏死（图10）；肠道出血（图11）；脾肿大（图12）；皮下出血（图13）。

图4 心内淤血

图5 膀胱黏膜充血潮红

图6 气管内含有气泡

图7 肺出血、淤血、水肿

图8 肝脏表面坏死点

图9 肾贫血性出血

图10 胃出血、溃疡、坏死

图11 肠道出血

图12 脾肿大

图13 皮下出血

图14 PCR扩增产物电泳结果

3 实验室诊断

无菌采取送检病死猪的脑、下颌淋巴结、胸前淋巴结、扁桃体、肝脏、肺脏和脾脏接种于麦康凯血琼脂、巧克力琼脂以及肉汤培养基上，在37 ℃条件下培养48 h，进行细菌培养，结果未见细菌生长。病料组织提取核酸进行CSFV、PRRSV、PRV 和PCV2检测，结果见图14，CSFV和PCV2核酸出现明显条带(599 bp和785 bp)。

4 结论

根据流行病学调查和病理剖检变化，初步诊断为猪瘟、猪伪狂犬病、猪呼吸与繁殖综合征、猪圆环病毒感染。经过实验室PCR的检测，发现了PCV2为阳性，PRVgE为阴性，而RT-PCR的检测结果发现CSFV为阳性，PRRSV为阴性，最终诊断该场仔猪为猪瘟病毒和猪圆环病毒2型的混合感染。

5 讨论与小结

发病猪场未制定出一个详细的免疫计划是导致本次疫病产生的根本原因。经问诊畜主免疫情况，该场仅对母猪接种了一次猪瘟、猪丹毒和猪肺疫三联疫苗，而仔猪并未接种过任何疫苗，仔猪母源抗体消失后，给病毒的侵入提供了机会，加之正值冬春交替之季，气温忽冷忽热，对仔猪造成一定的应激，加重了感染各类疫病的可能性，最终造成了猪瘟病毒和猪圆环病毒的混合感染。

从剖检上看，病死猪的扁桃体、肾脏病变比较明显，淋巴结和肺脏的变化也比较严重。猪扁桃体是猪瘟病毒最先入侵的器官之一，然后是内皮细胞、淋巴器官及骨髓组织[5]。猪圆环病毒感染可导致外周血中单核细胞增加，CD4T细胞和B细胞数量减少，产生免疫抑制，给其他病原体的侵入提供了便利条件，导致了本病例中猪圆环病毒与猪瘟病毒的混合感染。

对于该病应采取的措施，首先要求畜主隔离发病猪并淘汰严重者，使用三氯异氰尿酸钠进行猪舍带猪消毒。其次，全群紧急免疫接种猪瘟细胞苗，并在饲料中添加清瘟败毒散和阿莫西林预混剂拌料，一周后猪群基本趋于正常。

根据该猪场发病情况制定了防治措施，2周后电话访问，病情基本得到控制。但作者认为，不管任何商品猪场，仔猪的疫苗防控是至关重要的，应制定合理的免疫程序。猪瘟发生后疫苗的紧急免疫接种是十分必要的，并且越早越好（疫苗注射到机体后产生保护性抗体需要最少4 d时间），这样可以有效地减少因仔猪死亡而带来的经济损失。

当前猪瘟病毒的感染仍然非常普遍。由于猪瘟疫苗的不规范应用及其他的一些原因，导致猪瘟病毒感染的病情变化越来越复杂，防控难度越来越大，混合感染病例也越来越多，这应引起政府管理部门和畜牧兽医工作者的高度重视。各养殖场应根据自己场具体的疫病发生情况，制定切实可行的防治措施。