ＨＰＬＣ法测定去炎酊中游离大黄素和大黄酚的含量

鲍云惠 吕锁忠

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作者简介：鲍云惠（1978-），女，本科，主管中药师，研究方向为医疗机构中药制剂研究与开发。E-mail：147161146@qq.com

通信作者：

【摘 要】 目的：建立高效液相色谱法测定去炎酊中游离大黄素和大黄酚含量的方法。方法：色谱柱为Hypersil ODS（C18）柱（4.6mm×250mm，5μm）， 柱温为30 ℃;流动相为0.1%磷酸溶液-甲醇 （25∶75），流速为1.0mL/min; 检测波长为254nm。结果： 大黄素和大黄酚分别在8.4604～211.5100（r=1.0000 ，n=6）和3.5237～88.0915（r=1.0000 ，n=6）μg/mL范围内呈现良好的线性关系;精密度、重复性、稳定性试验的RSD均<1.0%;平均加样回收率（RSD）分别为99.72%（0.37%）、99.78%（0.39%）。结论：该方法专属性强、简单易行、节约时间和成本，可用于測定去炎酊中游离大黄素和大黄酚的含量。

【关键词】 HPLC法;去炎酊;大黄素;大黄酚;含量测定

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2019）7-0047-03

Abstract：Objective To establish a high performance liquid chromatography （HPLC） method for determining the content of free emodin and chrysophanol in Quyan tincture.  Method The determination was performed on Hypersil ODS（C18） （4.6mm×250 mm，5μm） column， and the column temperature was 30℃.The mobile phase was consisited of 0.1% phosphoric acid and methanol （25∶75）.The flow rate was 1.0mL/min. The detection wavelength was 254nm. Result Emodin have a good linear relationship range in 8.4604～211.5100μg/mL（r=1.000 0 ，n=6），and chrysophanol have a good linear relationship range in 3.5237～88.0915μg/mL（r=1.000 0 ，n=6），RSD of precision、repeatability and stability test were all lower than 1.0%; The average recovery（RSD） were 99.72%（0.37%） and 99.78%（0.39%）. Conclusion The method is specific， simple， time-saving and cost-saving，and can be used for the determination of free emodin and Chrysophanol in Quyan tincture.

Keywords：HPLC;Quyan Tincture;Emodin;Chrysophanol;Content  Determination

去炎酊是由重楼、大黄、红花、白芷、虎杖、紫草、草乌、独定子、马钱子、生南星、苦参等中药经渗漉制成的酊剂。有清热除湿、泻火解毒、活血化瘀、消肿止痛、消炎排脓之功效，主治跌打损伤、外伤感染、痈疽、疮疖、蚊虫叮咬、皮肤痒疹等。大黄为方中君药，具有泻下攻积、清热泻火、凉血解毒、逐瘀通经、利湿退黄，用于实热积滞便秘、血热吐衄、目赤咽肿、痈肿疔疮、肠痈腹痛、瘀血经闭、产后瘀阻、跌打损伤、湿热痢疾、黄疸尿赤、淋证，水肿，外治烧烫伤;虎杖具有利湿退黄、清热解毒、散瘀止痛、止咳化痰，用于实热黄疸、淋浊、带下、风湿痹痛、痈肿疮毒、水火烫伤、经闭、癥瘕、跌打损伤、肺热咳嗽[1]。现代药理研究表明，大黄有泻下、兴奋胃肠平滑肌、对消化道黏膜保护、抗病原微生物及抗炎、保护心脑血管、抗肿瘤、保肝利胆等[2]作用;虎杖有抗炎、抗病毒、抗菌、调血脂、抗血栓、改变血流变、扩张血管、保护心肌、抗氧化、抗肿瘤、改善阿尔茨海默病症状及预防艾滋病等[3]作用。去炎酊现行质量标准简单，没有对处方中任何一味中药进行含量测定。本文参照中国药典[1]及文献[4-12]，建立了HPLC法测定去炎酊中游离大黄素和大黄酚含量的方法，为去炎酊的质量标准提升提供参考。

1 仪器与材料

1.1 仪器 岛津LC-20AT型高效液相色谱仪（配有四元泵，自动进样器，紫外检测器，柱温箱，真空在线脱气机，LC solution工作站）（株式会社岛津制作所），AE240型电子天平（瑞士梅特勒-托利多仪器有限公司）。

1.2 材料 去炎酊（曲靖市中医医院，批号： ZD2017040，ZD2017041，ZD2017042，ZD2017043，规格：60 mL/瓶）;大黄素对照品（批号：110756-201512，含量：98.7%）、大黄酚对照品（批号：110796-201520，含量：99.2%），以上对照品均购置于中国食品药品检定研究院;乙腈（德国默克公司）为色谱纯;水为双蒸水;其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 溶液的制备

2.1.1 对照品溶液 精密称取大黄素和大黄酚对照品适量，用乙醇制成每1mL分别含大黄素和大黄酚423.020和176.183μg/mL的对照品溶液储备液，精密量取对照品储备液1mL，置10mL容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，即得对照品使用液。