某规模场仔猪伪狂犬病免疫抗体消长规律初探
2019-06-14李照伟张人俊
刘 霞，李照伟，王 慧，崔 燕，张 霞，张人俊
（1.甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州 730070；2.贵州省动物疫病预防控制中心，贵州贵阳 550008）
伪狂犬病（pseudorabies，PR）是由伪狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）引起的一种可感染家畜以及其他多种野生动物的烈性传染病[1]，其中猪是PRV的主要宿主。发热和脑脊髓炎是PRV感染的主要临床特征，同时PRV感染还会引起种猪繁殖障碍，以及新生仔猪的神经系统疾病，对仔猪有很高的死亡率。研究表明，PRV是猪呼吸系统疾病综合征（PRDC）重要原发性病原之一[2-3]。我国1947年首次报道该病。自2011年以来，苏、鲁、豫、皖、冀、浙、粤、湘等地的PRV感染率不断攀升，感染猪场数量不断增多。同时，随着规模化养殖的普遍化，PRV与其他病毒性疾病以及细菌性疾病的混合感染给我国养猪业造成了巨大经济损失[5-6]。研究表明，母源抗体的半衰期一般为10～15 d，因此选择母源抗体下降到较低水平时再进行疫苗接种，可以尽量避免母源抗体对仔猪主动免疫的影响，但过低水平的母源抗体又不能对仔猪防御病毒感染产生足够的保护力[7]。蒋安华等[8]在参照国内外应用PRV基因缺失疫苗来净化PR基础上，采用对所有基础公、母猪每年普免3次，后备母猪配种前免2次，保育猪55～60日龄免疫1 次的免疫方案，经过3年的实施，使猪场PRV野毒感染阳性率降低到了净化标准。本研究在调查规模猪场PRV感染的基础上，选取1个规模猪场，经gE-ELISA检测后选取3组猪群，设置不同的免疫程序并跟踪检测免疫抗体产生及消长情况，从而为科学制定规模猪场免疫程序提供参考。
1 材料与方法
1.1 分组及免疫程序设置
在规模猪场，先用gB-ELISA和gE-ELISA检测妊娠母猪抗体；挑选gE、gB母源抗体均为阴性的仔猪10头，命名为A组；gE阴性母猪产前40 d免疫PRV疫苗，挑选gB母源抗体阳性仔猪10头，命名为B组；挑选gE母源抗体阳性仔猪10头，命名为C组。针对不同分组，制定相应的免疫程序（表1）。
1.2 疫苗及检测试剂
疫苗株：Bartha-K61株，生产批号1610010-2；SA215株，生产批号201707022。PRV gI（gE）-ELISA检测试剂盒，批号107HS827，用于血清中的野毒感染抗体检测；PRV gB-ELISA检测试剂盒，批号107HS806，用于血清中的免疫抗体检测。
1.3 抗体检测
对不同分组，采集猪血清，按照试剂盒要求及操作步骤进行检测，依据试剂盒判定标准进行结构判定。
A组：在10、30、40、60、80、100、120日龄，各进行1次gB-ELISA跟踪检测；B组：在10、20、30、45、70、95、120、150、185 日龄，各进行1次gB-ELISA跟踪检测；C组：在10、20、30、50、75日龄，各进行1次gE-ELISA及gBELISA抗体跟踪检测。
2 结果与分析
2.1 A组
1日龄的活疫苗滴鼻免疫对猪群血清免疫抗体水平没有影响，全为阴性；15日龄基因缺失疫苗免疫15 d后开始检测到免疫抗体阳性，且阳性率逐渐升高；45日龄加强免疫1个月后，免疫抗体水平达到顶峰，此后逐渐下降，但持续到120日龄时，仍有50%的抗体合格率（表2）。
2.2 B组
1日龄活疫苗滴鼻免疫对母源抗体阳性猪群的血清抗体水平没有影响，抗体水平持续下降，到45日龄时，合格率下降到了50%。50日龄基因缺失疫苗注射免疫后至70日龄期间，免疫抗体阳性率持续升高，90日龄再用基因缺失疫苗加强注射免疫1次，至120日龄免疫抗体达到顶峰，150日龄开始下降，持续到185日龄时，免疫抗体合格率下降到50%（表3）。
2.3 C组
母源抗体gE阳性背景下，不管是1日龄活疫苗滴鼻免疫，还是15日龄基因缺失疫苗注射免疫和45日龄加强免疫，gE抗体阳性持续存在，gB抗体滴度较低，说明经过多次疫苗免疫，并不能使仔猪产生有效的免疫保护抗体（表4）。
3 讨论
通过对3组不同母源抗体背景仔猪，采取不同的免疫程序进行免疫，然后进行跟踪监测，发现对初生仔猪进行滴鼻免疫，不会产生有效的保护抗体，但会对呼吸道粘膜感染设置物理屏障，因此滴鼻免疫也很重要。
对于母源gE抗体阳性猪，疫苗免疫不能使其产生有效的免疫抗体，因此猪场定期检测种猪gE抗体很有必要，及时淘汰gE抗体阳性种猪。只有gE抗体为阴性时，制定的猪场免疫程序才有意义。
表2 A组仔猪PRV gB-ELISA检测结果（S/N）
规模猪场可结合抗体检测结果，参考以下免疫程序：母源gB抗体阴性仔猪，1日龄滴鼻免疫，15日龄基因缺失疫苗注射免疫，45日龄加强免疫1次；母源gB抗体阳性仔猪，50日龄基因缺失疫苗注射免疫，90日龄加强免疫1次。
表3 B组仔猪猪伪狂犬病gB-ELISA检测结果（S/N）
表4 C组仔猪猪伪狂犬病gB-ELISA及gE-ELISA检测结果（S/N）
4 结论
本研究在贵州省某规模猪场，选取3组不同母源PRV gE和gB抗体背景仔猪群，开展PR免疫抗体消长规律研究。研究表明：仔猪的母源抗体背景，对于仔猪免疫程序的制定具有较大影响；对于不同母源抗体背景仔猪，其首免日龄和加强免疫日龄的选定，要结合母源抗体和免疫检测结果合理制定；只有gE母源抗体为阴性的仔猪，才能通过制定合理的免疫程序，使其获得足够的免疫保护。
