肠杆菌肽替代土霉素钙对断奶仔猪生长性能的影响

赵青海 胡 毅

（1.北京中农颖泰生物技术有限公司，北京100193；2.华中农业大学动物医学院，湖北武汉430070）

土霉素钙属于四环素类抗生素， 抗菌谱较广。 自2017 年硫酸粘杆菌素在饲料中禁用之后， 土霉素钙作为替代品大量使用在各个阶段的主商品饲料中， 作为主要的抗生素品种，对于减少仔猪断奶腹泻， 促进生长具有一定的作用。 然而， 土霉素钙如果长期超量添加，存在非常严重的耐药性问题， 各企业和研究机构深刻认识到这一点， 并积极寻求解决之道。 2019 年7 月10 日农村农业部发布194 号公告， 明确在2020 年7 月1 日前， 饲料生产企业停止生产含有促生长类药物饲料添加剂的商品饲料， 故寻找土霉素钙的替代产品以及方案， 具有非常重大的意义。

肠杆菌肽最早是由1993 年美国普林斯顿大学从肠道细菌中分离出一类分子量小于2.5KD (千道尔顿） 的索套结构肽， 由21 个氨基酸组成， 分子质量为2.1kDa， 其中N 端的8 个氨基酸形成一个圆形的环状结构， 9-21氨基酸形成β 发夹结构， 贯穿圆环， 故其性质非常稳定， 对高温、 蛋白酶有良好耐受性。肠杆菌肽对革兰氏阴性菌具有强烈的杀灭作用， 在微生物实验室条件下， 针对大肠杆菌，沙门氏菌等主要有害菌可以做远低于土霉素钙的最低抑菌浓度。 本试验在断奶仔猪日粮中添加肠杆菌肽替代原配方中的土霉素钙， 研究并验证其对断奶仔猪生产性能的影响， 旨在为肠杆菌肽替代土霉素钙提供科学依据。

1 材料与方法

肠杆菌肽（抗菌肽含量0.5%）， 林州中农颖泰生物肽有限公司提供。 20%土霉素钙， 正大集团购买。

1.2.1 试验动物及设计 挑选8 栏健康的平均断奶日龄在21 日龄左右、 断奶方式一致、 平均断奶体重在7-8 公斤的仔猪， 分为2个组， 每组3 个重复， 每个重复20 头左右，各处理间初始体重无明显差异。 试验前3 天保健， 不使用抗生素等药物， 试验期为16d。 试验用基础日粮配方及营养水平见表1。 各个处理组日粮中药物添加见表2。 试验猪在断奶前按猪场的正常饲养管理规定进行饲养和免疫。试验期间自由采食， 供给卫生的饮水， 并进行严格的环境监控， 以保证实验的准确性。

表1 基础日粮配方及营养水平

营养浓度

表2 各处理组日粮药物添加方案

1.2.2 检测指标与方法

1.2.2.1 记录指标

记录每栏仔猪初重、 末重、 饲料消耗量，每天记录每栏采食量折算每头日采食量， 早晚中晚各观察一次仔猪腹泻情况。

1.2.2.2 计算指标：

日增重（g/d） = （试验末总重+试验期死亡/淘汰的动物总重-试验初总重） /试验头数， 其中试验头日数应包括被淘汰的猪试验天数在内。

料肉比=总耗料/总增重

腹泻率= （腹泻头数* 腹泻天数） /（试验猪头数* 试验天数） *100%

2 结果与分析

肠杆菌肽替代土霉素钙对断奶仔猪生产性能的影响肠杆菌肽替代土霉素钙对断奶仔猪生产性能和腹泻率的影响见表3。 同土霉素钙组相比， 抗菌肽组日增重提高了4%、 采食 量 提 高 了2.2% （P ＞0.05）、 料 肉 比 增 加0.8%， 腹泻率降低12.4%， 整个试验期无仔猪死亡。

表 3 肠杆菌肽替代土霉素钙对断奶仔猪生产性能和腹泻率的影响

3 讨论

自抗生素发明以来， 抗生素不仅仅对人类的健康产生了巨大的作用， 并且在动物的健康以及生产性能的提高有着不可磨灭的贡献，极大地丰富了我们对动物食品的需求。

然而随着时代的发展， 抗生素也展现出来了它有害的一面。 近30 年来， 抗生素在动物饲料中的使用量日渐增长， 品种也日渐丰富，随之而来是我们必须面对的两个问题： 其一是动物本身对抗生素产生耐药性的问题， 需要不停地增加使用量才能维持同样的效果，最终导致某类抗生素失效。 其二是在商品饲料以及养殖现场抗生素的使用量过量导致的食品安全问题。 非抗生素类物质替代抗生素在动物生产过程中使动物保持健康和稳定的生产性能， 是我们必须面对的课题， 抗菌肽就是其中一个非常重要的研究方向。

抗菌肽分子量小、 水溶性好、 热稳定性较高、 生物功能多样， 有着与传统抗生素不同的杀菌机制， 不易导致耐药性菌株的产生。目前全球共发现的抗菌肽已达到两千多种。肠杆菌肽是一种优质的抗菌肽， 研究显示，肠杆菌肽不仅仅对革兰氏阴性菌具有非常明确的杀灭作用， 而且因其膜穿孔的杀菌机制，极难产生耐药性， 符合抗生素替代品的发展趋势。 Sophie 等（2000） 研究发现， 肠杆菌肽纯品对E.coli O157：H7 最低抑菌浓度为1μg/ml。Fabian 等（2007） 研究显示， 其对沙门氏菌最低抑菌浓度为3.12μg/ml， 以上研究表明， 肠杆菌肽最主要的两种导致动物生产性能降低和腹泻的两种革兰氏阴性菌作用确切。

针对养殖现场， 研究者们对现场采集的大肠杆菌野生毒株进行了最低抑菌浓度的测定。研究结果表明， 20%土霉素钙和0.5%肠杆菌肽对大肠杆菌标准菌株ATCC25922 都有很强的抑菌效果； 而0.5%肠杆菌肽大肠杆菌野生毒株的抑制效果明显高于20%土霉素钙； 土霉素钙对CVCC50094 表现出很强的抑菌效果，但对野生型沙门氏菌， 0.5%肠杆菌肽对大部分沙门氏菌的MIC 小于20%土霉素钙， 效果较好。 无论是在实验室， 还是在生产现场， 新型抗菌肽肠杆菌肽均能体现出较好的抑菌能力， 做到了替代抗生素， 但避免了使用抗生素的弊端， 是在无抗时代下一个值得深入研究并推广的选项。