抗-Dia新生儿溶血病1例

吴瑾惠，倪修文*，屠佳燕 ，孙健琦

（1.嘉兴市中心血站，浙江 嘉兴 314001；2.嘉兴市秀洲区妇幼保健院，浙江 嘉兴314033）

Diego血型系统在1955年首次被发现，该血型系统具有多态性。迄今为止，Diego血型系统内已发现21个抗原，Dia和Dib以及Wra和Wrb是其两对对偶抗原，此外还有17个低频抗原，其中Dia、Dib抗原最有临床意义，可引起轻重程度不等的HDN和溶血性输血反应[1-2]。抗-Dia抗体较为少见，文献报道较少，本研究旨在分析抗-Dia引起新生儿溶血病（HDN）的血清学特征，并跟踪评价光疗和输注免疫球蛋白的临床治疗效果。

1 病例介绍

患儿 男，B型，Rh阳性ccDEE，足月顺产，出生后次日出现黄疸，并进行性加重，于2016年10月送至嘉兴市中心血站进行血样检测。血红蛋白186g/L，总胆红素348μmol/L，临床用光疗和免疫球蛋白治疗5天后总胆红素降至156μmol/L，康复出院。产妇，30 岁，A 型，Rh 阳性 ccDEE，妊娠史 G2P2，末次妊娠产子体健，无黄疸或输血史。

2 方法

2.1 试剂与仪器 抗-A、抗-B、抗-D、抗-E、抗-e、抗-C、抗-c试剂 （批号：20150815、20151814、20151814、20163202、20163303、20163003、20163102）；ABO 试剂红细胞（批号：20165335）；抗-IgG+C3d 试剂（批号：201605002）；凝聚胺试剂（批号：20167502）；抗体筛选、国产谱细胞（批号：20167026、20160927）；酸放散试剂（批号：20160912）均由上海血液生物提供；酶处理细胞自制；抗-Dia、抗-Dib试剂由上海市血液中心提供；所有试剂批次均在有效期内使用。主要仪器：KA-2200 离心机（日本 KUOTA 2200），电热恒温水浴箱（上海跃进医疗器械有限公司）。

2.2 血型血清学检测 （1）红细胞血型鉴定方法。采用试管盐水法对患儿及父母的红细胞进行ABO、Rh、Diego血型鉴定。（2）抗体筛查的方法。产妇血清加三组抗体筛查细胞在盐水法、凝聚胺法、间接抗人球蛋白（IAT）法中进行，采用不规则抗体筛查试验，结果若阳性则用抗体鉴定谱细胞分别与患儿、母亲血清和患儿放散液反应，进行不规则抗体性质鉴定。（3）新生儿溶血病检查。红细胞直接进行抗人球蛋白（DAT）试验、游离试验以及释放试验，以明确诊断。

2.3 其他检测 （1）ABO新生儿溶血病（ABO-HDN）检测。取Dia-的B细胞与患儿的血清及放散液做间接抗人球试验，结果阳性即可证实合并ABOHDN，反之则可排除。（2）采用间接抗人球试验测定母亲血清IgG抗-Dia抗体效价。（3）网织红细胞（Ret）检测。对患儿血液荧光染色后进行血常规检测。（4）治疗后复查患儿血常规和肝功能水平。

3 结果

3.1 血型分析 （1）红细胞血型及溶血病情况。患儿为 B 型，ccDEE，Dia+b+； 母亲为 A 型，ccDEE，Dia-b+；父亲为 B 型，CcDEe，Dia+b+。ABO-HDN 检测阴性。（2）血清溶血三项试验。患儿DAT试验结果阳性（4+w），游离试验阴性，释放试验阳性。

3.2 抗体筛查 母亲血清抗体筛选示血清中存在IgG类不规则抗体。详见表1。

表1 患儿母亲血清抗体筛选结果

3.3 抗体鉴定 分别用患儿血清、红细胞放散液与其母亲的血清进行抗体鉴定，放散液及母亲血清中检出抗-Dia抗体。IgG 抗-Dia效价为1:32（IAT），患儿抗-Dia新生儿溶血病诊断明确。详见表2。

3.4 网织红细胞及疗效 患儿Ret为7.0%。经光疗以及免疫球蛋白治疗5天后胆红素下降。详见表3。

4 讨论

Diego血型是人类血型系统中的一种常见的稀有血型，Diego血型基因定位在17号染色体上。在不同人群频率差异很大，Diego血型有明显的种族差异性，Dia几乎仅限于蒙古人种，在黑种人和白种人中几乎不存在。汉族人群Dia抗原的表型频率为5.66%，浙江为4.8%，与西安相同，低于深圳地区[3-5]。Dia抗原是一个低频抗原，其抗体产生概率较低，Dia抗体首次由Layrisse[6]于1955年在委内瑞拉1例新生儿溶血病的母亲血清中发现并被报道，患儿及其父亲红细胞中检出Dia抗原，而相对应的抗-Dib于1967年被发现。Diego血型系统的绝大多数抗原在新生儿期就有强表达，其抗体经免疫产生，抗-Dia和抗-Dib属于IgG里的IgG1和IgG3亚型，须用间接抗人球蛋白试验才能检出，抗-Dia和抗-Dib都具有较大的临床意义[7]。

表2 患儿与母抗体鉴定

表3 患儿各项实验室指标

新生儿溶血病一般指母婴血型不合，胎儿从父亲方面继承来的红细胞抗原恰为母亲所缺乏，胎儿红细胞对母亲来说是一种异抗原，当它通过胎盘进入母体后，可以刺激母体产生相应的免疫抗体。ABO新生儿溶血病是临床最常见的HDN，通过溶血病三项试验可确认。一般ABO-HDN可发生在第一或第二胎，发生率约占总分娩数的0.7%，而ABO以外的HDN绝大多数发生在第二胎，需要对患儿红细胞做放散试验加以确认。多数患儿贫血较严重，胆红素水平会快速升高，部分甚至出现水肿。本例母亲的血清与抗体筛选细胞在盐水、凝聚胺介质中不凝集，与自身细胞也无反应，但在抗人球介质中出现阳性，表明母亲血清中含有同种不规则抗体；患儿直接抗人球试验结果4+w，提示患儿的红细胞上被不规则抗体致敏。对患儿血清、红细胞放散液，其母亲血清进行谱细胞的抗体鉴定，结果患儿血清结果为阴性，患儿红细胞放散液和母亲血清均为阳性，对照谱细胞表，抗体鉴定结果符合抗-Dia抗体格局。患儿血清抗体检测结果阴性，推测可能原因是大量的抗体已结合于其红细胞表面，血清中游离的抗体低于检测范围而导致。从患儿及其父母血型鉴定结果可见，患儿放散液及其母亲血清中检出抗-Dia抗体与预期判断完全符合。此外，Dia阴性的B细胞与患儿的血清及红细胞放散液反应结果为阴性，可排除患儿合并ABO-HDN。综上所述，从血清学结果上可证实该患儿是由抗-Dia抗体引起的HDN。囿于检测技术限制，未对患儿及其家系进行基因分析。

据国内外报道，抗-Dia或抗-Dib导致的HDN临床表现的严重程度不一，其跟抗体的效价有关[8-10]。研究显示[11]，患儿母亲抗-Dia效价在1:64及以上的新生儿罹患高胆红素血症的几率较高，需换血或用高剂量的丙种球蛋白治疗。本例患儿母亲的抗-Dia效价为1:32，临床采用光疗和免疫球蛋白治疗后，胆红素下降，效果显著，无皮疹、发热、血尿等输血不良反应。目前临床产前常规检验主要包括ABO正反定型和RhD检测，较少开展孕妇血型血清学检测，只有在临床上出现了较严重的新生儿高胆红素血症时才考虑检测患儿是否罹患HDN的可能。因此，为预防和阻止因胎母血型不合而导致的HDN，除产前夫妇ABO血型鉴定外，可把ABO IgG抗体、效价测定及ABO以外的特异性抗体的筛查作为常规检查项目，提高新生儿质量。