气相色谱法测定黄瓜中联苯菊酯的不确定度评定

刘 纳,高 琴,钟 攀

(四川省农产品质量安全中心，四川 成都 610041)

测量不确定度是利用可获得的信息，表征赋予被测量值分散性的非负参数[1]。不确定度的评估是检测实验室之间互认的基础，是评定测量结果质量的一个重要指标[2]。本文结合行业标准检测方法和实际操作，以黄瓜中联苯菊酯测量为例，对其农药残留的不确定度进行了评定，为蔬果中有机氯农残检测提供了质量控制的科学依据。

1 实验方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 仪器设备 Agilent7890A 气相色谱仪[配气相色谱电子捕获检测器 (ECD)，7693 自动进样器，分流/不分流进样口]，TE612-L电子天平(德国Sartorius)，XH-C旋涡混合器(上海梅香仪器有限公司)，T25匀浆机(德国IKA),R-210旋转蒸发仪(瑞士BUCHI)，配套蒸发仪使用的SHB-3A循环水式多用真空泵和低温冷却液循环泵(郑州杜甫仪器厂)。

1.1.2 农药标准品 联苯菊酯 (100μg/mL,不确定度为0.12μg/mL，农业部环境保护科研监测所)，氯化钠(分析纯，成都市科龙化工试剂厂,使用前140℃烘烤4h，在干燥器中冷却至室温)，乙腈、丙酮、正己烷(色谱纯，美国Fisher)。

1.1.3 其他 20μL和1000μL可调移液器(德国VITLAB)，各种玻璃仪器若干。

1.2 标准溶液制备和添加

准确量取1mL浓度为(100±0 .12)μg/mL联苯菊酯标准溶液，定容于5mL容量瓶中，此溶液浓度为20μg/mL；取20μL浓度为20μg/mL联苯菊酯标准溶液，定容于5mL容量瓶中，此溶液浓度为0.08μg/mL，制备好气相色谱仪标定用的上机标液；用可调移液器取20μg/mL标准溶液1mL于样品中，并静置30min，制备好加标样品。

1.3 处理方法

本文参考农业行业标准NY/T 761-2008《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》[3]，同时结合实验室实际，前处理如下：准确称取25.00g黄瓜样品于广口三角瓶中，加入乙腈50.0mL，在匀浆机中高速匀浆2min后过滤，滤液收集到装有7g氯化钠的100mL比色管中，收集滤液，盖上塞子，剧烈震荡 1min，在室温下静置30min，使乙腈和水相分层。从100mL比色管中准确吸取10.00mL乙腈相溶液于鸡心瓶中，40℃旋转蒸发至近干，加入2.0mL正己烷，待净化。将弗罗里矽柱依次用5.0mL丙酮+正己烷(10+90)、5.0mL正己烷预淋洗，弃去淋洗液，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即加入待净化液，收集洗脱液于100mL鸡心瓶中，用5mL丙酮+正己烷(10+90)淋洗鸡心瓶后倒入弗罗里矽柱，并重复1次。将盛有洗脱液的鸡心瓶于40℃旋转蒸发至近干，加入5.00mL正己烷，混匀，待色谱测定。

1.4 色谱条件

DB-5石英毛细管柱(Aglient,30m×0.32mm×0.25μm)；以高纯氮气为载气，载气流速1.5mL/min，恒流模式；ECD检测器温度300℃；氮气尾吹流速48.5mL/min；分流进样，分流比为10∶1;进样量1μL，进样口温度：250℃。程序升温：120℃(保持2min)按照10℃/min升温至270℃(保持10min)。

2 结果与分析

2.1 结果计算

样品和标准品等体积穿插进气相色谱仪测定，以峰面积外标法定量，联苯菊酯基质标样色谱图见图1。

式中ω—黄瓜中联苯菊酯质量分数，mg/kg;

ρ—参考标准溶液中联苯菊酯浓度，mg/L;

frec—回收率校正因子；

A—样品溶液中联苯菊酯峰面积；

As—参考标准溶液中联苯菊酯峰面积；

V1—提取溶剂总体积，mL；

V2—吸取用于检测的提取溶液体积，mL；

V3—样品定容体积，mL；

m—样品质量，g；

图1 联苯菊酯基质标样色谱图

2.2 不确定度来源

结合检测过程看，黄瓜中联苯菊酯农药残留测定的不确定度来源于测量方法重复性引入的不确定度、样品称重引入的不确定度、标准物质溶液纯度、配制和添加引入的不确定度、加入提取液体积、分取液体积和最终定容体积引入的不确定度、净化过程的回收率带来的不确定度等。

2.3 不确定评定

2.3.3 标准溶液配制量器校准引起的相对不确定度urel(ρv) 由于移液枪和容量瓶因温度带来的体积变化不大，故两种量器均忽略因温度引起的体积变化而产生的不确定度。

标准溶液添加入样品的过程中用到了1000μL可调移液器，加入量为1000μL，其相对不确定度urel(S1)计算公式和结果urel(A)相同，即urel(A)=urel(S1)=0.58%。

最终经过2次标准溶液稀释和一次标准溶液添加引入的相对不确定度：

urel(ρv)=

2.3.5 样品含量重复测定产生的相对不确定度urel(r) 在检测过程中于25g空白样品中添加2.0μg联苯菊酯，按文中所述方法对样品进行测定，检测结果见表1。

表1 样品重复测量结果

样品重复测定产生的相对不确定度为：

因样品重复测定已考虑仪器的分辨率和稳定性，评定测量不确定度时不再另外计算仪器检测器给出的不确定度。

说明平均回收率与1没有显著差异，不必考虑回收率校正因子frec即方法回收率带入的不确定度。

2.4 合成标准不确定度uc(ω)

样品6次测定的平均值为0.083mg/kg，则合成不确定度为：uc(ω)=0.083mg/kg×4.0%=0.0033mg/kg。

2.5 扩展不确定度计算

不确定度各分量按正态分布处理，取包含因子k=2，包含概率P=95%，扩展不确定度：

U=k×uc(ω)=2×0.0033mg/kg=0.0066mg/kg

2.6 测量不确定度报告

黄瓜中联苯菊酯检测结果：

ω=(0.083±0.0066)mg/kg，k=2

3 结果与讨论

本实验通过对黄瓜中联苯菊酯测量过程中不确定度分析，找到了影响该方法不确定度的主要因素为测定结果重复性、标准工作液的配制；其次为样品处理过程中分取及定容，而样品称重、标准物质溶液纯度影响不大。因此需控制的关键环节主要包括：检测人员应熟练掌握样品前处理步骤并维护好仪器使其达到最佳状态，以提高检测的准确性，配制标液时使用精度更高的量器，保证标准溶液配置及处理过程中分取和定容的准确性,减少测定结果的不确定度。