TAP检测对乳腺癌患者预后判断的意义

张丽洁,李艳春,赵乔佳杰,王九菊,赵 园,魏绪仓

(陕西省人民医院血液病研究室,西安 710068;*通讯作者,E-mail:weixucang62@sina.com)

乳腺癌是当今危害女性健康的主要癌症类型。据世界卫生组织报道,2012年全球约有168万新发乳腺癌病例,522 000例死亡病例。近年来我国女性乳腺癌发病率也呈现明显增高趋势,且生存率较发达国家低[1-4]。目前主要是通过B超、CT、PET-CT等检查监测乳腺癌患者是否发生肿瘤转移等来判断预后情况。正常细胞恶变时,膜表面的聚糖结构发生改变,分泌的异常糖链糖蛋白达到一定程度后向血液排放,并较多地存在于外周血液[5-8]。外周血TAP检测,由于检查方便、快速、无创,易于被患者接受,已成为最方便、最广泛应用于临床的肿瘤检查方法[9,10]。本研究通过检测经治乳腺癌患者的外周血TAP表达水平,分析其与治疗后患者肿瘤转移的相关性,探讨TAP检测作为乳腺癌预后判断指标的可能性。

1 材料与方法

1.1 研究对象

选取2018-01～2018-11于陕西省人民医院入院诊治的52例女性乳腺癌患者,年龄30-86岁。所有患者均采用手术切除联合化疗的方法治疗。

1.2 试剂与方法

1.2.1 主要试剂 TAP检测试剂盒购自浙江瑞生医疗科技有限公司。

1.2.2 方法 ①采血与制片:采集乳腺癌手术及化疗后复查患者EDTA抗凝静脉血2 ml,制备厚薄均匀的血片2张,每张涂片的用血量为25 μl。静置待干后,在每张血涂片上依次垂直滴加3滴TAP凝集素试剂,静置1.5-2 h自然干燥,形成圆形“斑点”,即标本制作完成。②检测:将标本置于TAP集成阅片仪(浙江瑞生医疗科技有限公司)的显微镜下,用4倍平场消色差物镜,依次扫描观察血片标本的三个斑点,寻找特异形态的凝聚物。③TAP阳性判断:凝聚物颗粒面积≥121 μm2,边缘完整,椭圆形、不规则圆形或多边形,具有折光性,中央淡染区,判为TAP阳性;凝聚物颗粒面积<121 μm2,斑点呈树枝状、雪花状,无弧形条带状小颗粒者,判为TAP阴性。

1.3 统计学分析

采用SPSS18.0软件进行统计分析,TAP阳性表达率的比较采用χ2检验,治疗后未发生转移的乳腺癌患者组和出现转移的乳腺癌患者组的TAP凝聚物面积采用M(P25,P75)的形式表示,两组数据比较采用Wilcoxon(Mann-Whitney)秩和检验,P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不同临床病理特征乳腺癌患者治疗后TAP表达情况比较

对52例经治乳腺癌患者进行TAP检测,与年龄<60岁乳腺癌患者相比,年龄≥60岁患者治疗后的TAP阳性表达率显著增高,差异有统计学意义(χ2=5.127,P<0.05);PR阴性乳腺癌患者较阳性患者的TAP阳性表达率高,差异有统计学意义(χ2=4.282,P<0.05);与治疗后未发生转移的乳腺癌患者组相比,出现转移的乳腺癌患者组的TAP阳性表达率高,差异有统计学意义(χ2=18.326,P<0.05);而肿瘤的TNM分期、淋巴结受累状态、肿瘤组织ER表达情况及病程对TAP表达阳性率没有影响(见表1)。

表1不同临床病理特征乳腺癌患者治疗后TAP表达情况

Table1TAPexpressioninbreastcancerpatientswithdifferentclinicalandpathologicalcharacteristicsaftertreatment

指标nTAP阴性TAP阳性阳性率(%)χ2P年龄5.1270.024 <60岁2722518.5 ≥60岁25131248.0TNM分期1.2840.257 Ⅰ-Ⅱ36261027.8 Ⅲ-Ⅳ169743.8淋巴结状态0.0080.927 阴性2416833.3 阳性2819932.1ER状态0.3800.530 阴性74342.9 阳性45311431.1PR状态4.2820.039 阴性26141246.2 阳性2621519.2病程0.5530.457 <12月1914526.3 ≥12月33211236.4预后18.3260.000 未转移3832615.8 转移1431178.8

2.2 不同预后乳腺癌患者的TAP含量比较

比较治疗后出现转移的乳腺癌患者和未发生转移的乳腺癌患者的TAP凝聚物面积大小,并进行Wilcoxon秩和检验分析,发现治疗后出现转移的乳腺癌患者的TAP凝聚物面积[145.9(128,154.7)μm2]高于未发生转移的乳腺癌患者组[97.6(79.1,116.8)μm2],差异有统计学意义(Mann-WhitneyU=52,P<0.05)。

3 讨论

乳腺癌患者经手术治疗和放化疗辅助治疗后需要定期做超声、CT、PET-CT等影像学检查有无转移以评估预后情况。这些大量的检查给患者造成巨大的经济负担,亟需一种简便经济的检测手段实现对乳腺癌患者预后情况的初步评估。

大量研究表明异常糖链糖蛋白(TAP)的产生与肿瘤的发生、发展、转移及预后存在密切关系。TAP是肿瘤细胞在代谢过程中排放出来的异常糖蛋白和钙-组蛋白复合物,此类物质达到一定浓度后释放入血液[8-10]。本研究所采用的TAP检测技术是一种异常糖链的多级偶联技术,检测试剂含有凝集素,通过辅助和促进多种异常糖链糖蛋白和钙-组蛋白相互凝聚成特异形状的类晶体凝聚物,在TAP检测用图像分析仪下,可观察到特异图像,与没有TAP的血液有显著的区别。该检测技术可在同一反应体系中、将二十多种与肿瘤密切相关、糖链结构异常的糖蛋白进行一次性组合检测,大大提高了肿瘤检测的灵敏度和准确性。TAP检测已被应用于多种肿瘤的早期诊断,广谱筛查,疗效监控及预后判断,如消化道肿瘤的早期诊断和预后[11-14],肝癌的早期诊断[15],非小细胞肺癌的疗效监控[16],膀胱癌的早期诊断和预后判断[17,18]等。祁洁等[19]的研究发现TAP检测可作为乳腺癌的早期筛查指标,敏感度为80%,特异度为100%,准确度为90.42%,优于CEA和CA153检测指标。史英等[20]发现TAP在乳腺癌疗效监测等方面具有一定临床应用价值,乳腺癌患者经过2周期化疗后,临床疗效为部分缓解者化疗后TAP凝聚物面积减小;疾病进展者其化疗后TAP凝聚物面积增加。

我们通过比较不同临床病理特征乳腺癌患者治疗后TAP表达情况,发现与年龄<60岁患者相比,年龄≥60岁患者的TAP阳性表达率显著增高,差异有统计学意义(χ2=5.127,P<0.05),PR阴性乳腺癌患者的TAP阳性表达率高于PR阳性乳腺癌患者,差异有统计学意义(χ2=4.282,P<0.05),这与史英等[20]对不同临床病理特征乳腺癌患者治疗前TAP表达的比较结果有所不同,说明乳腺癌治疗前和治疗后TAP表达情况可能与不同的临床病理特征有关。研究还发现与治疗后未发生转移的乳腺癌患者组相比,出现转移的乳腺癌患者组的TAP阳性表达率高,差异有统计学意义(χ2=18.326,P<0.05);且出现转移乳腺癌患者组的TAP凝聚物面积[145.9(128,154.7)μm2]高于未发生转移的乳腺癌患者组[97.6(79.1,116.8)μm2],差异有统计学意义(Mann-WhitneyU=52,P<0.05),说明TAP含量在一定程度上体现肿瘤转移的情况。

由于本研究选取的乳腺癌患者在治疗前进行TAP检测的病例数较少,对于治疗是否影响TAP含量仍需进一步证实,但是根据观察到的1例乳腺癌患者治疗前后TAP含量的变化可以看到TAP凝聚物面积由治疗前的178.8 μm2降低至治疗后的130.529 μm2,说明手术及化疗后TAP含量有下降的趋势。刘丽燕等[16]在非小细胞肺癌的研究中也发现手术并化疗治疗后的非小细胞肺癌患者体内的TAP含量较治疗前显著降低。这些结果说明TAP含量在一定程度上反映了体内肿瘤负荷的情况。

本研究中样本量偏少,要更科学地评估TAP检测在乳腺癌患者预后判断中的意义需增大样本量,可在后续研究中深入探索。

综上所述,乳腺癌患者的TAP表达与肿瘤的转移存在密切联系,TAP检测结果可以作为乳腺癌患者预后判断的一种参考指标。