β-地中海贫血表型儿童地中海贫血基因突变分析

彭杨

【摘要】 目的 探讨分析β-地中海贫血表型儿童地中海贫血发生情况及基因突变类型。方法 选取160例β-地中海贫血表型患儿作为研究对象， 对所有患儿进行β-地中海贫血基因检测、α-地中海贫血基因检测。分析β-地中海贫血表型患儿的基因突变情况。结果 160例β-地中海贫血表型患儿中， 临床检查确诊为β-地中海贫血152例， 占比为95.00%（152/160）， 其中合并α-地中海贫血21例， 占比为13.82%（21/152）， β-地中海贫血患儿中， 发现11种突变、30种基因类型， 其中纯合子突变13例（8.55%）， 以CD41-42（-TCTT）/CD41-42（-TCTT）、CD17（A→T）/CD17（A→T）纯合子为主， 分别占4.60%、3.95%;双重杂合子突变30例（19.74%）， 其中， CD41-42（-TCTT）/CD17（A→T）、CD41-42（-TCTT）/IVS-Ⅱ-654（C→T）、CD41-42（-TCTT）/CD71-72（+A）位居前3位。杂合子突变109例（71.71%）， 主要以IVS-Ⅱ-654（C→T）、CD41-42（-TTCT）为主。合并α-地中海贫血患儿基因突变检测结果：6种α-地中海贫血基因突变、11种基因類型， 其中以纯合子--sea/-αα、-α3.7/-α3.7、-α4.2/-α4.2最为常见， 分别占19.05%、14.29%、14.29%， 其次为杂合子及双重杂合子。结论 就本地区而言， β-地中海贫血表型患儿存在突变类型多样化、基因类型多样化的现状， 且发病率较高， 应采取积极有效的措施， 加强地中海贫血的相关干预工作， 可以有效减少低地中海贫血儿的出生。

【关键词】 β-地中海贫血;儿童;基因;检测;突变

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.04.043

地中海贫血又被称之为海洋性贫血， 主要是由于珠蛋白基因缺失、珠蛋白基因存在缺陷而导致其在合成的过程中存在一定的障碍。临床上， 根据患者病因所涉及的不同珠蛋白链， 地中海贫血可进一步划分为α-地中海贫血、β-地中海贫血、γ-地中海贫血和δ-地中海贫血。临床上， α-地中海贫血、β-地中海贫血最为常见[1]。其中， β-地中海贫血在我国最为常见， 尤其是在长江流域以南地区， 发病率较高。根据相关研究资料显示， 广西β-地中海贫血发病率高达6.43%， 严重影响着儿童的健康成长和发育[2]。因此， 必须要了解本地区儿童β-地中海贫血的发病情况及基因突变类型， 并在此基础上进行有效的临床治疗。为此， 本院选取2017年1月～2018年1月收治的160例β-地中海贫血表型患儿作为研究对象， 旨在探究β-地中海贫血表型儿童地中海贫血发生情况及基因突变类型及合并ɑ-地中海贫血的发生率， 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2017年1月～2018年1月本院收治的160例β-地中海贫血表型患儿作为研究对象。所有患儿均进行血液联合血红蛋白组分分析， 并确诊为β-地中海贫血表型。其中， 男103例， 女57例;年龄0.9～15.0岁， 平均年龄（7.95±6.05）岁。

1. 2 方法

1. 2. 1 仪器和试剂 扩增仪（Thermo公司， 型号C1000PCR）、核酸提取仪（厦门致善公司， 型号Lab-Aid 820）、凝胶成像分析系统（BIO公司， 型号GELOOCXR）、超微量分光光度计（Thamo公司， 型号TL600B）。DNA提取试剂为仪器配套试剂， PCR反应试剂（深圳亚能公司）。

1. 2. 2 检测方法 静脉抽取患儿2 ml血液， 并进行EDTA抗凝， 再利用核酸提取仪， 并严格按照其操作步骤和方法， 进行DNA提取。然后采用胆管多重PCR扩增结合反响点杂交技术， 对患儿进行17种β-地中海贫血突变检测;对于已经确诊的β-地中海贫血患儿再次进行6种α-地中海贫血基因突变检测。

2 结果

2. 1 临床诊断结果 160例β-地中海贫血表型患儿中， 临床检查确诊为β-地中海贫血152例， 占比为95.00%（152/160）， 其中合并α-地中海贫血有21例， 占比为13.82%（21/152）。

2. 2 β-地中海贫血患儿基因突变情况 β-地中海贫血患儿中， 发现11种突变、30种基因类型， 其中纯合子突变13例（8.55%）， 以CD41-42（-TCTT）/CD41-42（-TCTT）、CD17（A→T）/CD17（A→T）纯合子为主， 分别占4.60%、3.95%;双重杂合子突变30例（19.74%）， 其中， CD41-42（-TCTT）/CD17（A→T）、CD41-42（-TCTT）/IVS-Ⅱ-654（C→T）、CD41-42（-TCTT）/CD71-72（+A）位居前3位。见表1。杂合子突变109例（71.71%）， 主要以IVS-Ⅱ-654（C→T）、CD41-42（-TTCT）为主， 其次为CD17（A→T）、CD71-72（+A）、-28（A→G）、CD43（G→T）、CD27-28（+C）、βE（GAG→AAG）。

2. 3 合并α-地中海贫血患儿基因突变情况 合并α-地中海贫血患儿基因突变检测结果：6种α-地中海贫血基因突变、11种基因类型， 其中纯合子突变10例（47.62%）， 以--sea/-αα、-α3.7/-α3.7、-α4.2/-α4.2最为常见， 分别占19.05%、14.29%、14.29%;其次为杂合子9例（42.86%）， 其中以ΑWSα/αα、-α3.7/αα、-α4.2/αα为前3位， 分别占据14.29%、9.52%、9.52%。双重杂合子突变2例（9.52%）， 分别为β41-42/βN合并--SEA/αα、β654/βN合并--SEA/αα。见表2。

3 讨论

根据临床研究中显示， 地中海贫血属于一种单基因遗传性疾病， 在世界上具有较高的发病率。在4种地中海贫血的类型中， 以β-地中海贫血最为常见。根据流行性病学相关研究资料显示， 地中海贫血遍布世界各地， 其中以地中海地区、中非洲、亚洲、南太平洋地区为主要病发地区[3]。在我国也具有较高的发病率， 尤其是以长江流域以南的地区两广地区、贵州、四川等地区为首[4]。

临床上， 轻度患儿常常表现轻度贫血、容易疲劳等， 多无自觉症状， 不易被察觉;中度患儿常常出现中度贫血， 且大多患儿可以成长至成年;重度患儿自出生之日起便出现贫血、肝脾重大、黄疸、发育不良， 并常常导致一些严重的并发症， 如急性心包炎、继发性脾功能亢进、继发性血色病等。就目前而言， 临床上尚未出現有效的治疗方法， 患儿必须要定期进行输血、应用螯合剂除铁以维持生命[5， 6]。可以说， 地中海贫血不仅影响着患儿的生命健康， 也给家庭带来了沉重的负担。由于地中海贫血属于一种单基因遗传性疾病， 具有高度的遗传异质性， 可促使患者体内的基因发生突变。因此， 在对地中海贫血儿童进行临床治疗前， 加强其基因突变和疾病发生情况的分析尤为重要[7， 8]。

本次研究结果充分表明：地中海贫血儿童基因突变、基因类型多样。其中， β-地中海贫血患儿中， 发现11种突变、30种基因类型， 其中以CD41-42（-TCTT）/CD41-42（-TCTT）、CD17（A→T）/CD17（A→T）纯合子为主， 其次为CD41-42（-TCTT）/CD17（A→T）、CD41-42（-TCTT）/IVS-Ⅱ-654（C→T）、CD41-42（-TCTT）/CD71-72（+A）等双重杂合子突变;合并α-地中海贫血患儿中， 发现6种α-地中海贫血基因突变、11种基因类型， 其中以纯合子--sea/-αα、-α3.7/-α3.7、-α4.2/-α4.2最为常见， 杂合子以ΑWSα/αα、-α3.7/αα、-α4.2/αα为前3位。双重杂合子突变分别为β41-42/βN合并--SEA/αα、β654/βN合并--SEA/αα。

综上所述， β-地中海贫血表型患儿基因类型多样化， 必须要据此采取有效的措施， 进行科学的干预， 以有效降低其发生率。

参考文献

[1] 肖晗， 向赟， 孙红， 等.武汉地区儿童β地中海贫血基因突变类型分析.生物医学工程与临床， 2015， 19（5）：515-518.

[2] 李东明， 胡雪桦， 黄战， 等.β-地中海贫血表型儿童地中海贫血基因突变分析.中国妇幼保健， 2015， 30（3）：370-372.

[3] 陈孜孜.泸州市儿童β地中海贫血基因突变类型研究.泸州医学院， 2014.

[4] 陈善昌， 胡静云， 陈栋， 等.贺州市地贫初筛阳性儿童β-地中海贫血基因突变类型分析.实用医学杂志， 2013， 29（1）：97-98.

[5] 刘兴梅， 苏莉， 李贵芳， 等.贵州地区重型β-地中海贫血基因突变类型分析.贵州医科大学学报， 2016， 41（4）：407-409.

[6] 何琳琳.130例β-地中海贫血基因突变类型分析.现代临床医学， 2016， 42（2）：120-121.

[7] 梁莉， 黄桂芳， 赵建晖， 等.百色壮族人.群地中海贫血基因突变类型及产前诊断结果临床研究.中华临床医师杂志（电子版）， 2016， 10（16）：2516-2519.

[8] 张强， 范歆， 何升， 等.广西壮族自治区β-地中海贫血基因突变分析.中华地方病学杂志， 2014， 33（6）：615-618.

[收稿日期：2018-07-27]