血浆T-tau、Aβ-42与维持性血液透析患者轻度认知功能障碍的相关性研究*

蔡源，董莉萍，宋小红，李华，吴扬，位红兰，董骏武

（华中科技大学同济医学院附属普爱医院 肾病内科，湖北 武汉 430033）

维持性血液透析患者是容易合并全身各种并发症的特殊人群。30%～87%患者合并认知功能障碍（mild cognitive impairment, MCI）[1-4]，但血液透析患者MCI的具体发病机制目前尚不清楚。MCI是指介于正常老化和早期老年痴呆间，出现轻度记忆力或认知功能障碍，但不影响日常生活能力的一种临床状态。据报道，维持性血液透析患者轻度MCI发生率高达89%[5]。国外研究发现，阿尔茨海默病（Alzheimer's disease, AD）患者血浆T-tau及Aβ-42蛋白浓度较正常人群高[6-8]。目前尚无研究报道血浆T-tau、Aβ-42蛋白浓度是否与维持性血液透析患者轻度MCI有关。本研究通过检测血液透析患者血浆T-tau、Aβ-42蛋白浓度，并比较认知功能正常及轻度MCI患者的差异，探寻两者相关性及其可能的危险因素，以指导临床诊疗。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年6月—2015年3月华中科技大学同济医学院附属普爱医院维持性血液透析≥3个月患者，根据酶联免疫吸附法（ELISA）结果将其分为MCI组和对照组，分别为45和42例。MCI组中男性27例，女性18例；平均年龄（61.98±10.86）岁。对照组中男性21例，女性21例。纳入标准：①符合《心理障碍诊断与统计手册》MCI诊断标准；②有记忆力减退或其他MCI症状；③有轻度认知功能损害的证据，简易智力状态检查量表（mini-mental state examination，MMSE）评分：中学及以上＜25～27分，小学＜21～25分，文盲＜18～21分；④日常生活能力量表评分＜26分；⑤Hachinski缺血量表评分≤4分；⑥病程＞3个月。排除标准：①符合痴呆诊断标准；②有精神病史、先天精神发育迟缓或抑郁症。本研究通过本院伦理委员会批准，患者及其家属知情同意。

1.2 方法

1.2.1 一般检查和神经心理评分 所有受试者接受MMSE、日常生活能力量表、Hachinski缺血量表评估、常规血液检查（血常规、肝肾功能、电解质及甲状旁腺激素），采集既往病史，每2周透析时间。

1.2.2 血浆 T-tau、Aβ-42 蛋白浓度检测 采用ELISA检测血浆T-tau、Aβ-42蛋白浓度（试剂盒购于上海信帆生物科技有限公司）。将待测样品加入样品孔，同时设空白对照、标准品对照，37℃孵育30 min，洗板5次，空白对照以外的孔均加入酶标试剂，重复孵育及洗板，加入显色剂，37℃避光显色15 min后加入终止液，用352型酶标仪（芬兰Labsystems Multiskan MS公司）在450 nm波长处测量各孔吸光度值。利用标准品浓度获得标准曲线的直线回归方程，将样本吸光度值代入方程获得样本浓度。

1.3 统计学方法

数据分析采用SPSS 19.0统计软件。计量资料以均数±标准差（±s）或中位数和四分位间距M（P25，P75）表示，比较用t检验或秩和检验；计数资料以构成比或率（%）表示，比较用χ2检验，相关分析用Spearman法，影响因素的分析采用Logistic回归模型，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组T-tau、Aβ-42浓度蛋白及一般临床资料比较

两组T-tau蛋白浓度比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。两组Aβ-42蛋白浓度比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。两组年龄、糖尿病患者比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。两组脑血管疾病患者比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。两组每2周透析时间比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。两组性别及其他实验室检查比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

2.2 两组是否合并脑血管疾病患者T-tau、Aβ-42蛋白浓度比较

两组合并脑血管疾病与未合并脑血管疾病患者T-tau蛋白浓度比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。两组合并脑血管疾病与未合并脑血管疾病患者Aβ-42蛋白浓度比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表1 两组T-tau、Aβ-42蛋白浓度及一般临床资料比较

续表1

表2 两组是否合并脑血管疾病患者T-tau、Aβ-42蛋白浓度比较 （±s）

表2 两组是否合并脑血管疾病患者T-tau、Aβ-42蛋白浓度比较 （±s）

T-tau/（pg/ml） Aβ-42/（μg/L）合并脑血管疾病 未合并脑血管疾病 合并脑血管疾病 未合并脑血管疾病MCI组 45 1 230.43±320.85 1 063.08±358.54 66.44±18.22 57.36±20.34对照组 42 740.06±265.85 823.14±354.35 71.46±22.14 63.70±19.02 t值 4.897 4.536 -3.229 -3.225 P值 0.041 0.032 0.057 0.690组别 n

2.3 两组有无糖尿病患者的T-tau、Aβ-42蛋白浓度比较

两组有糖尿病与无糖尿病患者T-tau蛋白浓度比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。两组有糖尿病与无糖尿病患者Aβ-42蛋白浓度比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表 3。

2.4 T-tau蛋白浓度的相关因素分析

Spearman相关分析显示，T-tau蛋白浓度与甘油三酯、脑血管疾病呈正相关（P＜0.05）；与每2周透析时间呈负相关（P＜0.05）。排除年龄、性别影响，偏相关分析显示，T-tau蛋白浓度与尿素下降率（urea reduction ratio, URR）每 2 周透析时间均呈负相关（P＜0.05）。见表 4。

2.5 不同T-tau蛋白浓度与MCI的关系

Logistic回归分析发现，T-tau＜980.96 pg/ml是 MCI的保护因素（P＜0.05），而 T-tau ≥ 980.96 pg/ml是 MCI的危险因素（P＜0.05）。逐步去除年龄、性别、脑血管疾病、URR、每2周透析时间及糖尿病等影响后，T-tau ≥ 980.96 pg/ml仍是 MCI的危险因素（P＜0.05）。见表5。

表3 两组有无糖尿病患者的T-tau、Aβ-42蛋白浓度比较 （±s）

表3 两组有无糖尿病患者的T-tau、Aβ-42蛋白浓度比较 （±s）

T-tau/（pg/ml） Aβ-42/（μg/L）有糖尿病 无糖尿病 有糖尿病 无糖尿病MCI组 45 1 140.72±339.98 1 141.81±368.15 62.52±23.17 60.33±14.13对照组 42 723.56±345.75 839.72±338.06 66.00±19.43 64.64±19.83 t值 -6.344 -6.159 18.357 18.381 P值 0.024 0.019 0.780 0.170组别 n

表4 T-tau蛋白浓度的相关因素分析

表5 不同T-tau蛋白浓度与MCI的Logistic回归分析参数

3 讨论

MCI是AD的极早期阶段。在AD发病机制研究中发现，其临床前期脑内已出现老年斑和神经元纤维缠结。老年斑的主要组织成分是Aβ，神经元纤维缠结主要原因是tau蛋白的过度磷酸化。早期研究发现，脑脊液中Aβ-42、tau蛋白浓度与MCI的发病机制有关[9-10]。在慢性肾衰竭合并AD患者中研究发现，脑脊液T-tau、p-tau较未合并AD患者升高，但脑脊液Aβ-42浓度下降[11-12]。ZETTERBERG等[8]研究发现，AD患者血浆T-tau蛋白浓度较MCI患者及正常人群升高；MCI患者血浆T-tau蛋白浓度与正常人群无差异。而SPARKS等[6]研究发现，MCI及AD患者血浆T-tau蛋白浓度较正常人群下降。本研究首次报道在维持性血液透析患者中，MCI患者较认知功能正常患者血浆T-tau蛋白浓度升高，但两组Aβ-42蛋白浓度比较无差异。

目前，维持性血液透析患者MCI的具体发病机制尚不清楚，现有研究认为其危险因素可能包括年龄[2，13]、脑血管疾病[14]及动脉粥样硬化[15-16]等。糖尿病也是MCI的危险因素。研究发现，胰岛素通过抑制糖原合成 激 酶 3β（glycogen synthase kinase-3β, GSK-3β）活性，从而抑制tau蛋白磷酸化。当胰岛素缺乏或胰岛素抵抗时，GSK-3β激活、tau蛋白磷酸化，形成神经纤维结，影响认知功能[17-18]。此外，中枢神经系统内胰岛素缺乏或抵抗可通过降低胰岛素降解酶活性，导致Aβ降解不足，有毒性的Aβ-42形成增加，促进老年斑形成和神经元退行性变[17，19]。本研究结果显示，两组是否患有脑血管疾病或糖尿病患者T-tau及Aβ-42蛋白浓度无差异；但无论是否患有脑血管疾病或糖尿病，MCI组较对照组T-tau蛋白浓度均升高。相关分析显示，T-tau蛋白浓度与患有糖尿病无关，但与患有脑血管疾病呈正相关。进一步偏相关分析发现，维持性血液透析患者血浆T-tau蛋白浓度与透析充分性、每周透析时间密切相关。进一步回归分析发现，T-tau≥980.96 pg/ml为MCI的危险因素，而T-tau＜980.96 pg/ml为MCI的保护因素，说明降低血浆T-tau蛋白浓度可能是预防维持性血液透析患者MCI的有效手段。但引起维持性血液透析患者血浆T-tau蛋白浓度过度升高的原因仍有待进一步研究。

综上所述，本研究显示维持性血液透析MCI患者血浆T-tau蛋白浓度较认知功能正常者升高，降低血浆T-tau蛋白浓度可能是预防维持性血液透析患者MCI的有效手段。