江苏省丹阳市65岁以上老年人结核菌素皮肤试验和γ干扰素体外释放试验检测结果分析

作者单位：210009江苏省南京市,江苏省疾病预防控制中心慢性传染病防制所

结核病一直是严重危害人类健康的呼吸道传播疾病[1],可侵犯人体除牙齿和头发以外的所有器官[2]。2017年WHO发布的《2017年全球结核病报告》显示,我国依然是结核病高负担国家。报告指出，大多数结核病死亡病例可以通过早期诊断和适当治疗来预防,但因缺乏有效的实验室工具,早期诊断一直是结核病防治工作的重点和难点[3]。

结核杆菌进入人体会发生一系列复杂的细胞免疫过程,结核感染者筛查的主要手段有γ干扰素体外释放试验(TB-IGRA)和结核菌素皮肤试验(TST)[4]。本研究比较分析了2013年江苏省丹阳市≥65岁老年人TST和IGRA检测结果,探究基层≥65岁老年人筛查结核感染的适宜技术。

1 材料与方法

1.1 样本资料 本研究资料来源于结核病流行与干预模式研究(2013ZX10003004)子课题:结核分枝杆菌感染流行病学调查和队列研究。

1.2 IGRA试剂检测 使用澳大利亚IGRA提供的3种采血管(Nil对照,YB抗原,Mitogen)采集静脉血。每管0.8～1.2 mL血液。上下充分振摇10次摇匀。混匀后的血样必须在16 h内移至37 ℃条件下孵育 20 h,切勿冷藏或冷冻样本。样本孵育完成后,将样本以2000～3000 r/min,离心15 min,取上层血浆,并于48 h内完成检测。检测采用QFT-GIT试剂盒(澳大利亚Cellestis公司)，所有操作按照说明书的规定进行。

1.3 TST检测 用75%酒精对左前臂掌侧中、下1/3交界处的皮肤进行局部皮肤消毒,待酒精蒸发干燥后,用结核菌素注射器缓慢注入 0.1 mL(含 5 个结核菌素单位)的 PPD。于注射后48～72 h查验注射部位反应。以硬结的横径和纵径的平均直径进行结果判断。阴性结果(-):硬结平均直径<5 mm或无反应者。阳性结果(+):硬结平均直径≥5 mm者(以下称PPD5)，硬结平均直径5～9 mm为一般阳性;10～19 mm为中度阳性(以下称PPD10);≥20 mm或局部出现水泡、坏死及淋巴管炎者为强阳性(以下称PPD15)。

1.4 统计学分析 使用EpiData 3.1软件对调查结果进行双录入并核查校对;采用SPSS 18.0软件对数据进行分析。计数资料用例数(百分数)描述,组间比较采用卡方检验,采用一致性检验比较TST和IGRA的检测结果,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般情况 本研究选取2013年丹阳市≥65岁老年人共计1109例,年龄65～94岁,中位年龄71岁, 其中男508例,女601例。IGRA方法检测出阳性339例,阳性率为30.6%。TST方法中,PPD5 382例(34.4%);PPD10 319例(28.8%);PPD15 205例(18.5%)。

2.2 接种卡介苗对检出率的影响 选取的样本中有83例有卡介苗接种史(接种组),1026例未接种卡介苗(未接种组)。2组间IGRA阳性率、TST阳性率差异均无统计学意义(均P>0.05)。见表1。

2.3 性别对检出率的影响 男性组IGRA、PPD5、PPD10、PPD15阳性率均显著高于女性组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。见表2。

表1 卡介苗接种组和未接种组间TST和IGRA阳性率比较(n)

表2 男女组间TST和IGRA阳性率比较(n)

注：与男性组比较,*P<0.05

2.4 评价TST与IGRA诊断一致性 以IGRA技术为金标准，PPD5检测结核感染的灵敏度为71.09%，特异度为81.69%，Kappa值为0.510(P<0.05)；PPD10灵敏度为65.49%，特异度为87.40%，Kappa值为0.538(P<0.05)；PPD15灵敏度为48.08%，特异度为94.55%，Kappa值为0.479(P<0.05)。见表3。

表3 TST和IGRA两种检测方法结果比较分析(n)

3 讨论

全球有大约1/3的人感染结核分枝杆菌,其中绝大部分的人长期处于潜伏感染状态,约10%的潜伏感染者可能在一生中发展为结核病[5]。老年人因身体抵抗力下降及糖尿病等基础疾病,更容易罹患结核病。2010 年全国结核病流行病学调查显示,结核病随着年龄增长,发病率也不断增加,≥60岁老 年 肺 结 核 病人约占≥15岁全人群患病例数的50%,且该人群在 65 岁后出现发病高峰, 但同期老年肺结核病人登记数仅占20%[6];所以对≥65岁老年人的重点筛查对于结核病防控工作有着重要的意义。

2017年国务院颁发的《“十三五”全国结核病防治规划》也明确提出针对≥65岁老年人开展结核病重点人群的主动筛查工作。目前基层对≥65岁老年人的肺结核筛查主要依赖于问诊及X光片或DR影像学检测,其灵敏度和特异度都不理想,且影像学检测成本较高,在基层实施起来也受设备及人员不足等条件限制[7]。

结核病潜伏感染目前尚无诊断金标准,IGRA作为一种体外特异性T细胞免疫应答检测技术,因较高的灵敏度和特异度近年来作为辅助手段在临床诊断中得到了广泛应用,但其成本较高,且对实验室及实验人员都有较高的要求[8],不宜在基层开展使用。TST检测技术成本低廉,且操作简单,但由于TST所用的刺激原PPD与卡介苗具有相似的组分[9],在我国TST筛查结果容易受到卡介苗接种的影响[10],随着卡介苗接种普及,临床上为了排除其干扰，将判断结核杆菌感染的TST红肿硬块直径提高到15 mm以增加特异性,但同时灵敏度降低。本研究表明,≥65岁老年人TST检测基本不受卡介苗影响,同时与IGRA检测方法相比,PPD10灵敏度为65.49%,特异度为87.40%,Kappa值为0.538,略高于PPD5和PPD15。

本研究提示，男性结核感染率高于女性,以IGRA检测结果判定，男性感染率为37.4%(190/508),女性为24.8%(149/601),这与男性人群发病率高于女性一致,这种现象的发生可能与男性外出务工工作环境差、时间长、劳动强度大，吸烟酗酒等因素相关,所以针对≥65岁老人重点筛查中应对男性多加关注。

综上所述, TST检测技术操作简单,成本低且不需要实验室,适合在基层开展实施,可作为≥65岁老年人的筛查手段,另外本研究提示,针对≥65岁老年人群体,可采用PPD10为参考标准判断,适当提高检出率。