乙酰螺旋霉素糖衣片含量测定方法探讨

潘扬

摘 要：本实验对乙酰螺旋霉素糖衣片含量测定方法进行研究。方法：采用奥泰公司 C18 色谱柱（218 mm×4.6mm，5μm），乙腈一0.1mol/L醋酸铵溶液（用冰醋酸调PH值7.3）（60：40），检测波长为232nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。乙酰螺旋霉平均回收率分别为99.3%。结论：本法简便、准确，可用于乙酰螺旋霉素糖衣片中乙酰螺旋霉的含量测定。

关键词：乙酰螺旋霉素糖衣片；含量；测定

乙酰螺旋霉素为螺旋霉素的乙酰化衍生物，属16元环大环内酯类。乙酰螺旋霉素为单乙酰螺旋霉素Ⅱ、单乙酰螺旋霉素Ⅲ、双乙酰螺旋霉素Ⅱ和双乙酰螺旋霉素Ⅲ四个组分为主的混合物。乙酰螺旋霉素片，适应症为适用于敏感葡萄球菌、链球菌属和肺炎链球菌所致的轻、中度感染，可用于隐孢子虫病、或作为治疗妊娠期妇女弓形体病的选用药物。乙酰螺旋霉素常用于治疗孕期弓形虫感染、牙周炎、急性支气管炎、慢性支气管炎急性发作、肺炎、年人牙周炎、小儿急性化脓性扁桃体炎、小儿呼吸道感染等[1-6]。糖衣片可令片剂美观、还能掩盖中药的不良气味，从而使得病人乐于服用。本实验采用高效液相色谱法对乙酰螺旋霉素糖衣片中的乙酰螺旋霉的进行了含量测定。

1 仪器与试药

1.1 仪器：iChrom 5100高效液相色谱仪（大连依利特分析仪器有限公司）；KQ5200B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；723PC扫描型可见分光光度计（上海虔钧科学仪器有限公司）； JDS-2B 双功能冷冻水浴恒温振荡器（常州金坛精达仪器制造有限公司）；Plus-E3超纯水机实验室级超纯水机（南京易普易达科技发展有限公司）；分析天平（常州市幸运电子设备有限公司）；PC-220色谱柱恒温箱（天津艾维欧科技发展有限公司）；SP-1920紫外可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司）；SPR-BW200 液相色谱进样瓶专用洗瓶机（北京铭成基业科技有限公司）；pH610 WIGGENS PH610 台式酸度计（北京桑翌实验仪器研究所）；；SYZ-A石英亚沸蒸馏器（常州迅生仪器有限公司）。

1.2 色谱柱：奥泰公司 C18 色谱柱（218 mm×4.6mm，5μm）。

1.3 对照品：乙酰螺旋霉 购自中国药品生物制品检定所。

1.4 试剂：甲醇（南京化学试剂股份有限公司）、醋酸铵（青岛春宇化工有限公司）、乙腈（南京化学试剂股份有限公司）、磷酸（南京化学试剂股份有限公司）、冰醋酸（南京化学试剂股份有限公司）、磷酸二氢钾（南京化学试剂股份有限公司）。

2 测定方法确定

2.1 色谱条件

依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下。流动相：乙腈一0.1mol/L醋酸铵溶液（用冰醋酸调PH值7.3）（60：40），检测波长：232nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按乙酰螺旋霉峰计算应不得低于2000。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取乙酰螺旋霉对照品适量，置容量瓶中，加流动相溶解并定量稀释制成每lml中约含1mg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备

取乙酰螺旋霉素糖衣片，研碎，称取，置具塞锥形瓶中，加入70%甲醇适量，密塞，超声处理10分钟，放冷，过滤，挥干70%甲醇提取液残渣，加流动相溶解并定量稀释制成每lml中约含lmg的溶液，摇匀，滤过。取续滤液，即得。

2.4 专属性试验

依照处方取乙酰螺旋霉素糖衣片辅料，按样品制备工艺制成阴性对照样品，依上述方法测定，结果在单乙酰螺旋霉素Ⅱ、单乙酰螺旋霉素Ⅲ、双乙酰螺旋霉素Ⅱ和双乙酰螺旋霉素Ⅲ出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。

2.5 精密度试验

精密称取乙酰螺旋霉对照品溶液。照上述色谱条件，精密吸取10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果单乙酰螺旋霉素Ⅱ、单乙酰螺旋霉素Ⅲ、双乙酰螺旋霉素Ⅱ和双乙酰螺旋霉素ⅢRSD分别为0.76%、0.81%、0.91%、0.85%，表明本方法精密度良好。

2.6 对照品的线性考察

精密称取乙酰螺旋霉对照品溶液分别精密吸取2μL、4μL、6μL、8μL、10μL、12μL、14μL、16μL、18μL、20μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，乙酰螺旋霉单乙酰螺旋霉素Ⅱ、单乙酰螺旋霉素Ⅲ、双乙酰螺旋霉素Ⅱ和双乙酰螺旋霉素Ⅲ均呈良好的线性关系。

2.7 重现性试验

称取同一批的乙酰螺旋霉素糖衣片样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.93%，结果表明此方法的重现性良好。

2.8 准确度试验

精密称取已知含量的样品6份，分别加入一定量的乙酰螺旋霉对照品，上述方法进行测定，计算回收率，平均回收率为99.3%，RSD=0.81%。结果表明此方法的回收率良好。

3 讨论

分别考察乙腈一0.085%磷酸溶液（10：90），乙腈一0.1mol/L醋酸铵溶液（用冰醋酸调PH值7.3）（50：50），水：乙腈：甲醇：冰醋酸（77∶10∶11∶2），乙腈：0.2%醋酸水溶液（15：85），乙腈一0.1mol/L醋酸銨溶液（用冰醋酸调PH值7.3）（60：40），乙腈一0.1mol/L醋酸铵溶液（用冰醋酸调PH值7.3）（40：60），乙腈-0.033 mol/L磷酸二氢钾溶液（40：60）不同比例的流动相，结果以乙腈一0.1mol/L醋酸铵溶液（用冰醋酸调PH值7.3）（60：40）为流动相为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用乙腈一0.1mol/L醋酸铵溶液（用冰醋酸调PH值7.3）（60：40）为流动相。

参考文献

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