制霉素搽剂质量控制与稳定性研究

丛萍

摘 要：本实验研究制霉素搽剂的制备方法进行研究。含量测定方法：固定相为：奥泰公司C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），醋酸钠缓冲溶液（PH4.0）-乙腈（60∶40），检测波长：306nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。；制霉素在10～320μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。制霉素平均回收率分别为99.1%，RSD为0.86%。结论：本制剂稳定、可靠。制霉素搽剂可以存放24个月。

关键词：制霉素搽剂；制备；质量

制霉素为黄色或棕黄色粉末，对光、空气、酸和碱均不稳定。制霉素可与真菌细胞膜上的甾醇相结合，致细胞膜通透性的改变，以致重要细胞内容物漏失而发挥抗真菌作用。制霉素也用于长期服用广谱抗生素所致的真菌性二重感染。制霉素可用于消化道真菌感染、老年霉菌性陰道炎、念珠菌阴道炎、乳腺炎等[1-4]。搽剂一种在皮肤上搽用的液体外用制剂，可分为溶液型、乳剂型及混悬液型，一般以醇或油等为分散剂。搽剂最早出现于我国现存最早的出土于马王堆汉墓的古医方《五十二病方》。最早搽剂为天然药物制剂，即利用自然界中常见的某种药物不加炮制而稍作加工后直接使用，为人类早期对天然药物的一种原生态使用方法。本实验研究制霉素搽剂的制备方法进行研究。

1 仪器与试药

1.1 仪器：百典BLY系列立式恒温水槽（上海百典仪器设备有限公司）；电热恒温水浴锅-DU-30（杭州汇尔仪器设备有限公司）；ELGA Purelab UHQ小型超纯水仪（北京东迅天地医疗仪器有限公司）；帕恩特应用分析级超纯水器（北京湘顺源科技有限公司）；双光束紫外可见分光光度计-UV1900（杭州汇尔仪器设备有限公司）；HZY-404/503实验室电子天平（浙江景程生物科技有限公司）；T9双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；晨阳台式大容量离心机（常州市金坛晨阳电子仪器）；电热恒温培养箱（广州越特科学仪器有限公司）；RE-52AA旋转蒸发仪（东莞康润仪器设备有限公司）；Stuart加热磁力搅拌器（艾泰赫生化科技（苏州）有限公司）； KYX-800YS 色谱配套超声波清洗机（沈阳科晶自动化设备有限公司）；KHW-D-1LC精密拉伸水浴锅（上海科恒实业发展有限公司）；旋转粘度计专用恒温槽CH1006（上海右一仪器有限公司）；DTD-6小容量台式超声波清洗机（鼎泰（湖北）生化科技设备制造公司）。

1.2色谱柱：奥泰公司C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）。

1.3对照品：制霉素 购自中国药品生物制品检定所。

1.4试剂：甲醇（东营市鑫旺化工有限责任公司）、乙腈（东营市鑫旺化工有限责任公司）、盐酸（苏州源泰润化工有限公司）、醋酸钠（江阴祥辉化工有限公司）、醋酸（东营市鑫旺化工有限责任公司）、乙醇（东营市鑫旺化工有限责任公司）。

1.5 原辅料：甘油（西安晋湘药用辅料有限公司）。

2 制备方法

2.1处方

制霉素、甘油等。

2.2制霉素搽剂的制备

制霉素、甘油等混合，搅拌均匀，分装，即得。

3质量控制

3.1性状

本品为黄色粘稠性混悬液。符合《中国药典》2015年版对搽剂的要求。

3.2 含量测定

3.2.1 依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[5-6]。流动相：醋酸钠缓冲溶液（PH4.0）-乙腈（60∶40），检测波长：306nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按制霉素计算应不得低于3000。

3.2.2 对照品溶液的制备

精密称取制霉素对照品适量，置容量瓶中，加甲醇溶解，加甲醇制成每1mL含100μg的溶液，避光保存，即得。

3.2.3 供试品溶液的制备

取制霉素搽剂精密称定，置具小烧杯中，加流动相适量，超声处理（240W，40kHz）5分钟，放冷至室温，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5m1，置25m1量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过。取续滤液，即得。

3.2.4 专属性试验

依照处方取甘油，按样品制备工艺制成阴性对照样品，按供试品溶液的制备方法制成阴性液，依色谱条件测定，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。

3.2.5 精密度试验

依照3.2.2项下制备对照品溶液，精密吸取制霉素对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.82%。结果表明，本实验精密度良好。

3.2.6 重现性试验

分别称取样品6份，分别依照3.2.3项下供试品制备方法制备供试品，按含量测定项下方法测定含量，并计算样品的RSD值为0.81%，结果表明，此含量测定方法的重现性良好。

3.2.7 回收率试验

取已知含量的同一批供试品各6份，分别精密添加一定量的制霉素对照品，测定含量，计算回收率。平均回收率为99.1%，RSD为0.86%。

3.2.8 标准曲线的制备

制备浓度为10、20、40、80、160、320μg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，氨苄青霉素对照品在10～320μg·mL-1范围内线性关系良好。

3.3 微生物限度检查

按照《中国药典》2015年版附录所载方法测定，结果符合规定。

3.4 稳定性考察

将本品置于30℃的恒温箱内，分别于第1、2、3、12、24个月末取样并测定，考察外观、微生物限度、含量的测定结果做比较。放置36个月后， 制霉素搽剂片未发生明显变化。经测定发现， 外观、微生物限度、含量均稳定，表明制霉素搽剂可以存放24个月。

4 讨论

本制剂稳定、可靠，符合中国药典相关规定。此测定方法可用于制霉素搽剂中制霉素的含量测定。制霉素搽剂可以存放24个月。

参考文献

[1]妇科消炎方与硝呋太尔制霉素对老年霉菌性阴道炎患者血清C反应蛋白和氧化应激产物及其疗效的影响[J].程松，王锐.抗感染药学.2016（05）.

[2]国产与进口硝呋太尔-制霉菌素阴道栓随机双盲对照治疗念珠菌阴道炎[J].董晓静，胡丽娜，唐莨萏，常青.中国临床药理学杂志. 2004（05）.

[3]妇科消炎方联合硝呋太尔制霉素对老年霉菌性阴道炎C反应蛋白、氧化应激产物的影响及其疗效[J].牛军霞，张志辉.中国生化药物杂志. 2016（04）.

[4]国产硝呋太尔制霉素阴道软胶囊治疗阴道炎的临床研究[J].耿力，宋学红，郝增平，陈蕾，詹宇新，朱馥丽，刘军，唐学磊，杨惠静.中国妇产科临床杂志. 2007（01）.

[5]中国制霉菌素主要成分的分离、制备、鉴定和再命名[J].马剑文，刘玉波，文德秀，朱凤娟，王绍文，凌大奎.抗生素. 1987（02）.

[6]高效液相色谱法研究国内外制霉菌素的组成[J].马剑文，刘玉波，文德秀，朱凤娟，王绍文. 药学学报.1985（04）.