高效液相色谱法检测大枣中溴氰菊酯残留

刘世军，唐绒绒，唐志书，雷甜甜，王 锦，刘垚润

(1.陕西中医药大学/陕西省中药资源产业化协同创新中心，陕西 咸阳 712083;2.陕西省创新药物研究中心，陕西 咸阳 712083;3.陕西省风湿与肿瘤类中药制剂工程技术研究中心，陕西 咸阳 712083)

大枣药食两用，营养丰富，含有三萜、皂苷、生物碱、黄酮等多种活性成分[1]，具有很高的医疗和经济价值，其深加工技术正向复合饮料(将大枣汁和其它果品混合生产)、着色剂或食用色素(用于食品、工业和化妆品)、药品或保健食品(对其进行深加工，研发出具有防治心脑血管和糖尿病等方面的制剂)等三方面发展[2]。由于用量大，涉及人群广，所以大枣中的农药残留逐渐引起了人们的重视。

溴氰菊酯为一种中等毒性农药，被枣农所常用，该农药常通过皮肤、呼吸道、消化道进入体内，对人体有极大的危害性[3]，故检测大枣中溴氰菊酯的残留很有必要。

1 实验仪器与试剂

1.1 仪器

高效液相色谱仪(Waters e2695型)，低速台式离心机(TDL-80-2B型，上海安亭科学仪器厂)，电热鼓风干燥箱(101-1型，北京科伟永兴仪器有限公司)，N-丙基乙二胺固相萃取柱(陕西乐博生化科技有限公司)，超声波清洗机(KQ-300DE型，昆山市超声仪器有限公司)，电子分析天平(准确度为0.0001 g，FA2004B型，上海佑科仪器仪表有限公司)，予华牌循环真空泵(SHZ-DⅢ型，巩义市予华仪器有限责任)，烧杯，量筒。

1.2 试剂与材料

大枣(购自咸阳嘉惠市场)；氯化钠、甲醇(500 mL)为分析纯；乙腈、甲醇(4 L)为色谱纯；活性炭、娃哈哈瓶装水(500 mL)(陕西娃哈哈乳品有限公司)。

1.3 色谱条件[4]

色谱柱：BDS HYPERSIL C18(250 mm×4.6 m，5 μm)；检测器：紫外检测器；检测波长：254 nm；流动性：甲醇 ∶水=90 ∶10；流速：1.0 mL·min-1；柱温：30℃。

2 实验部分

2.1 对照品溶液的配制

对照品溴氰菊酯的浓度为0.025 g·mL-1，使用时用甲醇(分析纯)稀释成所需浓度的标准使用液(精密量取溴氰菊酯0.1 mL，置25 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得100 μg·mL-1的对照品溶液)。

2.2 样品的测定[5]

2.2.1 样品的前处理 取样品25 g，精密称定，加入50 mL乙腈，超声2 min，抽滤，滤液中加入5～7 g氯化钠，溶解，抽滤，设计滤液45 mL，剧烈摇匀，静置30 min，取上层乙腈相20 mL，加入0.3 g活性炭粉末，以5 000 r·min-1离心1 min，取上清液10 mL于40℃烘干，加2 mL甲醇溶解残渣，溶解后过活化好的N-丙基乙二胺固相萃取柱，用甲醇 ∶水(3 ∶2)洗脱，准确定容2.5 mL，混匀后过0.22 μm微孔滤膜，待测。

2.2.2 制备样品的定性和定量 定性采用外标法(保留时间)，定量采用标准曲线。在以上所述色谱条件下，吸取待测样品10 μL进样，重复3次，取面积平均值，根据所绘标准曲线，查到实际浓度，通过计算得到所制样品中溴氰菊酯的残留量。

3 结果与讨论

3.1 分析方法的线性关系[6]

用电子分析天平称取溴氰菊酯标准品，用甲醇溶解并定容，配制成溴氰菊酯标准溶液母液，随后稀释成2、4、6、8、10、12 μg·mL-1等不同的标准溶液，在上述选定的色谱条件下测定，得到色谱图，以出峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线，结果表明溴氰菊酯的浓度与峰面积在特定区间下呈线性关系。标准曲线方程为y=147164x-11210，R2=0.9995。标准曲线如图1。

图1溴氰菊酯标准溶液工作曲线

3.2 实验的重复性、精密度及回收率[7]

3.2.1 重复性实验 取处理好的对照品溶液5份，在已经选好的色谱条件下依次进样，依法测定农药含量，计算RSD为3.04%，表示本方法重复性良好。

3.2.2 精密度实验 主要有:

(1)日内精密度。取同一种处理好的样品，在同一天进样5次，计算溴氰菊酯的含量，RSD为2.33%，表示本方法日内精密度良好。

(2)日间精密度。量取处理好的样品，分别在6 d中每天进样一次，计算溴氰菊酯的含量，RSD为3.42%，表示本方法日间精密度良好。

3.2.3 回收率实验 采取标样添加法，加定量的标准溶液到已经知道含量的样品中，在该色谱条件下测定，对回收率进行计算，结果表明本方法的回收率良好，如表1所示。

表1 大枣中溴氰菊酯农药加标回收率的测定结果(n=3)

4 结论

目前检测食品中农药残留大多采用气相色谱法，但是由于溴氰菊酯容易在气相色谱柱中发生吸附[7]，使实验结果出现一些偏差，不能真正反映食品中的农药残留，会给消费者带来一定的误导，故我们课题组通过实验，建立了溴氰菊酯农药高效液相检测方法，可以达到有效检测溴氰菊酯农药农残的目的,课题组为此类农药残留增加了一种可行的检测方法，重现性和灵敏度好，有利于控制不合格大枣流入市场，对人们的安全增加了一道保障。