中药制剂对小鼠肠道推进运动试验研究
2019-02-22丁小明李巨银卓国荣胡新岗
魏 宁,丁小明,李巨银,卓国荣,胡新岗
(1.江苏农牧科技职业学院,江苏 泰州 225300;2.兴化市安丰畜牧兽医站,江苏 兴化 225700)
畜禽腹泻性疾病是严重阻碍畜禽业发展因素之一,不仅对畜禽生长发育产生影响,而且对症状严重者还极易导致死亡。当前,对畜禽腹泻疾病的防治多以抗生素治疗为主。若长期反复使用抗生素,致使病原微生物对抗菌药物产生了耐药性,降低了疗效,且药物残留在动物体内,其产品达不到无公害要求,影响了畜产品的出口和人们的健康。研究表明中草药有效活性成分不仅具有抗菌、增强机体免疫作用,还能改善机体组织机能,且具有毒副作用小、无残留,不易产生耐药性等优势。试验选用中药大乌泡制成中药制剂对小鼠小肠推进运动进行试验研究。
1 材料
1.1 试验药物
大乌泡,购自泰州宏泰卫生物资公司;甲硫酸新斯的明注射液(规格:1 mg:2 mL);蒙脱石散(规格:3 g);印度墨汁(规格:100 mL)。
1.2 试验动物
昆明小鼠,清洁级,24只,体重20~22 g,雌雄各半,购自扬州大学。
2 方法
2.1 中药制剂制备
将大乌泡加水浸泡12 h,煮沸,过滤,滤渣再加水煮沸,过滤,2次滤液合并后浓缩至稠状,加乙醇调至乙醇浓度60%~70%,充分搅匀冷藏沉淀,过滤,滤液回收乙醇,回收乙醇后的药液再加乙醇至乙醇75%~80%,搅匀,冷藏沉淀,过滤,滤液回收乙醇,再浓缩至无醇味,药液加水冷藏沉淀,过滤,滤液浓缩得浓度为每mL含1 g生药量的药液,调pH 7.0,制成中药制剂口服液,经流通蒸气灭菌备用。
2.2 试验药物稀释
中药制剂原液分别为中药制剂1(1g·mL-1),用生理盐水稀释为中药制剂2(0.5 g·mL-1);甲硫酸新斯的明注射液用生理盐水稀释为0.01 mg·mL-1;蒙脱石散用生理盐水稀释为0.075 g·mL-1,小鼠灌服前需摇匀;印度墨汁用生理盐水进行等量稀释。
2.3 试验分组
取小鼠,雌雄各半,分成4组,平均每组6只。对照组:小鼠口服生理盐水0.2 mL·10 g-1·只-1,2次·d-1;蒙脱石散组:将蒙脱石散稀释成0.075 g·mL-1浓度,小鼠灌服0.2 mL·10 g-1·只-1,2次·d-1;中药制剂1组:用中药口服液1 g·mL-1浓度,口服0.2 mL·10 g-1·只-1,2次·d-1;中药制剂2组:用中药口服液0.5 g·mL-1浓度,口服0.2 mL·10 g-1·只-1,2次·d-1。
2.4 试验方法
4组小鼠,连续口服4 d。各组小鼠在给药后第3天开始禁食24 h,实验第4天,末次给药(水)20 min后皮下注射新斯的明(0.01 mg·mL-1)建立腹泻模型,再过20 min后,4个组小鼠同时灌服印度墨汁0.5 mL·只-1,30 min后,脱颈椎处死小鼠,打开腹腔,分离肠系膜,剪取上至幽门,下至回盲部之间的肠管,置于平底托盘上(不加牵引),轻轻将小肠拉成直线,测量肠道长度作为“小肠总长度”,从幽门至墨汁前沿的距离作为“墨汁在肠道推进距离”,计算墨汁推进百分率,用SPSS软件进行组间t检验。
墨汁推进率(%)=墨汁在小肠推进距离/小肠总长度×100%。
3 结果与分析
在与对照组比较中,蒙脱石散、中药制剂1、中药制剂2都具有降低小鼠肠道运动性作用。其中,中药制剂1对降低小鼠肠道运动性作用效果显著(P<0.05),但其他两组与对照组比较效果不显著,结果见附表。
附表 肠道推进运动结果
4 讨论
腹泻是各种畜禽常见的多发病之一,发病率、死亡率高,不受季节性影响,可造成畜禽生长性能下降,即使病愈后仍能造成畜禽生长缓慢等。引起畜禽发生腹泻的因素较为复杂,如饲养管理、饲料、畜禽自身、病原微生物等。在临床防治畜禽腹泻病过程中,应根据致病原因有针对性的选择治疗方案。
针对病原微生物引起畜禽腹泻病,临床上往往用抗生素为主,磺胺类、喹诺酮类、四环素类都具有较好的治疗效果。但长期使用或不合理用药往往引发耐药菌株的产生,还可导致畜禽体内出现药残,严重危害人们健康。近年来,利用中草药防治畜禽腹泻病已成为热点。中草药具有毒副作用小、无残留、不易产生耐药性等优势,还具有提高动物机体免疫力,改善畜禽生产性能等特点。研究表明,中药方剂能较好抑制鸡白痢沙门氏菌和大肠杆菌,改善动物小肠蠕动,增强抗炎效果;孙高成用党参、黄芪、白术等草药制成中药制剂能显著治疗鸡场严重腹泻;用石翁止泻散对猪、鸡防治腹泻效果明显。
泄泻病症在中兽医认为,病变主在脾胃与大小肠,导致本病发生的重要因素是湿盛与脾胃功能失调;在机体感受湿热、疫毒之邪,湿热交蒸、胶着难解后致使脾胃运化发生失常,出现清浊不分,水湿下注而生泄泻现象。本试验选择大乌泡作为中药制剂,具有清热解毒,祛风活络,止血止痛作用,临床上可治感冒、高热、咳嗽带血、风湿关节痛、月经提前、腹泻、肠胃炎、痢疾、脱肛、外伤出血等。研究表明,大乌泡叶的醇提物对多种细菌有显著的抑菌作用。
通过在小鼠皮下注射甲硫酸新斯的明药物,可逆性抑制了小鼠体内胆碱酯酶活性,提高小鼠体内受体部位的乙酰胆碱浓度,从而使肠道平滑肌兴奋性提高,促进了肠道蠕动。因此,甲硫酸新斯的明注射液能够建立动物腹泻模型。本试验结果表明,大乌泡中药制剂能抑制小鼠肠道运动性作用,其中在1 g·mL-1浓度下,能显著降低小鼠肠道运动性。但使大乌泡降低肠道运动的作用机制,目前尚未有相关报道,可作为今后研究的方向。