2011年至2017年百色市兽医实验室检测能力评估报告

潘懿 黄筱玉耀贤 言天久 蒙振亩 韦文飞 .百色市畜禽品种改良技术推广站

2.田林县八渡瑶族乡水产畜牧兽医站

3.百色市畜牧技术推广站

4.百色市动物疫病预防控制中心

2011年至2017年，百色市县13个兽医实验室参与广西全区检测能力比对29次，盲样比对正确率92.0%，平行盲样准确率97.7%。实验室年度检测能力（除2012年外）水平波动不显著（P＞0.05），半定量检测项目市本级与县级实验室检测能力水平差异性不显著(P＞0.05)。表明了百色市13个兽医实验室管理到位，检测操作规范，随机误差率低，检测系统稳定，实验室间检测能力均衡，能满足动物疫病防控工作需要。

兽医实验室检测能力比对是评估兽医实验室管理水平和能力技能技术能力的重要手段，也是加强兽医实验室质量控制的有效方法，促进实验室检测能力提高具有重要现实意义。2010年农业部印发了《兽医实验室考核工作实施方案》〔1〕，明确要求每年组织开展一次实验室比对实验。百色市13个兽医实验室每年有组织有计划的参与了全区兽医实验室检测能力比对。

一、比对项目、试剂、材料、方法与标准

1.比对项目。2011年至2017年参加实验室比对项目县级以血清学检测比对为主，共12项；市级比对项目涵盖血清学检测和病原检测，共16项（项目清单略）。

2.比对试剂。由广西壮族自治区动物疫病预防控制中心提供统一采购、分发，冷藏保存运输，1%鸡血红球由各个实验室自备。

3.比对样品。比对盲样的选择、制备、分装和编号全部由广西壮族自治区动物疫病预防控制中心统一提供，运输过程按照样品冷藏保存运输。

4.比对检测方法与标准。各年度比对项目的不尽同，比对项目检测方法与标准优先推荐国家标准或国家参考实验室的方法，无相关检测方法的项目按照试剂盒说明书操作。

二、标准评判

1.半量检测项目 H5-AI Ab、H7-AI Ab、ND Ab、HCV Ab（正向间接血凝试验）的检测评判标准：比对值与参考值完全一致判为准确；比对值与参考值的误差不超过上下1个滴度，判为正确。布病抗体检测评判标准：布鲁氏菌病试管凝集试验（SAT）检测结果与参考值完全一致或者低于参考值一个“+”的，评判为正确。

2.其他检测项目按照国家标准、国家参考实验标准或说明书标准判定。

三、结果

1.百色市实验室比对总体结果。根据比对结果评判标准，百色市13个参加比对实验室7年盲样比对结果总体正确率见表1。将2011年至2017年兽医实验室年度间正确率进行差异性比较，2012年与2011年、2013至2017年｜u｜＞2.58，p＜0.01，差异性显著，其它年度间差异性不显著（P＞0.05）。百色市5个半定量检测项目检测结果进行统计，盲样比对总数正确率：81.2.0%，2011年至2017年盲样比对正确率分别为：93.9%、54.3%、69.4%、91.0%、94.4%、100%、100%。

2.市本级年度盲样比对总体结果。百色市市本级兽医实验室自2011年至2017年参加比对实验的盲样比对总体正确率为92.3%，2011至2017年确率分别为：100%、63.2%、100%、90.4%、100%、100%、100%。2012年盲样检测结果正确率最低为63.2%。2012年百色市市级实验室比对检测结果偏差集中在ND Ab盲样检测项目，2012年广西自治区提供给百色市ND Ab盲样5份，设置两组平行盲样，检测结果5份盲样比对值整体与参考值低2个滴度，见图1。据桂疫控（报）〔2012〕83号附件3统计，2012年广西区14个地市级实验室参与比对盲样总体准确率占7.1%，比对值高于参考值盲样数占2.86%，比对值低于参考值盲样数占90%，广西区14个地市2012年ND Ab检测检测结果离散，见图2。百色市市本级实验室编号10，平行盲样离散度为0，见图2。

3.百色市县级实验室比对项目检测总体结果。百色市12个县级兽医实验室自2011年至2017年有计划的参加全区开展的实验室检测能力比对，比对结果总体正确率为91.7%，2011年至2017年比对检测结果正确率分别 为：93.3%、70.0%、97.1%、89.7%、92.9%、100%、100%。

4.百色市市本级与县级实验室半定量检测项目年度比对结果差异性。2011年至2017年半定量检测项目市本级与县级比对总体正确率进行差异性比对，结果差异不显著（p＞0.05）。

四、分析与讨论

1.百色市13个兽医实验室均具备了较强的检测能力水平。百色市市本级和那坡县兽医实验室是广西地市级和县级首个通过农业部认证的兽医实验室。自2011年至2017年，市、县实验室有计划参与能力比对29次，参与了16个项目比对，其中血清学检测项目12项，病原学检测项目4项。共检测比对盲样364份，335份盲样检测结果正确，正确率92.0%，设置的平行盲样85份，准确率97.7%。全市2011年至2017年比对结果进行年度差异性对比，除了2012年外，各年度之间的差异性不显著（P＞0.05），2016年、2017年比对试验检测结果正确率稳步提高至100%。说明百色市13个兽医实验室2010年以来严格按照《检验检测机构资质认定评审准则》、实验室体系文件和各种动物疫病检测规程规定执行，实验室检测能力水平整体稳定，检测能力水平逐年提高，具备了较强的检测能力水平，能满足当前动物疫病防控的需要。

2. 2012年ND Ab检测比对实验比对效果不理想。2012年百色市市本级检测ND Ab盲样5份，其中平行盲样2份，比对检测设置的阴阳性对照成立，平行盲样检测结果完全一致（离散度为0），具体结果见图1、图2。说明比对提供的新城疫抗原不存在质量问题，检测操作过程不存在随机误差。由此推断，引起百色市ND Ab比对直比参考值低2个滴度可能有以下原因：一是实验室自行配置的1%鸡血红细胞浓度偏高。从14个地市的检测结果来看，比对值低于参考值的盲样份数占90%，说明百色市检测ND Ab过程中配制的1%鸡血红细胞浓度偏高造成误差的可能性很小；二是检测盲样存在质量问题。盲样因保存不当或者其它原因导致盲样抗体水平下降，直接影响了盲样检测结果准确性，致使ND Ab比对结果出现偏差，从14个地市检测结果统计来看，这种可能性不能排除；三是参考值偏高。所提供的参考值数据偏高，引起90%盲样检测结果比对值比参考值低。

表1 百色市2011年至2017年实验室比对项目检测结果统计总表

图2 广西区14个地市2012年ND Ab检测结果离散图

3.少数兽医实验室检测系统稳定性有待加强。2011年以来，百色市13个兽医实验室共参与了29次比对，2013年有2个实验室出现了平行盲样检测结果出现偏差。2012年全区比对ND Ab项目中设置了平行盲样，结果全区14个地市中有5地市个实验室检测结果出现偏差，具体结果见图2。说明百色市、县和全区14个地市少数实验室检测过依然程存在随机误差，实验室应加强系统培训、强化实操、反复比对，提高检测系统稳定性。

4.半定量检测的难度高于定性检测。百色市2011年至2017年实验室比对项目总体检测结果和百色市5个半定量检测项目检测结果进行比较，半定量检测项目正确率低于总体检测项目正确率。表明了半定量检测的技术难度要高于定性检测。2014年百色市市本级参与的布病比对试验，2份盲样检测结果出现偏差。布病结果判定为肉眼感观判定的半定量检测项目，盲样比对检测过程中，盲样沉降和比浊管比对结果位于两个对比对浓度之间，根据盲样虎红平板试验强阳性结合疫病防控角度，检测者判定偏向高浓度判定。然从比对角度来思考，认为盲样经解冻、分装、运输等环节会致抗体浓度下降，结果判定应偏向低浓度。思维导向不同导致比对结果判定出现偏差。定性检测项目方面，自2011年来市本级比对结果全部准确，说明了半定量检测的难度高于定性检测。事实证明半定量检测项目是实验室检测的薄弱环节，各级实验室应加强半定量检测项目培训，强化理论水平，提升操作技能，实验室间比对和沟通交流，提高项目检测的稳定性、准确性。

5.百色市半定量检测能力水平各兽医实验室间比较均衡（差异性不显著）。根据各年度检测结果正确率比对，百色市市本级与县级实验室检测能力差异性不显著（P＞0.05），表明百色市县两级兽医实验室对半定量检测项目非常重视，检测技术培训到位，各实验室检测能力相对比较均衡。