湖北五峰土家族自治县妇女人乳头状瘤病毒感染现况

钟亚娟 程艳香 程 静

(武汉大学人民医院东院妇科，湖北省武汉市 430200，电子邮箱：417143420@qq.com)

宫颈癌在全球妇女最常见的恶性肿瘤中位列第二位[1]。据估计，全世界每年有接近493 000例患者被新诊断为宫颈癌，其中有274 000例死于宫颈癌[2]，我国宫颈癌的患病率和病死率约占全世界的1/3。湖北五峰土家族自治县地处鄂西南山区，是宫颈癌的高发地区，但高发原因至今尚不明确。而人乳头状瘤病毒(human papilloma virus，HPV)感染是宫颈癌发生的一个重要因素[3]。因此，了解该地区的HPV感染情况对宫颈癌的防治显得尤为重要。本研究通过对湖北省五峰土家族自治县女性HPV感染的流行病学现况进行调查，以期为宫颈癌的防治提供参考。

1 资料与方法

1.1 研究对象 于2013年7～9月，选取参加五峰土家族自治县宫颈癌筛查的1 000名已婚妇女为研究对象。纳入标准：有性生活史、目前未怀孕、无宫颈手术史及盆腔放射治疗史、无子宫切除术史、1年内未做过宫颈检查者。排除标准：处于经期者、检查前3 d有阴道用药者、24 h内有性生活者、无宫颈妇女、半年内做过液基薄层细胞检测+HPV检查者。年龄17～77(41.9±9.1)岁。所有研究对象均自愿参加本研究并签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 问卷调查：由当地工作人员举行相关知识讲座并提前一周通知妇女参加HPV筛查。采用自制调查表进行一对一面对面调查；所有回收问卷均由2个调查员核对，严格把关，并对错填和漏填进行进一步核对直至无差错。内容包括个人基本信息(年龄、文化程度、人均月收入、吸烟情况)，病史情况(避孕方法、孕产史、是否绝经等)。调查员均为经过严格培训的、硕士以上学历的、以宫颈疾病为研究方向的妇科医生。共发放问卷1 000份，回收1 000份，回收有效率100%。

1.2.2 样本采集与测定

1.2.2.1 妇科检查：由妇科医生对所有受检者进行妇科检查并采集样本。用扩阴器暴露宫颈后，将采集宫颈脱落细胞的宫颈刷置于宫颈鳞柱交界处，顺时针旋转5周，然后放入保存液中，2周内送检，并详细记录妇检情况。

1.2.2.2 HPV-DNA检测：采用Hybri-Max法检测HPV6、HPV11、HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59、HPV68等15种HPV基因型；其中，HPV6、HPV11为低危型，其余为高危型。实验步骤：(1)采用德国QIAGEN公司的QIA Mini试剂盒(生产批号：S20040031)分离宫颈脱落细胞的DNA；(2)采用美国MBI公司生产的PE9600 PCR扩增仪进行扩增；(3)扩增后采用医用核酸分子快速杂交仪(型号：M275534)及配套试剂盒(北京仕基辰源公司，生产批号：S20060014)导流杂交；以HPV-DNA≥1.0 pg/L代表HPV阳性，并根据芯片上HPV基因型分布的相应位点判断为何种基因型。任意一种HPV亚型阳性即视为HPV感染，两种或两种以上HPV亚型阳性即视为HPV复合感染；高危型HPV阳性或高危型和低危型HPV同时阳性者均视为高危型HPV感染，仅低危型HPV阳性者视为低危型HPV感染。

1.3 统计学分析 采用SPSS 17.0软件进行统计分析。计数资料以例数和百分比表示，组间比较采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 HPV感染情况 1 000名研究对象中，感染HPV 166例，HPV感染率为16.6%，其中高危型HPV、低危型HPV及HPV复合感染的感染率分别为15.9%(159/1 000)、0.7%(7/1 000)和3.10%(31/1 000)。

2.2 HPV感染的亚型分布 单一HPV亚型感染中，感染率前三位的亚型是HPV16、HPV52、HPV58。31例HPV复合感染者中，二重感染24例(以HPV16及HPV52为主)，三重感染5例，四重感染2例；其中仅3例合并感染1种低危型HPV，其他28例均感染了至少一种高危型HPV。见表1及表2。

表1 单一HPV亚型感染的分布情况

表2 166例HPV感染阳性妇女中复合感染情况

2.3 影响HPV感染的相关因素 不同年龄、文化程度、避孕方法、怀孕次数、吸烟情况及绝经情况妇女的HPV感染率比较，差异均无统计学意义(均P>0.05)。不同人均月收入、分娩次数、人工流产次数妇女的HPV感染率比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。见表3。

表3 不同特征妇女HPV感染情况比较[n(%)]

续表3

注：a包括结扎、已绝经妇女；b指阴道分娩者(n=953)，其中HPV感染126例。

3 讨 论

湖北五峰土家族自治县位于湖北省西南山区，交通不发达，经济条件落后。本课题组在传统宫颈癌筛查的基础上开展HPV检测工作，该筛查方案具有高度的敏感度和特异度[4]，可为该地区提供可靠的HPV感染数据，并可明确高危人群。既往研究显示，山西省妇女HPV感染率为14.8%[5]，西藏自治区为9.19%[6]，既往关于妇女高危型HPV感染的研究报道显示，北京地区妇女高危型HPV感染率为9.89%[7]，深圳市华侨城为14.0%[8]，英国南威尔士地区为9.3%[9]，瑞典妇女为6.8%[10]，高危型HPV感染率为15.9%；而本研究中，湖北省五峰土家族自治县妇女HPV感染率为16.6%，均高于上述地区。各研究报告的HPV感染率结果差异较大，可能与病毒检测方法的差异及研究设计差异有关[11]。

本研究结果显示，HPV16在五峰土家族自治区妇女中最为常见，其次为HPV52及HPV58，而HPV18较少见，与亚洲地区妇女HPV感染亚型相符[12]。魏颖颖等[13]对湖南地区患有宫颈重度鳞状上内瘤病变和宫颈癌的69例妇女进行HPV检测发现，HPV亚型中HPV16、HPV52及HPV58最常见，与本研究结果相似。

本研究中，65～75岁年龄段妇女HPV感染率最高(30.77%)，且HPV感染率有随年龄增长而升高的趋势，这与山西省宫颈癌筛查结果相似[5]。然而，有文献报道，年轻妇女HPV感染率明显高于年老者，HPV感染的高峰年龄在18～30岁[11]，与本研究结果不同，这可能与筛选对象所在区域、生活习惯、筛查方式、年龄分段不同有关。

尽管口服避孕药可以增加宫颈癌的患病风险[14]，但其是否影响HPV感染还存在很大争议。本研究结果显示，未避孕的妇女HPV感染率最高(21.09%)，口服避孕药的妇女HPV感染率最低(9.36%)，但不同避孕方式妇女的HPV感染率差异无统计学意义(P>0.05)。这可能与所选对象的经济状况、使用避孕药时间长短、生活习惯等有关，有待进一步研究。有研究显示吸烟会增加HPV的感染风险[6，15-16]，但本研究未发现吸烟与HPV感染有关，这可能与本研究对象吸烟人数少、筛查时间短等有关。

HPV感染是由多种因素引起的。本次研究结果显示，人均月收入、分娩及人工流产次数可能为影响HPV感染的因素(P<0.05)。人均月收入低者，可能存在劳动强度大、工作环境及卫生差，故容易感染HPV。分娩及人工流产次数越多，妇女感染HPV的可能性越大，可能是由于分娩及人工流产对宫颈造成创伤，创伤次数越多，感染HPV的可能性越大。

本研究首次对该地区妇女进行HPV分型检测，有利于对该地区疾病类型进行判断，确定治疗方案及随访。目前国际上的疫苗主要针对HPV16及HPV18型，根据本研究结果，我们认为有必要进一步研究针对HPV52及HPV58型的疫苗。本研究得出的影响HPV感染的因素与其他研究不尽相同，可能与本次筛查仅对当地妇女进行短期的HPV检测，未将性伴侣数量纳入调查方案中有关，还可能与不同研究的设计方案，研究对象的种族、生活习惯、地域等有关，因此本研究结论还有待进一步的追踪调查证实。