牛以水样或糊状腹泻为主的疾病的诊断

朱福全

（黑龙江省勃利县杏树畜牧兽医站，黑龙江 勃利 154500）

以水样或糊状腹泻为主的牛传染病包括牛产肠毒素性大肠杆菌病、副结核病、牛空肠弯曲菌腹泻、牛轮状病感染、牛冠状病毒感染；寄生虫病包括隐孢子虫病、前后盘吸虫病、莫尼茨绦虫病和犊牛弓首蛔虫病；普通病主要包括消化不、胃肠炎、淀粉样变性和结肠炎等疾病。

1 传染病和寄生虫病的病原学诊断

1.1 牛产肠毒素性大肠杆菌病

采少量新鲜尸体的小肠前段肠黏膜或内容物，常接种于伊红美蓝琼脂培养基上，挑选有金属光泽、紫色带黑心菌落进行生化反应鉴定。用已知多价和单价O抗血清及单价黏附素抗血清鉴定分离菌的血清型，之后再做肠毒素测定，以确定致病性。

1.2 副结核病

小川氏培养基上需氧培养，生长缓慢，常需6～8周或更长时间才能生长小菌落。常用抗酸染色镜检方法，取粪便中的黏液、血丝，加3倍量的0.5%NaOH液，混匀，55℃水浴乳化30 min，以4层纱布滤过，取滤液以1 000 r·min-1离心5 min，去沉渣后，再以3 000～4 000 r· min-1离心30 min，去上清，取沉淀物涂片，用抗酸染色镜检，本菌为红色，常呈丛状。这两种方法中有一种为阳性结果，可确诊本病。

1.3 牛空肠弯曲菌腹泻

取腹泻粪便直接接种于改良Camp-BAP琼脂培养基，在一个大气压的85%N2、10%CO2和5%O2的混合气体环境条件下，37℃或25℃进行分离培养，经生化试验鉴定分离菌。

1.4 牛轮状病毒感染

一般在腹泻开始24 h内采取小肠内容物或粪便，经高速和超速离心浓缩病毒后，进行检查，常用的方法有电镜法、酶联免疫吸附试验等。还可将小肠或肠内容物涂片，用已知牛轮状病毒荧光抗体做直接荧光试验以及多重RTPCR鉴定病毒。必要时将病料接种于MA-104细胞进行病毒分离培养。

1.5 牛冠状病毒感染

用电子显微镜从腹泻便中直接观察病毒粒子，或用牛冠状病毒荧光抗体从粪便中检出本病毒。必要时将病料接种于BEK-1或HRT-8细胞进行病毒分离培养，用已知牛冠状病毒抗血清做病毒中和试验鉴定分离的病毒。

1.6 牛隐孢子虫病

可采用饱和蔗糖溶液漂浮法收集粪便中的卵囊，再用1 000倍的油镜检查，可见到圆形或卵圆形的卵囊，内含有4个裸露的子孢子和1个残体。还可采用改良的酸性染色法，制成虫体抹片，染色，镜检，隐孢子虫卵囊被染成红色，此法检出率较高。还可采用间接免疫荧光法，隐孢子虫卵囊以荧光抗体染色后显示苹果绿荧光，极易辨认，敏感性高达100%，特异性97%，此法目前已成为国外诊断隐孢子虫病最常用的方法之一。死后诊断时取病变部位或刮取消化道黏膜抹片染色，或采用病理切片，姬姆萨染色，或制成电镜样本，鉴定虫体。对可疑病例可采用实验动物感染加以确诊。

1.7 牛前后盘吸虫病

对成虫引起的疾病可采用反复水洗沉淀法进行粪便检查，检出大量虫卵即可确诊。对童虫引起的疾病，在生前诊断要结合临床症状、分析流行病学资料做出判断，必要时可进行尸体剖检，根据其病变和检出的大量童虫而确诊。

1.8 牛莫尼茨绦虫病

在患牛粪便中检到黄白色孕卵节片，形似煮熟的米粒，将孕节侮涂片检查时，可见到灰白色、特征性的虫卵即可确诊。未发现节片时，用饱和盐水浮集法检查粪便，可发现虫卵。如果患牛症状明显，但未检出虫体或虫卵，可能是虫体尚未成熟，此时可采用诊断性驱虫方法。死后剖检，在小肠内可见到大量虫体和相应的病变。

1.9 犊牛弓首蛔虫病

采用饱和盐水漂浮法进行虫卵检查，检出大量的虫卵即可确诊。死后剖检在小肠找到犊牛弓首蛔虫或在血管、肺脏找到移行期幼虫也可确诊。

2 普通病的实验室检查

2.1 消化不良

血液学变化不明显，但可见低血钙，代谢酸中毒。

2.2 胃肠炎

血、尿检验结果明显有变。发病初期，白细胞总数增多，中性粒细胞比例增大，核型左移，出现多量杆状和幼稚型（增生性左移）；发病后期，白细胞总数明显减少。由于机体长时间脱水和循环系统衰竭，而出现相对性红细胞增多症指征，包括血液浓稠，血沉减慢，红细胞压积容量增高（＞40%）。尿蛋白质含量增多，肾上皮细胞以至各种管型也有改变。

2.3 酮病

尿液、乳汁和血中酮体含量增高，尿呈酸性。血糖降低，碱贮下降，多数血脂升高。临床病理检查，血酮水平＞20 mg·dL-1，血糖含量＜50 mg·dL-1，并且呈现明显症状的，称为临床酮病。血酮水平为10～20 mg·dL-1，但无明显临床症状的，称为亚临床酮病。原发性酮病时，血糖为20～40 mg·dL-1（正常是50 mg·dL-1），血酮10～100 mg·dL-1（正常为10 mg·dL-1）。继发性酮病时，血糖常＞40 mg·dL-1，血酮很少超过50 mg·dL-1。尿酮差异很大，正常可达70 mg· dL-1，酮病时，约达80～1 300 mg· dL-1。乳酮较稳定，酮病时平均值达40 mg·dL-1正常为3 mg·dL-1）。目前，国内多采用酮粉法，国外多采用试纸法定性检测牛乳中酮体阳性，作为监测泌乳早期牛群亚临床酮病的依据。