甲状腺癌组织中Wnt-5a表达及对其预后的预测价值分析

张富宏 赵东利

甲状腺癌发病率约为全身癌症中的1%～5%，女性发病率约为男性的3倍[1]。Wnt配体属于1个包含至少19种分泌型蛋白的家族，该蛋白家族在细胞的分化、增殖以及组织形成中都发挥重要作用，Wnt-5a是Wnt信号非经典通路中最主要因子之一，该物质能够通过与细胞膜上受体的结核来活化蓬乱蛋白，进而发挥细胞极性建立、骨架重排等增殖活动。本文作者通过研究发现，Wnt-5a在甲状腺癌组织中呈现高表达态，且Wnt-5a表达阳性率与甲状腺癌患者的肿瘤大小、TNM分期及是否存在淋巴结浸润存在相关性，同时Wnt-5a表达阳性率能够对患者预后进行一定判断，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 资料

选取2013年1月至2016年1月于我院及西安交通大学第一附属医院进行治疗的87例甲状腺癌患者为实验组，取其癌组织及癌旁组织，另选取30例同期于我院进行体格检查的健康个体为对照组，实验组患者中男性31例，女性56例，年龄20～78岁，平均年龄(51.03±2.63)岁，87例患者中甲状腺乳头状癌34例，滤泡癌21例，髓样癌20例，未分化癌12例，对照组中男性12例，女性18例，年龄21～79岁，平均年龄(50.96±2.68)岁，两组患者一般资料如性别、年龄等对比差异不具有统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

纳入标准：①实验组患者经超声检测及病理学检测确诊为甲状腺髓样癌；②病历资料齐全；③经医院伦理委员会批准实施该调研；④患者及其家属对本次调研过程、方法、原理清楚并签署知情同意书。

排除标准：①合并精神障碍者；②既往甲状腺手术史者；③合并化疗治疗者；④合并其他恶性肿瘤患者；⑤妊娠及哺乳期女性；⑥合并慢性疾病如心肌梗死、脑卒中、心力衰竭患者。

1.2 方法

取实验组患者癌组织及癌旁组织标本，取对照组患者甲状腺癌组织标本，分别置于-80 ℃条件下保存，待标本采集完毕后统一进行处理，首先使用10%甲醛溶液固定，95%乙醇浸泡12 h，无水乙醇浸泡2 h，二甲苯透明处理1 h，而后石蜡包埋后切片，切片厚度约为4 μm，对切片进行苏木精-伊红染色，免疫组化后于高倍镜下分析结果，按照其显色强度及阳性细胞范围进行半定量评分；同时对所有患者进行为期2年的随访，记录其生存时间并与其Wnt-5a表达阳性率相关性进行分析。

1.3 观察指标及评测标准

分别对3组样本进行组织切片、染色及观察，按照如下标准对其组织阳性率进行评判：①显色深浅，不显色或显色极浅为0分，浅黄色为1分，黄色为2分，棕黄色为3分，棕褐色为4分；②阳性细胞数，无阳性细胞为0分，阳性细胞占视野1%～25%为1分，25%～50%为2分，50%～75%为3分，75%以上为4分，上述两项之和得分大于3分者为阳性，阳性率=(阳性数/总例数)×100%[2]；然后就实验组患者不同临床特征与其组织Wnt-5a表达阳性率相关性进行分析对比。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 不同组织中Wnt-5a表达阳性率比较

经评估对比，发现Wnt-5a表达阳性率癌组织>癌旁组织>对照组，组间对比差异具有统计学意义(P<0.05)，具体数据见表1。

注：与正常组织相比，*为P<0.05，与癌旁组织相比，#为P<0.05。

2.2 Wnt-5a表达阳性与甲状腺癌患者临床病理相关性分析

经分析发现，Wnt-5a表达阳性与甲状腺癌患者性别、年龄无相关性(P>0.05)，与甲状腺癌患者肿瘤大小、TNM分期及是否存在淋巴结浸润存在相关性(P<0.05)，见表2。

2.3 Wnt-5a表达阳性与甲状腺癌患者预后相关性分析

经术后随访，发现Wnt-5a表达阳性患者2年随访死亡率为27.63%(21/76)，Wnt-5a表达阴性患者2年随访死亡率为9.09%(1/11)，两组对比差异具有统计学意义(P<0.05)。

3 讨论

甲状腺癌是现阶段头颈部常见恶性肿瘤之一，该症约占头颈部恶性肿瘤的5%左右，在中青年及老年人群中均呈高发态势，但女性发病率高于男性，老年人发病率高于中青年，该病的主要临床分类包括乳头状癌、滤泡状癌、未分化癌及髓样癌几种，其中乳头状癌最为常见，约占总发病人数的70%。甲状腺癌的主要临床症状包括甲状腺肿块、淋巴结肿大，晚期肿瘤组织可压迫交感神经节引发Horner综合征和肩部疼痛，若癌细胞出现转移可侵犯肺、骨等组织，引发全身症状，威胁患者生命。对甲状腺癌预后的判断能够为其临床治疗方案的确定打下基础，也能够最大程度的节约医疗资源，传统对甲状腺癌预后的判断多依赖于病理切片检查及医生的临床经验，准确性较低，随着近些年分子生物学的发展，各类信号传导通路在癌症转移、发展中的作用逐渐被发掘出来。

Wnt蛋白是1组富含半胱氨酸的糖蛋白，Wnt途径是一类对胚胎发育起到重要调控作用的信号传导途径，通过不同信号分子间的作用，Wnt蛋白能够激活细胞生长、迁移、分化、发育等方面的复杂信号级联反应，Wnt-5a属于属于Wnt蛋白中的1种，可调控正常的血管内皮细胞、成纤维细胞的增殖与迁移。临床研究指出，Wnt-5a蛋白在正常组织中呈弱阳性或阴性表达，而在腺瘤组织或高分化腺癌中呈现中度甚至强阳性表达[3]。Wnt-5a蛋白的异常激活可导致肿瘤的发生，学者石鹏[4]通过将80例前列腺癌组织与80例良性前列腺增生组织进行对比发现，Wnt-5a mRNA在前列腺癌组织中的表达相对含量为(2.08±0.22)，在良性前列腺增生中的表达相对含量为(0.28±0.02)，二者对比差异具有统计学意义(P<0.05)，同时该作者的分析还指出，Wnt-5a的表达与前列腺癌患者的血管浸润、淋巴转移等相关；学者刘彦[5]也通过将47例甲状腺癌乳头状癌与47例癌旁组织相对比发现，乳头状癌组织Wnt-5a表达阳性率为68.09%，而癌旁组织Wnt-5a表达阳性率仅为6.38%，同时该学者的分析还发现Wnt-5a表达阳性率与甲状腺癌患者的TNM分期、淋巴结转移有关。

本文作者通过设立实验组与对照组的方式，就甲状腺癌组织中Wnt-5a的表达对其预后的预测价值进行了分析探究，结果显示，一方面甲状腺癌组织中Wnt-5a表达阳性率远高于癌旁组织及正常甲状腺组织(P<0.05)，另一方面Wnt-5a表达阳性率与甲状腺癌患者的年龄、性别无相关性(P>0.05)，但与其肿瘤大小、TNM分期及是否存在淋巴结浸润存在相关性(P<0.05)，最后研究还指出，Wnt-5a表达阳性率与其预后具有一定相关性，Wnt-5a表达阳性率越高，患者术后生存率越低。本文作者分析认为，Wnt家族蛋白在动物胚胎生长发育中具有较重要的生物学意义，在细胞的增殖、迁移、代谢中发挥重要作用，Wnt-5a属于Wnt信号非经典通路中最主要因子之一，该蛋白能够通过与细胞膜上受体的结合，来活化Dsh下游区，进而激活端粒酶来促进细胞极性的建立及细胞骨架的重排[6]。多项研究均指出，Wnt-5a的过量表达会直接造成细胞的恶性增殖，诱发肿瘤的出现，如在非小细胞癌组织中，Wnt-5a基因在肿瘤内的表达明显上调，尤其是鳞状细胞癌表达显著高于腺癌[7]，本文的研究结果也指出在甲状腺癌组织中Wnt-5a表达也明显上调，高于正常组织，分析其原因为Wnt-5a能够活化细胞增殖通路，同时激活钙调节蛋白激酶，使细胞核发生一系列反应，进而出现增殖、迁移、极化等癌变现象，同时其表达强度也能够反映出机体预后状态的好坏。

总而言之，Wnt-5a在甲状腺癌组织中呈现高表达态，且Wnt-5a表达阳性率与甲状腺癌患者的肿瘤大小、TNM分期及是否存在淋巴结浸润存在相关性，同时Wnt-5a表达阳性率能够对患者预后进行一定判断。