亲权鉴定中嵌合体STR基因分型1例

（昆明法医院司法鉴定中心，云南 昆明 650034）

1 案 例

1.1 简要案情

因落户需要，某男委托本中心对其与孩子是否有亲缘关系进行鉴定，用FTA卡采集孩子、某男（疑父，以下简称“被检父”）、母亲（生母）的末梢血各1份，同时采集孩子带有毛囊的毛发、口腔拭子各1份。

1.2 DNA分型检验

上述5份检材用Chelex-100法提取DNA[1]，使用PowerPlex®21试剂盒（美国Promega公司）对Amelo⁃genin基因座和20个常染色体基因座（D3S1358、D1S1656、D6S1043、D13S317、PentaE、D16S539、D18S51、D2S1338、CSF1PO、PentaD、TH01、vWA、D21S11、D7S820、D5S818、TPOX、D8S1179、D12S391、D19S433、FGA）进行复合扩增。

孩子的口腔拭子、血痕与被检父血痕使用YfilerTMPlus PCR扩增试剂盒（美国Thermo Fisher Scientific公司）对25个Y-STR基因座（DYS576、DYS389Ⅰ、DYS635、DYS389Ⅱ、DYS627、DYS460、DYS458、DYS19、Y GATA H4、DYS448、DYS391、DYS456、DYS390、DYS438、DYS392、DYS518、DYS570、DYS437、DYS385、DYS449、DYS393、DYS439、DYS481、DYF387S1、DYS533）进行复合扩增。

所有扩增产物在3130基因分析仪（美国AB公司）上进行毛细管电泳，用GeneMapperID-Xv1.5软件处理电泳数据。

1.3 检验结果

采用PowerPlex®21试剂盒检测得到的STR分型结果见表1、图1。孩子的口腔拭子、血痕与被检父血痕采用YfilerTMPlus PCR扩增试剂盒检测得到的YSTR分型结果见表2。

表1 母亲、被检父的血痕以及孩子的毛发、口腔拭子、血痕的Amelogenin和常染色体基因座分型结果

续表1

图1 孩子的血痕、口腔拭子和毛发的常染色体STR分型结果

表2 孩子的口腔拭子、血痕与被检父血痕的Y-STR分型结果

鉴定意见：根据本中心对20个常染色体STR基因座和25个Y-STR基因座遗传多态性的分析，支持被检父、母亲是孩子的生物学父母亲。

2 讨 论

本案排除近期输血史、异基因骨髓移植、双胞胎兄弟姐妹以及样品受到其他污染的情况，在20个常染色体STR检测数据中，发现孩子带有毛囊的毛发的常染色体STR基因分型均正常，未出现嵌合基因现象，孩子的口腔拭子及血痕的基因分型均出现嵌合基因。孩子的血痕、口腔拭子在D6S1043、D13S317、Penta E、Penta D、D12S391、D19S4336个基因座上出现三等位基因，在D18S51、D21S11、TPOX、FGA4个基因座上出现四等位基因，在D3S1358、D6S1043、D13S317、PentaE、D16S539、D2S1338、CSF1PO、Penta D、TH01、vWA、D7S820、D5S818、D12S391、D19S433、Amelogenin15个基因座上的等位基因峰高不均衡（图1），可能是等位基因的叠加所致。分析上述嵌合体的基因分型，孩子的等位基因均可从其父母的等位基因中找到来源。Y-STR基因分型结果显示，被检父血痕与孩子的口腔拭子、血痕的单倍体基因分型一致，不排除被检父与孩子来自同一父系家族成员。

人类嵌合体较为少见[2]，嵌合体分为获得性嵌合体和先天性基因嵌合体。获得性嵌合体是由于骨髓移植、胎肝移植、异体外周血造血干细胞移植、宫内输血等造成；先天性基因嵌合体由遗传获得，是在胚胎时期就形成的，又分为双倍体、三倍体及四配子体嵌合体[3]。嵌合体在生物学上可以分为两种：同源嵌合体和异源嵌合体。嵌合体成分来源于同一受精卵的嵌合体称为同源嵌合体（在常染色体STR基因座中，所有基因座都显示1个父源等位基因和1个母源等位基因），自发或者诱发导致的基因突变以及染色体畸变均可导致同源嵌合体的产生[4]。由2个不同的受精卵融合而形成的个体为异源嵌合体，异源嵌合体可分为人造异源嵌合体、孪生子异源嵌合体和四配子异源嵌合体[5]。人造异源嵌合体大部分为医源性。孪生子异源嵌合体是由双生子之间血管交叉吻合，造血细胞通过吻合的血管交换而产生。四配子异源嵌合体形成的机制[6]：（1）两个胚胎的融合；（2）卵细胞和第一极体双受精作用；（3）次级卵母细胞和第一极体双受精作用；（4）卵细胞和第二极体双受精作用。其中，两个胚胎的融合是由2个卵细胞和2个精子独立受精后形成的两个受精卵（或胚泡）相互融合，拥有两套遗传基因，在常染色体STR检测中显示含有2个母源等位基因和2个父源等位基因[4，7-9]。本案中，孩子的血痕、口腔拭子在D18S51、D21S11、TPOX、FGA4个基因座上出现四等位基因的现象，其等位基因均可从被检父、母亲的基因中找到来源，推测本案男孩出现四等位基因可能是四配子异源嵌合体并由两个胚胎融合而成。从上述检验结果可见，本案中男孩在血痕和口腔拭子的STR基因分型都表现出嵌合现象，但毛发中未检出嵌合现象，可推测孩子为组织部分性嵌合体[10]。

在亲子鉴定过程中，很少出现多个基因座同时出现2个以上等位基因的现象，消除外部环境对检验结果的影响，在检测中若出现嵌合基因，可以采集多种类型（毛发、口腔拭子等）的样本进行综合分析，对嵌合的基因应重复检验、使用不同的试剂盒以及YSTR、X-STR试剂盒等进行进一步分析，并对出现的嵌合现象进行分析解释。在条件允许的情况下应对出现嵌合的基因进行测序分析或对嵌合基因样本的个体进行核型分析，以保证结果的准确性、科学性。