无创DNA检测在唐氏综合征产前筛查中的作用

瞿 敏

（宜兴市第二人民医院妇产科，江苏 无锡 214200）

唐氏综合征是因染色体异常导致的疾病，以先天智力障碍、先天畸形为主要特征[1]。染色体异常与基因具有直接关系，在患儿出生后在进行治疗，效果欠理想。因此，加强孕妇唐氏综合征产前筛查，是避免唐氏综合征患儿发生的主要手段。以往临床多应用血清学筛查，该方法诊断准确率低，诊断效果不佳。无创DNA检测是新型的诊断方法之一，本次研究对唐氏综合征产前筛查孕妇1000例分析，探究无创DNA检测的应用价值，并作如下报道。

1 资料与方法

1.1 基础资料

择取2017年1月～2018年1月在我院进行唐氏综合征产前筛查孕妇80例为研究对象，孕妇年龄范围22～34岁，平均年龄（27.9±1.6）岁，孕周15～19+6周，平均孕周（17.1±1.8）周，所有孕妇均为单胎，无妊高症、糖尿病等疾病。

1.2 方法

予以孕妇均血清学筛查、无创DNA检测，具体的方法如下：（1）血清学筛查：抽取孕妇空腹静脉血2～3 ml，离心机进行血清分离，将血液标本置于-20℃环境下保存，1周内完成检测。采取酶联免疫法对血清标记物甲胎蛋白（AFP）、人类绒毛膜性腺激素（F-βhCG）检测，操作严格按照说明书进行。（2）无创DNA检测：抽取孕妇静脉血3～5 ml，分离血浆，将其置于-80℃环境下，提取血浆中胎儿游离的DNA，扩增、测序处理在12-plex高通量Hiseq平台上进行，检测后，对检测数据进行生物学分析，并对孕妇外周血游离胎儿DNA片段检测，处理测序结果，结合孕妇的年龄、体重、超声检查结果、预产期、采血时孕周等综合指标分析，对胎儿的唐氏综合征风险进行计算。（3）核型分析：对于检测为高危的孕妇，在其孕17周～25周时，在与孕妇、孕妇家属沟通，待其同意后，对其进行二维超声引导，实施羊膜腔穿刺，抽取孕妇羊水，剂量约20 ml，对羊水细胞进行细胞培养，待时机成熟后，获取细胞，并予以低渗、固定等处理，进行染色体制备，G显带，观察其染色体核型分析。对于检测中低危孕妇，需要对孕妇的妊娠结局予以追踪随访。

1.3 观察指标

对孕妇经过唐筛检查后确诊为中高风险的孕妇采取无创DNA检测，并以羊膜腔穿刺技术检查结果为金标准，观察应用无创DNA检测的准确率，探究无创DNA检测用于唐氏综合征产前筛查中的诊断价值。血清学筛查唐氏综合征风险≥1:280为高风险，在1:280～1:1000之间为中风险，唐筛阳性标准如下：唐氏综合征风险＞280；唐氏综合征的诊断金标准如下：经羊膜腔穿刺术检查胎儿羊水细胞染色体核形分析证实[2]。

1.4 统计学方法

SPSS 23.0统计学软件用于指标数据处理分析，用（%）表示计数资料，x2检验；以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 唐筛检出率

80例开展唐氏综合征产前筛查孕妇经过常规糖筛检查，结果显示为中风险+高风险孕妇共7例，占比例为8.75%。

2.2 无创DNA检测准确率

7例中高风险孕妇经过无创DNA检测，结果显示，有1例出现高风险，占比例为14.29%，1例高风险孕妇经过羊水穿刺分析，染色体核型检查结果确诊为唐氏综合征，无创DNA检测准确率为100%。

3 讨论

唐氏综合征是一种遗传性疾病，胎儿出生后表现为面容特殊、智力低下等症状，影响患儿的生活。目前，唐氏综合征尚无特效治疗方法，一旦该疾病发生，对患儿健康造成极大影响，加重了患儿家庭的经济负担。对孕妇产前进行筛查，可以减少唐氏综合征发生风险，对保证胎儿的健康安全具有重要的意义。

血清学筛查是结合孕妇年龄、孕周而开展的检查方法，主要通过检测血清中胎儿蛋白、绒毛促性腺激素进行诊断，从而对唐氏综合征进行诊断，该检测方法虽然可以达到一定的诊断效果，但假阳性率高，一旦发生误诊、漏诊，则会增加唐氏综合征的发生率。无创DNA检测是通过对孕妇外周血游离胎儿DNA片段检测结果分析进行诊断的方法。与血清学筛查，无创DNA检测具有操作简单，诊断准确率高的特点，且该方面无年龄、孕周限制，能有效弥补血清学筛查的不足。虽然无创DNA检测诊断准确率高，但是存在一定的局限性，详细分析如下：第一，对于少数血浆中胎儿游离DNA浓度过低的孕妇，失败性高，需要采取进行抽血检测，延长了检测的周期；第二，无创DNA检测方法不适用于染色体中存在微重复、嵌合体、微缺失、等结构异常孕妇，此外，对于夫妻双方中一方存在染色体异常的患者均不可以试试无创DNA检测，在临床实践中还发现，对于近期4周内接受过移植手术、免疫或者肝细胞治疗的孕妇也不是适用于无创DNA检测，其原因是上述情况容易导致孕妇体内残留其他的DNA片段，进而影响无创DNA检测的准确性；第三，与血清学唐筛比较，应用无创DNA检测的费用高，对于存在经济问题的家属，不容易接受，因此，在对孕妇开展无创DNA检测前，需要详细告知孕妇、孕妇家属相关的问题，做好充分的沟通，使其知晓无创DNA检测的风险性、局限性、费用等问题，在孕妇同意后开展；第四，因目前医学检测技术水平限制，且不同孕妇个体差异性的不同，容易出现假阳性。李盼盼[3]等学者研究中指出，无创DNA检测的准确率、特异率均比血清学筛查结果，证实了该检测方法应用的价值。分析研究结果，经过常规糖筛检查，择选的80例开展唐氏综合征产前筛查孕妇中，存在中风险+高风险孕妇共7例（8.75%），中高风险孕妇经过无创DNA检测，出现高风险孕妇1例（14.29%），1例高风险孕妇经过羊水穿刺分析，确诊为唐氏综合征，无创DNA检测准确率为100%，再次对无创DNA检测的有效性予以证实。笔者指出，因血清唐氏筛查诊断的准确率仅在70%左右，漏诊率高，因此，对于血清唐氏筛查中高风险孕妇可以进一步开展无创DNA检测，并对其检测为高风险的孕妇予以羊水穿刺核型分析，从而达到确诊的目的。此外，对于高龄孕妇，因开展羊水穿刺风险性高，普通血清唐氏筛查诊断效果不理想，则无此DNA检测可以作为最佳的检测方法之一。

综上所述，唐氏综合征产前筛查应用无创DNA检测，准确率高，值得在临床中广泛推广与应用。