应用MCV和MCH作为梧州市地中海贫血筛查指标的临床价值*

郭 豪 闫丽琼 余永雄 黎永鉴 游 夏

广西梧州市妇幼保健院 543002

地中海贫血是由于人体珠蛋白基因的突变使珠蛋白链合成减少及缺失，导致血红蛋白的成分发生一系列改变的一种血液系统病。它严重威胁人类的健康，是一种可以致死、致残的常染色体隐性遗传性疾病，它是我国南方地区最常见的单基因遗传病，主要分为α地贫和β地贫。通过产前诊断提前发现地贫胎儿及避免重型地贫患儿的出生是最有效的预防措施[1]，而产前诊断的前提是确诊夫妇双方为同型地贫基因携带者。基因诊断是地中海贫血确诊的金标准，通过地贫筛查再决定是否行基因诊断，必要时终止妊娠，是预防重型地贫患儿出生的可行方法。常应用平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)作为地贫筛查的主要指标。本研究通过对受检者的地贫基因和地贫筛查检测，评价MCV和MCH联合检测在地中海贫血筛查中的应用价值，为地贫筛查提供简便可行的策略。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2013年1月—2016年12月梧州市区和辖区下的三县一市送检到我院产前诊断分中心实验室，且在梧州地区接受了婚前、孕前及产前检查的13 961例男女，行地贫筛查和地贫基因检测。其中，10 904例地贫基因检测确诊为地贫的为地贫组，3 057例地贫基因检测排除地贫的为非地贫组。

1.2 方法

1.2.1 血细胞分析：采用SYSMEX XN-1000血细胞计数仪检测血常规24项，以MCV<82fl和MCH<27pg作为地贫初筛阳性的标准。

1.2.2 地贫基因分析：(1)DNA提取试剂盒(免疫磁珠法)由厦门致善生物科技有限公司提供；(2)缺失型α地贫基因诊断(gap-PCR法)：采用深圳益生堂生物技术有限公司的缺失型α地中海贫血基因检测试剂盒(包含-SEA、-α3.7、-α4.2、-HAHI 4种)；(3)非缺失型α地贫基因诊断(PCR结合膜反向点杂交法)：采用深圳亚能生物有限公司的非缺失型α地中海贫血基因检测试剂盒(包含αWS、αQS、αCS 3种点突变)；(4)β地贫基因诊断(PCR结合膜反向点杂交法)：采用深圳亚能生物有限公司的β地中海贫血基因检测试剂盒(包含17种点突变)。

1.3 观察指标 观察通过MCV、MCH单独和联合检测筛查人群里地贫基因检测的组间灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和诊断符合率。

1.4 统计学方法 应用SPSS13.0软件对MCV、MCH单独和联合诊断地贫的灵敏度和特异度进行χ2检验。P<0.05时差异有统计学意义。

2 结果

2.1 MCV在两组患者中的筛查结果 单独以MCV<82fl作为地贫筛查指标，地贫组10 904例中地贫筛查阳性10 453例，漏诊451例，灵敏度为95.9%，漏诊率为4.1%，非地贫组3 057例中，MCV>82fl的共2 214例，特异度为72.4%(2 214/3 057)。

2.2 MCH在两组患者中的筛查结果 单独以MCH<27pg作为地贫筛查指标，地贫组10 904例中地贫筛查阳性10 428例，漏诊476例，灵敏度95.6%，漏诊率4.4%。非地贫组3 057例中，MCH>27pg的共2 159例，特异度为70.6%(2 159/3 057)。

2.3 MCV+MCH在两组患者中的筛查结果 单独以MCV<82fl+MCH<27pg作为地贫筛查指标，地贫组10 904例中地贫筛查阳性10 398例，漏诊506例，灵敏度95.4%，漏诊率4.6%。非地贫组3 057例中，MCV>82fl+MCH>27pg的共2 516例，特异度为82.3%(2 516/3 057)。

2.4 MCV与MCH单独和联合筛查对比 MCV与MCH在地贫筛查中的灵敏度比较，差异无统计学意义(χ2=0.065，P>0.05)；特异度比较，差异无统计学意义(χ2=2.42，P>0.05)，MCV、 MCH单独和MCV+MCH在地贫筛查中的灵敏度分别比较，差异也均无统计学意义(χ2=3.306，P>0.05；χ2=0.956，P>0.05)。在非地贫组筛查中的特异度比较差异均有统计学意义(χ2=85.18，P<0.01；χ2=115.82，P<0.01)；见表1。

表1 MCV、MCH和分别筛查以及联合筛查地贫中的价值(%)

3 讨论

地中海贫血是两广地区高发的遗传性疾病,临床上对地中海贫血尚无特效的治疗手段，轻、中型地中海贫血患者也会对生活产生不同程度的影响；重型的地贫患者出生后需要不断输血治疗，给家庭和社会造成了巨大负担。故地中海贫血预防和筛查具有重大意义。地中海贫血筛查的方法很多，但明确诊断和检测地贫基因需要聚合酶链反应(PCR)技术结合其他分子生物学技术的要求，地贫基因检测要求条件高、费用大，不适用于疾病的筛查及基层的广泛推广[2]。

本研究显示通过对婚前医学检查、孕前检查、产前检查人群进行血常规检测，以MCV<82fl和MCH<27pg单独作为地贫表型筛查阳性界定值时，其灵敏度均在95%以上，但同时特异性又均较低(72.4%和70.6%)。表明这两项指标用于地贫筛查时漏检率较低，而假阳性率较高。MCV或MCH用于地贫筛查时出现假阳性的原因是缺铁性贫血的普遍存在。由于小细胞、低色素性贫血就会导致MCV、MCH水平降低，结果显示对地贫筛查阳性，但地中海贫血基因诊断为阴性。受检者可以进一步通过血清铁蛋白的检测可以判断是否是缺铁性贫血，从而降低MCV、MCH检测筛查的假阳性率[3]。而MCV<82fl和MCH<27pg两项指标联合作为地贫筛查指标时，可在灵敏度(95.4%)和特异度(82.3%)和诊断符合率(92.5%)综合分析显示，在灵敏度均可达到95%以上的同时特异度和诊断符号率均较单独MCV、MCH有较大提高，统计学显示有差异性。因此，MCV+MCH的筛查策略优于单纯以MCV或MCH作为地贫筛查指标的策略。但仍有一定的漏检率，原因为有一部分地贫基因携带者，特别是静止型地贫不能通过血液学表型分析去发现，对于此类人群的确诊还有赖于DNA分析[4]。

目前临床上没有一种针对所有地贫类型均具有较高的检出率的地贫筛查方法[5]。所以，对于不同人群进行地贫筛查时，可以根据实际情况选择增加一些项目作为筛查方法，Hb电泳，血清铁蛋白的检测等。但是MCV和MCH作为基础的筛查指标，还是具有灵敏度高、快速、价格低廉等优点[6]，适用于基础及农村等大人群的筛查。应用MCV+MCH进行初筛，根据初筛结果再决定是否需进一步做血清铁蛋白的检测、Hb电泳和地贫基因诊断。如果受检者更注重筛查结果的准确快速，则可以选择3种指标联合筛查的策略：MCV+MCH，Hb电泳，血清铁蛋白。但针对孕前和产前检查的夫妇，要适当放宽筛查指标，尤其对于高危地区的夫妇，在一方已确诊为仅地贫携带者时，另一方直接进行仅地贫基因诊断，以免筛查指标导致的漏检。