化学

非正常食用油鉴别新方法（一）：三种辣椒碱残留量的液相色谱-质谱分析

王龙星，金静，王淑秋，等

摘要：目的：近年来，把非正常食用油（俗称地沟油）掺入合格食用油中以获取利益的行为屡禁不止，成为当前我国食品安全领域亟须解决的问题。目前地沟油精制工艺也在不断发展：通过白土吸附、脱色、水洗、真空高温除臭等步骤地沟油中存在的大部分常规杂质被去除，另外地沟油往往被掺入正常的食用油中进行出售，进一步降低指标物质的含量，增加了检测难度。这种情况导致刚提出的多种鉴别指标又失效了，新的地沟油检测方法仍是国内当前的研究热点。首次提出通过检测食用油中的特异痕量外源成分：辣椒碱来完成地沟油的检测鉴别，并发展了相应的液相色谱-串联质谱检测方法。方法：0.5 g油样加500 μL二氯甲烷，利用20 g/L氢氧化钠两次液液萃取将辣椒碱由油相萃取到水相，调节其pH在2～3后，上C18固相萃取小柱进行富集净化：纯水除去无机酸碱，乙腈洗脱辣椒碱。净化后的样品以二苯胺为进样内标，采用液相色谱-串联质谱（HPLCMS/MS）定量检测3种不同的辣椒碱目标物：天然辣椒素、二氢辣椒素、壬酸香草酰胺。以这3种辣椒碱的含量和＞0.2 ng/g作为地沟油的判别指标。结果：辣椒碱是引起辣味的主要化学成分，具有脂溶性强、稳定性好、沸点高等特点。目前的地沟油精制工艺很难完全去除具有这样特点的物质。正常食用油基本不含辣椒碱，而接触过辣椒的餐厨废弃油脂难以避免地含有这类成分。因此辣椒碱类成分可作为鉴别餐厨废弃油脂的特征指标。目前餐饮业辣味调料基于两种原料：天然辣椒及由人工合成的壬酸香草酰胺，而天然辣椒中以天然辣椒素及二氢辣椒素的含量最大。基于上述情况将这3种辣椒碱确定为检测目标。辣椒碱在中性条件下的脂溶性强，而在强碱性条件下其结构中的酚羟基解离，水溶性强，借助这个特点可实现辣椒碱与主体油脂的分离。首先通过碱性水溶液进行液液萃取；调节水相pH值后再通过固相萃取技术，实现辣椒碱的富集，并除去无机酸、无机碱及残留的油脂。经过这样的分离富集步骤，不仅提高了灵敏度，减小了基体干扰，同时也避免了残留油脂对色谱柱及质谱仪器的污染和损伤。本方法的回收率在85%～93%，精密度＜10%，检出限为 0.05 ng/g。实际测定结果表明本方法阳性样品识别率达75%，阴性样品识别率100%，假阳性率为零。68个盲样的总体识别正确率达到82%以上。结论：通过对食用油中痕量辣椒碱的检测，提出了一种新的地沟油识别方法。该方法识别率高，假阳性率为零，对 68个实际油样的分析取得了良好的效果。目前，本方法已经成为国家卫生部推荐的4种地沟油仪器检测方法之一。

来源出版物：色谱, 2012, 30(11)： 1094-1099

入选年份：2016

超声辅助分散液液微萃取-高效液相色谱测定水样中的4种邻苯二甲酸酯类增塑剂

马燕玲，陈令新，丁养军，等

摘要：目的：邻苯二甲酸酯类化合物（PAEs），又称钛酸酯，是目前最广泛使用的增塑剂。此类化合物在环境中难以降解，已成为全球最普遍的环境污染物之一。同时，它们也是一类内分泌破坏性物质，表现出生物累积性，可以改变人体中的雌激素水平，从而导致严重的健康问题。鉴于 PAEs对人类生命安全存在极大的潜在危害性，因而对于 PAEs的安全卫生性检测显得十分必要和迫切。分散液液微萃取（DLLME）因其具有所需萃取溶剂量小、萃取速度快、萃取效率和富集倍数高、操作简便、消耗样品量低和环境友好等优点，已发展成为一种极具潜力的分离富集技术。以4种典型的PAEs类物质（邻苯二甲酸二甲酯（DMP）、邻苯二甲酸二乙酯（DEP）、邻苯二甲酸二丁酯（DBP）、邻苯二甲酸二正辛酯（DnOP））为研究对象，采用DLLME并加以超声辅助（UA）对样品进行富集浓缩前处理，加速不互溶的两相之间的质量传递，使得萃取效率可在最小的溶剂使用量和最短的时间内得到快速的提高；随后，采用高效液相色谱（HPLC）进行分离测定；从而，建立一种简便、快捷、实用的测定水体中 PAEs类增塑剂的分析方法。方法：采用超声辅助分散液液微萃取技术结合高效液相色谱法（UA-DLLME-HPLC）对4种PAEs（DMP、DEP、DBP、DnOP）进行富集、检测，并进行实际水样分析。实验中采用富集因子来评价萃取效率，考察并优化影响萃取效率的主要因素，包括萃取剂类型和用量、分散剂类型和用量、超声时间、离子强度、萃取时间和pH值等。采用公式EF=Csed/C0计算富集因子（enrichment factor，EF），以此评价不同萃取条件下的萃取效率。其中，Csed为萃取沉积相中PAEs的质量浓度（g/L）；C0为水样中 PAEs的质量浓度（g/L）。经考察优化，选定CCl4为样品前处理的萃取剂、乙腈为分散剂；萃取剂CCl4的用量为40 μL、分散剂乙腈的用量为1.0 mL；超声时间为5 min；加入NaCl的浓度为30 g/L。另外，实验发现萃取效率随萃取时间的变化和pH值的改变并无明显改变。因此，仅需在体系中加入适量的分散剂、萃取剂和盐，超声5 min后，离心即可（5 min，4000 rpm）。优化的色谱分析条件为：色谱分离柱：C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；进样量：10 μL；检测波长：225 nm；流动相：甲醇-超纯水；梯度洗脱程序：0～3 min内85%甲醇，3～10 min内85%甲醇线性变化至100%甲醇，10～20 min内100%甲醇；流速：1.0 mL/min。结果：在优化的萃取和色谱条件下，4种PAEs在18.5 min内完成基线分离，得到4种PAEs的工作曲线的线性相关系数为0.9935～0.9998，线性关系良好。获得DMP、DEP、DBP和 DnOP的富集因子分别为 71、144、169和159，说明此法对此4种PAEs有较大程度的富集。检出限分别为3.78、1.77、3.07和3.30 μg/L，远低于《生活饮用水卫生标准》国家标准规定限值，因此有望发展该法实现实际水样中 PAEs的有效分析和监控。日内与日间保留时间和峰面积的相对标准偏差（RSDs）值较低，且均低于或者接近文献报道值，表明该法对 4种 PAEs的检测具有良好的精密度。利用该法对实验室自来水、某品牌矿泉水及湖水进行实际富集分析，3个加标浓度所获得的加标回收率在 82.99%～114.47%之间，RSDs在 1.93%～8.31%之间，结果满意。结论：建立的 UADLLME-HPLC方法具有操作简便、萃取速度快、萃取效率和富集倍数高、试剂和样品消耗量少、重现性好、环境友好等优点，能够测定实际水样中的PAEs，有一定的实用参考价值。

来源出版物：色谱, 2013, 31(2)： 155-161

入选年份：2016

高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱法快速筛查和确证纺织品中禁用的偶氮染料

云环，刘鑫，王静，等

摘要：目的：偶氮染料几乎分布于所有颜色，广泛用于纺织品、皮革制品等染色及印花工艺，用致癌芳香胺合成的偶氮染料在人体内易发生还原裂解释重新放出致癌芳香胺产生致癌作用，德国、欧盟、日本及我国均规定纺织品中禁止使用偶氮染料。静电场轨道阱（orbitrap）高分辨质谱具有质量分辨率高和精确分子量的功能，在全扫描模式下采集的数据可以根据检测需求反复调用，由此弥补传统低分辨质谱方法无法应对法规更新频繁的不足；其数据依赖性扫描（data-dependent scan）可以在筛查的同时，通过碎片离子进行定性确证。应用高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱仪（HPLC-LTQ/Orbitrap）建立了快速筛查确证纺织品中禁用偶氮染料的方法。方法：样品在柠檬酸缓冲液中由连二亚硫酸钠还原成芳香胺，经硅藻土提取柱净化后，用Acquity UPLC BEH C18柱（1.7 μm，2.1 mm×50 mm）分离，以甲醇和 0.1%（v/v）甲酸作为流动相进行梯度洗脱，电喷雾正离子（ESI＋）模式电离，高分辨质谱一级全扫描用于筛选分析，数据依赖扫描模式的二级CID谱图用于确证。结果：考察了不同还原时间、萃取试剂对前处理效果的影响，优化了色谱条件中所选用的流动相体系，比较了不同碰撞诱导解离（CID）电压对电离结果的影响，建立了纺织品中 21种致癌芳香胺分析的方法，并对方法进行了评价。最终确定还原时间为30 min，选用叔丁基甲醚作为萃取剂，流动相中加入甲酸，CID电压在35%时21种芳香胺分别得到各自特征的碎片，且分子离子峰和特征碎片离子峰的丰度比例相对稳定，可以达到对待测物质的定性及定量要求。配制混合标准系列溶液进行测定，在0.05～2.00 mg/L范围内线性关系良好（r≥0.99）。在空白样品中进行加标实验，确定该方法的检测低限可达到0.08 mg/kg。在棉、涤纶两种样品中添加 21种致癌芳香胺的标准溶液，添加水平分别为0.5、1.0和2.0 mg/kg，每个添加水平平行测定6次，回收率范围在 65.5%～111.5%之间，相对标准偏差（RSD）为 0.87%～2.49%。将建立的方法应用于 50份实际纺织品样品，检出2份样品含有对氯苯胺，1份含有联苯胺和3,3′-二氯联苯胺，1份含有2-萘胺，其余样品未检出。结论：建立的纺织品中禁用偶氮染料的快速、高通量的检测方法，在8 min内完成了对21种致癌芳香胺的筛查和确证，将高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱首次应用到纺织品检测领域，获得了满意的分离效果和检测灵敏度。方法的检测低限满足国内外相关禁用偶氮染料的检测要求，可作为一种快速筛查和确证检测技术广泛使用。

来源出版物：色谱, 2013, 31(9)： 845-849

入选年份：2016