急性胰腺炎患者促炎细胞因子与空腹胃肠激素关系分析

刘付俊业 邱嘉华

深圳市龙华区人民医院消化内科(518109)

背景：肠道动力障碍是急性胰腺炎(AP)病情进展的重要环节，兴奋性与抑制性胃肠激素失衡可能是重度AP(SAP)患者出现肠道动力障碍的关键原因之一。目的：探讨AP患者血清促炎细胞因子与空腹胃肠激素之间的关系及其临床意义。方法：2016年6月—2017年6月深圳市龙华区人民医院收治的90例AP患者纳入研究，其中轻度AP(MAP) 60例，SAP 30例，同期健康体检者65例作为对照组。以ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-8和空腹5-羟色胺(5-HT)、胃动素(MTL)、胆囊收缩素(CCK)水平，分析促炎细胞因子与胃肠激素之间以及两者与AP严重程度之间的相关性。结果：MAP组和SAP组血清TNF-α、IL-6、IL-8和5-HT水平高于对照组，MTL、CCK水平低于对照组，SAP组改变更为显著，与MAP组间差异有统计学意义(P<0.05)。各促炎细胞因子与各胃肠激素之间均存在显著相关性(P<0.05)，且两者均与AP严重程度相关(P<0.05)。结论：胃肠激素5-HT、MTL、CCK与AP严重程度和血清促炎细胞因子之间存在显著相关性，可能为AP的临床诊断和病情评估提供参考。

急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是消化内科常见的急腹症，系指由多种病因引起胰酶激活，继以胰腺局部炎症反应，可伴或不伴其他器官功能改变，常见病因包括胆石症、高三酰甘油血症、酗酒等，高钙血症、手术和损伤等亦可引起AP[1]。近年来，随着国人生活水平的提高，AP发病率逐年升高。

炎症介质如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-8等大量释放在AP的发生和进展中起重要作用[2]。胃肠激素的主要生理功能是调节消化腺分泌和消化道运动、调节其他激素的释放以及营养作用，其分泌紊乱与多种消化系统疾病的发生、发展有密切联系。临床上重度AP(SAP)患者常出现腹胀、肠麻痹、腹内压增高等肠道动力障碍表现，SAP早期肠道动力障碍与疾病进展和预后不良密切相关[3-4]。本研究旨在探讨AP患者血清促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8与空腹胃肠激素5-羟色胺(5-HT)、胃动素(MTL)、胆囊收缩素(CCK)之间的关系及其临床意义，以期为AP的诊断和治疗提供参考。

对象与方法

一、研究对象

连续纳入2016年6月—2017年6月深圳市龙华区人民医院收治的AP患者。纳入标准：①诊断符合《中国急性胰腺炎诊治指南(2013年，上海)》[1]；②年龄18～70岁；③本次入院前未经其他医院救治；④神志清楚，配合诊治。排除标准：①感染性疾病；②其他消化系统疾病；③心、肺功能不全。结果共90例AP患者纳入研究，根据AP诊治指南中的分级诊断标准，轻度AP(MAP) 60例，SAP 30例，无中度AP(MSAP)患者。选取同期行健康体检且无异常发现者65例作为对照组。研究方案经医院伦理委员会审核批准，受检者均签署知情同意书。

二、方法

AP患者于入院后次日清晨抽取空腹外周静脉血5 mL，对照组于健康检查时抽取空腹外周静脉血5 mL，操作严格按世界卫生组织采血指南进行。离心分离血清，4 ℃冰箱保存。采用ELISA法检测TNF-α、IL-6、IL-8和5-HT、MTL、CCK水平，相应试剂盒均为碧云天生物技术有限公司产品，操作严格按试剂盒说明书进行。

三、统计学分析

结 果

一、一般情况

90例入选AP患者中男性53例，女性37例，男女比例为1.4∶1；年龄20～70岁，平均(47.1±6.9)岁；病程(9.7±1.5) h。60例MAP患者中男性34例，女性26例，年龄20～66岁，平均(46.5±6.7)岁；30例SAP患者中男性19例，女性11例，年龄35～70岁，平均(50.2±5.3)岁。AP病因：酗酒16例，暴饮暴食42例，胆道疾病32例。65例健康对照者中男性35例，女性30例，年龄35～70岁，平均(49.5±6.3)岁。各组间性别构成、平均年龄、MAP组与SAP组间平均病程、病因差异均无统计学意义(P>0.05)。

二、血清促炎细胞因子水平

MAP组和SAP组血清TNF-α、IL-6、IL-8水平均高于对照组，三组间总体差异有统计学意义(P<0.05)，以SAP组升高更为显著，与MAP组间差异有统计学意义(P<0.05)(表1)。

表1 三组血清促炎细胞因子水平比较

三、空腹血清胃肠激素水平

MAP组和SAP组血清5-HT水平高于对照组，MTL、CCK水平低于对照组，三组间总体差异均有统计学意义(P<0.05)，以SAP组变化更为显著，与MAP组间差异有统计学意义(P<0.05)(表2)。

表2 三组空腹血清胃肠激素水平比较

四、促炎细胞因子、空腹胃肠激素与AP严重程度的相关性

Logistic回归分析显示，血清各促炎细胞因子和各胃肠激素水平均与AP严重程度相关(P<0.05)，其中TNF-α、IL-6、IL-8和5-HT为正相关，MTL、CCK为负相关(表3)。

表3 促炎细胞因子、空腹胃肠激素与AP严重程度的相关性(Logistic回归分析)

五、促炎细胞因子与空腹胃肠激素的相关性

Spearman相关系数分析显示，血清TNF-α、IL-6、IL-8与空腹5-HT、MTL、CCK之间均存在显著相关性(P<0.05)，5-HT与促炎细胞因子呈正相关，MTL、CCK则与促炎细胞因子呈负相关(表4)。

表4 促炎细胞因子和空腹胃肠激素的相关性(Spearman相关系数)

讨 论

近年AP发病率呈逐年上升趋势，病死率居高不下。AP发生和进展的病理基础主要包括炎症介质过度释放、微循环障碍、氧自由基损伤、胰酶分泌等。SAP时机体释放大量炎症介质如TNF-α、IL-6等，并进一步刺激其他炎症因子合成、释放，形成炎症级联反应，诱导全身性炎症反应综合征，最终导致多器官功能障碍。肠道动力障碍是AP病情进展的重要环节，动力障碍导致肠道内细菌大量繁殖，进而在肠黏膜屏障损伤的基础上发生细菌和内毒素移位，造成胰腺坏死组织感染、脓毒血症、多器官功能衰竭，使患者病死率增高[3-4]。胃肠激素是一类由胃肠道黏膜层细胞以及胰腺内分泌细胞和旁分泌细胞合成的生物活性物质，可通过多种途径对胃肠道分泌、运动、吸收功能进行调节。兴奋性与抑制性胃肠激素失衡可能是SAP患者出现肠道动力障碍的关键原因之一。关于AP时促炎细胞因子和空腹胃肠激素水平的关系，目前鲜有文献报道。本研究测定AP患者血清促炎细胞因子和空腹胃肠激素水平，并分析两者之间以及两者与病情严重程度之间的相关性。

TNF-α是一种主要由激活的单核巨噬细胞产生的促炎细胞因子，在炎症反应中起始动和核心作用，是AP发生中最早升高的细胞因子之一，能刺激或促进IL-1、IL-6、IL-8等其他促炎细胞因子释放，使炎症级联放大，与AP病情进展密切相关[2,5]。IL-6是一种急性时相反应期炎症因子，可作为AP严重程度和预后的早期预测指标，研究显示IL-6诱发的炎症反应在很大程度上是通过诱导以IL-8为代表的趋化因子产生而实现的[2]。本研究结果显示，AP患者血清TNF-α、IL-6、IL-8水平在发病早期即显著升高，并与病情严重程度密切相关，与既往研究发现相符[6-9]。

5-HT是一种常见的血管活性物质，人体内90%的5-HT由肠嗜铬细胞合成、分泌，主要通过激动相应受体，引起胃肠道平滑肌收缩，促进肠蠕动。有研究显示SAP肠道动力障碍可反射性地引起肠嗜铬细胞合成、分泌5-HT增加，致血清5-HT水平升高[10]。MTL主要由分布于十二指肠和空肠上段的M细胞分泌，可作用于平滑肌上的MTL受体，引起平滑肌收缩，促进胃肠运动及其内容物转运[3-4]。CCK由十二指肠和空肠黏膜的I细胞分泌，可刺激胆囊收缩和胰腺分泌，亦可促进胃肠道平滑肌收缩，对肠道运动具有促进作用[3-4]。既往对AP患者血清胃肠激素水平的研究显示，其血清5-HT水平较健康人显著升高[11]，MTL、CCK水平较健康人显著降低[12-15]，病情越重，胃肠激素水平变化越为明显[12-14]，并可随病情好转而逐渐恢复[11,13-15]。但亦有研究[14]显示SAP患者入院时血清5-HT水平较健康人显著降低，其后随时间延长逐渐升高。本研究中MAP和SAP患者空腹血清5-HT水平较健康人显著升高，MTL、CCK水平则较健康人显著降低，SAP患者改变更为明显，与既往研究结果基本相符，表明血清胃肠激素水平的变化与AP严重程度有关，可反映AP病情进展。AP发生后，患者采取禁食，胃肠运动减弱，且胰腺功能受损，MTL、CCK分泌减少可能与之有关。

本研究还采用Logistic回归分析了各促炎细胞因子和胃肠激素与AP严重程度的关系，结果显示TNF-α、IL-6、IL-8和5-HT水平与AP严重程度呈正相关，MTL、CCK水平与AP严重程度呈负相关，进一步证明了胃肠激素与AP严重程度之间的相关性。而Spearman相关系数分析显示，各促炎细胞因子与各胃肠激素之间均存在显著相关性，其中MTL与IL-8之间的rs绝对值高达0.921，提示空腹血清胃肠激素检测可能有助于AP的诊断和病情评估，而促炎细胞因子与胃肠激素联合检测可能进一步提高诊断和评估的准确性。

本研究同时分析TNF-α、IL-6、IL-8和5-HT、MTL、CCK与AP严重程度之间的相关性，以及TNF-α、IL-6、IL-8与5-HT、MTL、CCK之间的相关性，使研究结果更为科学、严谨。研究的不足之处主要在于样本量较小，以及未纳入更多全身性炎症反应指标进行分析。综上所述，血清TNF-α、IL-6、IL-8和空腹5-HT水平与AP严重程度呈正相关，MTL、CCK水平与AP严重程度呈负相关，各促炎细胞因子与各胃肠激素之间均存在显著相关性。综合分析上述指标，可能为AP的临床诊断、鉴别诊断和病情评估提供参考。