多西他赛联合表柔比星序贯化疗对三阴性乳腺癌相关指标的影响

张立芳，张晓林，孔令新

（河北省邢台市宁晋县妇幼保健院，河北 邢台 055550）

乳腺癌患者如癌组织中孕激素受体（PR）、雌激素受体（ER）、原癌基因人类表皮生长因子受体2（Her-2）基因均为阴性，则诊断为三阴性乳腺癌（TNBC），占所有类型乳腺癌的10%～20%[1]。TNBC侵袭性强，内脏、骨及脑转移早，对细胞毒药物敏感性高，但缓解期短，预后较其他类型乳腺癌差。目前临床对该病多采取紫杉醇类联合蒽环类药物化学治疗(简称化疗)，取得了一定疗效，但该联合化疗方案存在耐受性差、不良反应较严重等弊端。有学者发现，序贯化疗对降低化疗并发症发生率有一定帮助[2]。本研究中采用多西他赛（TXT）联合表柔比星（EPI）序贯治疗 TNBC，观察其对患者相关指标的影响。现报道如下。

1 资料与方法

1．1 一般资料

纳入标准：符合《中国进展期乳腺癌共识指南》[3]中TNBC诊断标准；预计生存期不短于6个月；年龄18～60岁；浸润性癌，有明确病灶，需行手术；无其他恶性肿瘤病史；本研究经医院医学伦理委员会批准，患者及其家属对本研究内容知情并签署知情同意书。

排除标准：合并其他部位原发肿瘤病灶；对本研究药物过敏；有放、化疗史；美国东部肿瘤协作组体能状况评分低于2分。

病例选择与分组：选取医院2015年1月至2017年9月收治的TNBC患者74例，均为女性，按随机数字表法分成序贯化疗组（研究组）和TXT＋EPI联合化疗组（对照组），各37例。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P ＞0．05），具有可比性。详见表 1。

表1 两组患者一般资料比较（n＝37）

1．2 方法

患者术后均给予规律化疗，期间常规监测肝、肾功能。研究组化疗方案：3周为1个周期，前4个周期第1～2天予注射用盐酸表柔比星（北京协和药厂，国药准字 H20143165，规格为每支含 10 mg）75 mg ／m2静脉滴注；后4个周期第1天给予多西他赛注射液（江苏奥赛康药业股份有限公司，国药准字H20123404，规格为每支 1 mL∶20 mg）100 mg／m2静脉滴注；共治疗 8个周期。对照组化疗方案：3周为1个周期，每个周期第1～2天予注射用盐酸表柔比星75 mg／m2静脉滴注，第3天予多西他赛注射液75 mg／m2静脉滴注；共6个周期。

1．3 观察指标

血清标志物：于化疗前（T1）、化疗后（T2）采集患者清晨空腹静脉血5 mL，离心分离血清，采用C12型多肿瘤标志物蛋白质芯片检测系统（上海数康生物科技有限公司）检测癌胚抗原（CEA）、糖类抗原 199（CA199）。

细胞因子：取上述血清，采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测白细胞介素 8（IL-8）、白细胞介素 6（IL-6）、人生长分化因子 3（GDF3）水平，试剂盒均购自上海依科赛生物制品有限公司。

肿瘤耐药相关指标：于T1和T2时经手术、穿刺取得乳腺癌组织，用 D-Hanker液冲洗后过200目筛，常规离心5 min；配置DMEM／F12培养基，进行乳腺癌干细胞（BCSCs）微球体分离培养；将培养所得悬液低速离心，取上清液，加入苯甲基磺酰氟和RIPA裂解液，0℃下静置10 min；转移上清液，蛋白电泳电转至膜，加入5%脱脂牛奶，室温下封闭2 h，加入一抗于4℃下过夜；TBST洗膜3次，加入HBP标记的鼠抗兔抗体，37℃孵育1．5 h，TBST洗膜3次；ECL试剂盒（上海酶联试剂盒公司）显影，以 β-actin为内参计算乳腺癌耐药蛋白（ABCG2）、P- 糖蛋白（P-gp）表达水平。

不良反应：观察治疗过程中胃肠道反应，红细胞、血小板、白细胞、中性粒细胞减少等不良反应发生情况。

1．4 统计学处理

采用SPSS 20．0统计学软件分析。计数资料以百分比（%）表示，行 χ2检验；计量资料以s表示，行t检验。P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

结果见表2至表5。

表2 两组患者血清CEA和CA199水平比较（s，n＝37）

表2 两组患者血清CEA和CA199水平比较（s，n＝37）

注：与本组 T1相比，P ＜0．05。表 3、表 5 同。

组别CEA（ng ／mL） CA199（U ／mL）T1T2T1T2研究组对照组t值P值7．98 ± 1．54 8．12 ± 1．62 0．381 0．704 3．18 ± 0．54 3．26 ± 0．57 0．620 0．537 35．51 ± 6．47 35．48 ± 6．41 0．020 0．984 11．71 ± 2．16 12．08 ± 2．21 0．728 0．469

表3 两组患者癌细胞ABCG和 P-gp水平比较（s，n＝37）

表3 两组患者癌细胞ABCG和 P-gp水平比较（s，n＝37）

组别ABCG2 P-gp T1T2T1T2研究组对照组t值P值0．56 ± 0．11 0．55 ± 0．09 0．428 0．670 0．72 ± 0．14 0．89 ± 0．16 4．864 0．000 0．21 ± 0．03 0．20 ± 0．02 1．687 0．096 0．35 ± 0．06 0．47 ± 0．08 7．299 0．000

表4 两组患者不良反应发生情况比较[例（%），n＝37]

表 5 两组患者血清 IL-8，IL-6，GDF3 水平比较（X ± s，pg／mL，n＝37）

3 讨论

相较于其他类型乳腺癌，TNBC初诊时分期偏晚，侵袭性较强。目前多采用蒽环-紫杉类药物联合治疗TNBC，客观缓解率可达70%～90%[4]。EPI是常用蒽环类药物，为拓扑异构酶Ⅱ抑制剂，可嵌入DNA双链碱基间形成稳定复合物，并可对DNA超螺旋转化造成影响，从而阻碍DNA复制与转录，抑制癌细胞分裂[5]。同时，其还可通过螯合铁离子后产生自由基，破坏细胞膜、蛋白质及DNA结构，发挥细胞毒作用。王玻玮等[6]研究显示，EPI对 MDA-MB-231、MDA-MB-468 等激素受体阴性细胞系的化疗敏感性明显高于MCF-7等激素受体阳性细胞系，且 EPI作用 24 h后，MDA-MB-231、MDA-MB-468中钙网蛋白、HSP70表达量均显著高于MCF-7，提示EPI在发挥较强细胞毒性作用的同时对激素受体阴性乳腺癌细胞还有潜在免疫原性死亡作用，对TNBC治疗有重要意义。作为紫杉烷类抗肿瘤药物，TXT以其良好的广谱抗癌作用和水溶性得到广泛应用，其可促进微管装配，机制与紫杉醇类药物相似，但其微管解聚抑制作用是后者的2倍，疗效更显著[7]。相关研究显示，TXT对于乳腺癌转移患者，单药化疗缓解率约为47%，联合蒽环类药物可显著提升疗效[8]。

蒽环-紫杉类药物联合化疗方案治疗TNBC虽可通过剂量密集给药发挥更强抗癌作用，但可能增加毒副反应风险。序贯化疗方案调整用药时机和周期时不改变化疗药物总量，为治疗TNBC提供了新思路。本研究结果显示，2种方案改善患者血清肿瘤标志物、细胞因子水平方面作用相当。存在于癌细胞表面的CEA是引起癌细胞之间及癌细胞与基质胶原之间黏附反应的糖蛋白，其为广谱性肿瘤标志物，用于乳腺癌、肺癌等恶性肿瘤的疗效判断、病情监测和预后判断效果较好[9]。CA199为黏蛋白型糖类蛋白肿瘤标志物。汤继英等[10]研究发现，血清CEA和CA199水平与乳腺癌化疗后总体生存时间、无进展生存时间相关，有助于准确评估乳腺癌患者临床预后状态。恶性肿瘤的病情进展与血清IL-8和IL-6水平密切相关，GDF3则为重要的肿瘤释放细胞因子，在肿瘤的发生中发挥重要作用。杨明德等[11]研究发现，化疗可通过降低乳腺癌患者血清IL-8和IL-6水平而抑制肿瘤浸润和转移。

ABCG2参与癌细胞的生长、分化和侵袭转移等多个过程[12]。P-gp则可将药物泵出癌细胞，减少进入癌细胞的药物量，并可降低癌细胞靶点的药物浓度，导致多药耐药的发生[13]。本研究结果显示，相对于联合化疗方案，TXT＋EPI序贯化疗对于减轻TNBC耐药程度有一定帮助。此外，研究组患者各类不良反应发生率均明显低于对照组（P ＜0．05），表明 TXT＋EPI序贯化疗对减轻化疗毒副作用有一定意义。王薇等[14]的研究也发现，TXT联合EPI序贯化疗对减轻TNBC患者肾功能损害、血液系统及胃肠道不良反应均有一定帮助，与本研究结果基本一致。

综上所述，TXT＋EPI序贯化疗改善TNBC患者血清肿瘤标志物、细胞因子水平作用与TXT＋EPI联合化疗相当，但减轻患者耐药程度和不良反应效果更好。