三七总皂苷对心肌缺血模型大鼠血清生化学和血液流变学指标的影响

王瑞峰，姜克悦

（河南南阳市油田总医院心血管内科，河南 南阳 473132）

心肌缺血为冠状动脉血流不全而导致的冠状动脉供血不足，进而导致心脏供氧减少和能量代谢不正常，不能支持心脏正常工作的一种病理状态，见于多种临床常见缺血性心脏疾病，目前尚无特效药物，致残率及病死率高[1]。三七总皂苷可抗血小板凝集，防止心肌缺血-再灌注损伤的发生，改善缺血性模型动物的心脑损伤程度[2]。本研究中建立了大鼠以心肌缺血模型，探讨三七总皂苷对其血清生化学和血液流变学指标的影响，为三七总皂苷的临床应用提供参考。

1 材料与方法

1．1 动物、仪器与试药

动物：清洁级SD大鼠(北京维通利华动物实验中心提供，许可证号为 SCXK＜京＞2012-0001)60只，雄性，5～6周龄，体质量 180～220 g。适应性喂养 7 d，实验期间自由饮水进食。

仪器：Multiskan FC型酶标仪(美国Thermo公司)；SHZ-Ⅲ型循环水真空泵(常州市金坛友联仪器研究所)；TGL-18C型高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)；GX 964型血小板黏附两用仪(上海第三分析仪器厂)；ZX-6020型全自动生化分析仪(西化仪＜北京＞科技有限公司)；LS-20ECG型大鼠心电图记录仪（北京拜安吉科学仪器有限公司）。

试药：三七总皂苷（成都普瑞法科技开发有限公司，批号为20150609）；苦碟子注射液（通化华夏药业有限责任公司，批号为20150912，规格为每支20 mL）；丙二醛（MDA）检测试剂盒（批号为 20150217）、一氧化氮(NO)检测试剂盒（批号为 20150326）、游离脂肪酸(FFA)检测试剂盒（批号为20141108），均购自南京建成生物工程研究所有限公司；水合氯醛及其余试剂均为药用级，水为蒸馏水。

1．2 方法

分组与给药：将60只SD雄性大鼠随机分为假手术组（A组，生理盐水）、模型组（B组，生理盐水）、苦碟子注射液组（C 组，100 mg／kg）和三七总皂苷高、中、低剂量组（D1组，D2组，D3组，200，100，50 mg／kg），每组10只。各组大鼠灌胃相应药物，每天1次，连续7d。

造模：于末次给药后，参照文献[3]建立大鼠心肌缺血模型，给予大鼠腹腔注射水合氯醛（300mg／kg），并在大鼠右上肢和左下肢皮下置入心电图电极针记录Ⅱ导联形态。在距离大鼠左冠脉前降支起始处3～4 mm穿线，结扎，观察心电图变化，显示ST段明显抬高视为造模成功。假手术组手术过程与上述相同，只穿线不结扎冠状动脉。

血清生化学指标检测：造模成功后24 h，腹腔注射10%水合氯醛（300 mg／kg）麻醉大鼠，腹主动脉取血5～6 mL，静置 10～20 min后 3 200 r／min离心 10 min，取上清液，采用酶联免疫吸附法检测。采用酶标仪分别在100，200，300 nm 波长处检测 MDA，NO，FFA 的吸光度，以说明书相应公式得上述指标含量。

血液流变学指标检测：取上述血清适量，以3．8%枸橼酸钠进行抗凝，采用血小板黏附两用仪检测血小板黏附情况，按下列公式计算血小板黏附率：血小板黏附率＝（黏附前血小板数-黏附后血小板数）／黏附前血小板数×100%。采用全自动生化分析仪检测纤维蛋白原含量和红细胞比容水平。

1．3 统计学处理

2 结果

2．1 大鼠血清中MDA，NO，FFA含量

与假手术组比较，A组大鼠血清中MDA，NO，FFA含量均显著增加（P＜0．05）；与 B 组比较，C 组、D1组、D2组、D3组大鼠血清中MDA，NO，FFA含量均显著减少（P＜0．05）。详见表 1。

表1 各组大鼠血清中MDA，NO，FFA含量比较（s，n＝10）

表1 各组大鼠血清中MDA，NO，FFA含量比较（s，n＝10）

注：与 A 组比较，P ＜0．05；与 B 组比较，＃P ＜0．05。下表同。

组别A组B组C组D1组D2组D3组剂量(mg／kg)100 200 100 50 MDA(nmol／mL)7．43 ± 1．35 9．06 ± 1．68 7．75 ± 1．62＃7．74 ± 1．05＃7．61 ± 0．92＃8．76 ± 1．97 NO( mol／mL)17．33 ± 0．82 31．45 ± 2．82 23．25 ± 1．11＃25．82 ± 1．08＃27．45 ± 2．82＃32．68 ±164 FFA(mmol／mL)389．62 ± 9．12 468．92 ± 9．47 395．62 ± 9．36＃393．73 ± 9．82＃416．28 ± 8．82＃432．81 ± 9．22

2．2 大鼠血小板黏附率、纤维蛋白原和红细胞比容水平

与A组比较，B组大鼠血小板黏附率和红细胞比容水平显著升高，纤维蛋白原含量显著增加（P＜0．05）；与A组比较，C组、D1组、D2组、D3组大鼠血小板黏附率和红细胞比容水平显著降低，纤维蛋白原含量显著减少（P ＜0．05）。详见表 2。

表2 各组大鼠血液中血小板黏附率、纤维蛋白原和红细胞比容水平比较（X ± s，n＝10）

3 讨论

缺血性心脏病多发于中老年人群，主要是因患者心脏血液灌注减少，心脏供氧量下降，心肌能量代谢异常，从而导致心脏不能正常工作[4]。临床治疗本病以降低患者心肌梗死频率，缩短心肌梗死的持续时间为主，以改善患者的生活质量，降低死亡率[5]。临床多给予患者钙拮抗剂、抗氧化剂、腺苷受体激动剂、β-受体阻滞药等进行干预，但并未取得理想效果[6]。丹参、红花、三七具有活血化瘀、通络活络之功效；三七为五加科植物的干燥根和茎[7]，其主要活性成分为三七总皂苷，包括三七皂苷R1、人参皂苷Re1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rd和人参皂苷Rb1[8]。药理学研究表明，三七总皂苷可有效抑制血栓形成，还能改善血压水平，扩张外周血管，保护受损的缺血性心肌细胞[9-10]。

血液流变学主要是针对血液黏滞性、凝固性的研究，是评估患者疾病发展程度的重要参数，该指标如果发生异常会加重细胞组织缺氧缺血，导致红细胞膜功能障碍进一步加重，从而损伤组织细胞。心肌细胞缺血缺氧可抑制NO释放，同时使冠状动脉进一步痉挛，加重心肌受损。因此，NO含量可一定程度反映心肌受损程度。MDA是大量的氧自由基造成脂质过氧化损伤的产物，可抑制前列环素合成酶活性，使血管收缩，加重心肌损伤。血清中FFA的含量与脂代谢、糖代谢、内分泌功能有关，心肌缺血使FFA含量异常增加，会进一步加重其缺血程度。本研究结果表明，三七总皂苷可显著减少心肌缺血模型大鼠血清中MDA，FFA，NO含量，显著降低血小板黏附率和红细胞比容水平，减少血液中纤维蛋白原的含量。但本研究由于样本量较少，且仅限于血清生化学和血液流变学指标，结果可能存在一定片面性，后期还需增大样本量，同时在基因和蛋白水平层面进行深入研究，为三七总皂苷的临床应用提供更有力的依据。

综上所述，三七总皂苷对心肌缺血模型大鼠的血清生化学和血液流变学指标有一定改善作用，其机制可能与抗氧化和改善血液质量有关。