绛县产人工栽培与野生柴胡质量对比研究

董晓丽，李香串，陈婷婷

(1.山西省医药与生命科学研究院，山西 太原 030006；2.山西中医药大学，山西 太原 030619)

柴胡(BupleurumchinenseDC.)为伞形科柴胡属植物，是最常用的药用植物之一。以野生为主，我国主要分布在东北、华北、西北、华中、华东等地区[1]，性微寒、味苦，具疏散通热，疏肝解郁，升阳举气之功效[2]。目前，商品柴胡以北柴胡为主，其中栽培的占80%以上，野生的不到20%[3]。随着对柴胡药材的使用量的增加，我国野生资源逐渐减少，不足以提供市场的需求[4]，人工栽培柴胡的市场占有量越来越大。通过对绛县迴马岭野生和人工栽培柴胡，从性状、组织结构、有效成分等方面进行对比研究，为柴胡资源的开发利用提供一定的科学依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器

电子分析天平(上海梅特勒-托利多ME104/02)；高效液相色谱仪(Agilent 1200)；Olympus显微镜(BH-2、SZX16)。

1.2 试药

柴胡皂苷a对照品(批号：110777．201108)，柴胡皂苷d对照品(批号：110778．201208)，对照品均购自中国食品药品检定研究院，盐酸、甲醇、乙醇、氨水均为分析纯，乙腈(色谱纯)，纯水自制。水合氯醛、稀甘油、浓硫酸、硫酸、对二甲氨基苯甲醛的甲醇溶液(1∶30)。

1.3 药材

采自山西省绛县迴马岭村。

2 试验方法

2.1 药材性状鉴别

对人工栽培及野生柴胡，从形状、大小、颜色、质地、断面、气味等方面进行详细的观察和描述，并拍照。

2.2 显微鉴别

2.2.1 组织切片

取柴胡若干浸泡于蒸馏水中，数小时后，徒手切成薄片，置于载玻片上滴1～3滴水合氯醛于酒精灯上透化约10 min，再滴1～2滴稀甘油后盖上盖玻片，置于显微镜下观察。

2.2.2 粉末鉴别

将柴胡样品碾成粉末过100目筛，取粉末用水合氯醛和透化片在显微镜下进行观察[5]。

2.3 含量测定

以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按表1中的规定进行梯度洗脱。检测波长为210 nm，流速为1.0 mL/min，柱温为25 ℃[6-7]。

表1 梯度洗脱条件表

取柴胡皂苷a、柴胡皂苷d对照品精密称定，加甲醇制成每1 mL含柴胡皂苷a 0.4 mg、柴胡皂苷d 0.5 mg的溶液，混匀，即得。取粉末约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加含5%浓氨试液的甲醇溶液25 mL后，密塞，30 ℃水温超声处理30 min后，过滤，用甲醇20 mL分两次洗涤容器和滤渣，洗液与滤液合并，回收溶剂至干后，残渣用甲醇溶解，转移至5 mL的容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。分别用微量进样器精密吸取对照品和供试品溶液10 μL，注入高效液相色谱仪，测定，即得。按干燥品计算，含柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的总量不得低于0.30%。

3 结 果

3.1 性状鉴别

栽培和野生柴胡药材性状见图1～2。

图1 栽培柴胡药材性状

图2 野生柴胡药材性状

由图1可知：栽培柴胡，根呈圆柱形，根头部膨大，主根大部分明显，极少数不明显。重0.2～2.2 g，长6.0～18.9 cm，直径0.10～0.77 cm，顶端残留0～4个茎基且大部分茎基较少 ，短纤维状叶基大部分为2个，少部分4个。大部分分枝较多而且分枝较细。表面黄棕色，具纵皱纹，皮孔较少。质脆易折断，断面纤维性。气味香，味微苦。

由图2可知：野生柴胡，根呈圆柱形，根头部膨大，主根不明显，重0.4～9.5 g，长12.1～19.2 cm，直径0.04～0.77 cm，多分枝，一级分枝为2～14。顶端残留1～12个茎基，基本无短纤维状叶基。表面灰棕色，具纵皱纹，皮孔明显，质脆易折断，断面纤维性。气味香，味微苦。

表2 性状鉴别

由图1、2及表2可知：人工栽培柴胡与野生柴胡的区别主要在于：形状上较顺直，分枝较少。表面颜色略浅，皮孔突起不明显。

3.2 显微鉴别

3.2.1 组织切片

栽培和野生柴胡横切面见图3～4。

图3 栽培柴胡横切面

图4 野生柴胡横切面

由图3可知：栽培柴胡根木栓层为数列细胞，由3～7层木栓细胞构成，木栓层厚度为270.03～2 211.53 μm；皮层散有油管，少有裂隙；韧皮部有油管，射线较宽；形成层成环；木质部约占三分之一，导管散列；木射线明显。

由图4可知：野生柴胡根木栓层为数列细胞，由2～6层木栓细胞构成，木栓层厚度224.31～381.04 μm；皮层散有少数油管；韧皮部有油管，射线较宽；形成层成环；木纤维明显。

3.2.2 粉末鉴定

由图5可知：栽培柴胡粉末为浅灰棕色，木纤维散在，少有成束，长梭形，多断裂。导管较多，多数为螺纹导管，少数为网纹导管。油管少见，有大量黄棕色分泌物。

图5 栽培柴胡粉末

图6 野生柴胡粉末

由图6可知：野生柴胡粉末灰棕色，木纤维散在或成束，长梭形，多断裂。大量螺纹导未见网纹导管。油管少见，有大量黄色分泌物及分泌管。

3.3 柴胡皂苷a、d含量测定

表3 对照品含量表

图7 柴胡对照品色谱图

图8 柴胡样品色谱图

表4 样品含量表

由图7、表3和图8、表4分析可知：人工栽培柴胡和野生柴胡皂苷a+d的含量分别为0、5163%、0.5043%，均高于2015版《中国药典》规定的不得少于0.30%的标准，并且人工栽培柴胡指标成分含量高于野生柴胡。

4 讨 论

性状及显微鉴定是中药鉴定的重要手段之一，在药材质量评价指标的选择上我们采用从性状、显微到成分的多重指标控制，突破了单一成分控制质量的模式，为柴胡的质量研究提供合理的依据。研究发现人工栽培柴胡与野生柴胡的组织构造、细胞形状以及内含物等特征，差异不大；但人工栽培柴胡在外观性状及药效成分含量上均优于野生柴胡，且适生性强，可代替野生柴胡使用，值得在绛县地区进一步研究并推广种植。