mir-329在子宫颈癌中的表达及作用

薛芳芳 朱莉

子宫颈癌(cervical cancer,CC)简称宫颈癌，是常见的妇科肿瘤之一。我国每年约有13.5万宫颈癌新发病例，占全球发病数量的1/3[1]。高危型人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus，HPV)的持续感染是宫颈癌常见致病原因，此外，众多宿主基因的表达调控也会影响宫颈癌的发生发展[2]。微小RNA(microRNA，miRNA)是内源性的短非编码单链RNA(17-22个核苷酸)，通过5′端(2-7个碱基对)与靶mRNA的3′端非编码区(3′-UTR)序列特异性互补结合，降解mRNA或抑制mRNA翻译进而调节基因的表达[3]。到目前为止，已有超过1000个miRNA被预测存在于人类基因组中，约50%的miRNA基因位于经常扩增或缺失的薄弱位点和基因组区域，人类癌症中常出现此类区域microRNA的异常表达[4]。越来越多的研究表明，miRNA表达异常在肿瘤细胞增殖、迁移及恶性进展中扮演重要角色。最新报道指出mir-329在宫颈癌组织中表达异常，可作用于肿瘤血管内皮标志分子CD146、丝裂原活化蛋白激酶MAPK1等宫颈癌相关靶基因,而发挥抑癌基因作用。现就mir-329的生物学功能及其在宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭方面的研究现状进行综述。

一、mir-329的生物学功能

mir-329是中枢神经系统表达的一种miRNA，定位于染色体14q32.31上。迄今已发现约12%人类miRNA基因分布在14号染色体该区域上，此区域存在不稳定脆性，易发生基因杂合性丢失，是导致恶性肿瘤发生的危险因素[5]。mir-329可作为一种肿瘤抑制因子在多种人类肿瘤中发挥作用，如胶质母细胞瘤[6]、胰腺癌[7]、神经母细胞瘤[8]等，且在上述肿瘤中呈低表达状态。最新研究表明，宫颈癌组织中mir-329的表达水平明显低于相邻正常宫颈组织[9]，这使得研究宫颈癌组织中mir-329的表达水平与宫颈癌的发生发展具有重要意义。

二、mir-329对宫颈癌细胞增殖迁移和侵袭能力的影响

肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭是其重要的生物学特征，其中迁移和侵袭是恶性肿瘤的特性。研究表明，宫颈癌相关靶基因内皮生物标志物CD146和丝裂原活化蛋白激酶MAPK1，与宫颈癌细胞的增殖迁移和侵袭现象具有相关性。

新生血管的生成对于生理性和病理性的组织细胞生成都是很重要的环节，抑制肿瘤新生血管形成是目前治疗恶性肿瘤的重要方法之一[10]。肿瘤的发生发展过程中会产生不同的血管生成因子，如血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子(TNF)等，其中血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)对血管生成起关键作用。最近研究发现内皮生物标志物CD146可作为VEGFR-2的共同受体参与血管生成[11]，且在病理性血管生成期间异常上调的CD146增强了VEGF诱导的SRC激酶家族(SKF)/p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/NF-κB活化的内皮反应，进一步促进内皮细胞迁移和血管形成[12]。Robert等[13]发现在宫颈上皮不典型增生(CIN)和宫颈鳞状细胞癌(SCC)中，VEGF和VEGFR-2两种形式都被鉴定表达，而在正常宫颈上皮中未检测到上述因子。Cheng等[14]研究表明促进肿瘤血管生成的重要黏附分子CD146在宫颈癌细胞中呈高表达状态，Wang等[15]通过Western印迹分析和荧光素酶测定方法验证了CD146为mir-329的直接靶基因，同时在mir-329模拟物转染后的动物实验中抑制血管上过度表达的CD146，发现病理性血管生成的小鼠模型中显著减弱了新血管的形成，该结果进一步证实CD146在血管生成中的表达受mir-329调控。综上所述，mir-329通过靶向CD146而抑制新生血管的形成，从而在宫颈癌中发挥抑癌基因作用。

细胞异常的增殖和凋亡是肿瘤重要的病理学基础[16]。研究表明，众多信号通路参与并影响了肿瘤细胞的增殖、分化和凋亡，其中，MAPK是普遍存在于真核细胞中的一种高度保守的丝氨酸(Ser)/苏氨酸(Thr)蛋白激酶，能将多种细胞外刺激产生的信号通过级联反应从细胞膜传递到细胞核内，在细胞的增殖、分化及凋亡等多种生理和病理过程中发挥重要作用[17]。MAPKs成员之一MAPK1的表达与肿瘤关系密切，是众所周知的致癌基因，已被证实在卵巢癌、非小细胞肺癌等多种人类癌症中过度表达[18]。研究显示，与配对的相邻正常宫颈组织相比，宫颈癌组织中MAPK1的mRNA表达水平显著上调[19]。Li等[9]采用Spearman相关分析显示宫颈癌组织中mir-329与MAPK1的表达水平呈负相关，此外，用si-MAPK1敲低HeLa和SiHa细胞中的MAPK1表达，结果显示MAPK1的下调明显抑制HeLa和SiHa细胞的增殖，其生物作用与mir-329过表达相似。值得注意的是，MAPK1表达的恢复显著逆转了由mir-329过表达引起的对HeLa和SiHa细胞增殖的抑制现象。这些结果表明，mir-329在宫颈癌中至少部分通过靶向MAPK1发挥肿瘤抑制作用。因此，mir-329和MAPK1可作为抗肿瘤治疗的新型治疗靶点进行研究。

三、mir-329与宫颈癌患者预后

宫颈癌每年造成约53万例新病例和27.5万例死亡病例，宫颈癌患者的诊治疗效主要取决于临床分期[20-2]。据报道，被诊断为宫颈癌晚期患者的5年生存率仍不令人满意，肿瘤转移约占所有与癌症有关死亡的90%,是成功治疗的主要障碍[22]。因此，宫颈癌进展的可靠识别对其临床治疗及预后有重要意义。越来越多标记物被用于预测宫颈癌的侵袭性研究，有报道指出miRNA与宫颈癌患者的预后相关，如mir-155[23]、mir-664[24]等，这表明miRNA可能是宫颈癌中一个新的预后标记。Chang等[25]通过RT-PCR方法发现与正常的宫颈组织相比，宫颈癌组织中mir-329明显下调，为了探讨mir-329与宫颈癌患者的临床病理参数之间的关联，将宫颈癌患者依据mir-329的平均表达水平分成高mir-329表达组和低mir-329表达组，结果表明mir-329水平与淋巴结转移、FIGO分期和远处转移有关，而与其他临床特征(包括年龄、肿瘤大小、组织学类型和肿瘤分化)之间没有明显的相关性。同时，Chang等[25]使用Kaplan-Meier方法发现mir-329表达水平较低的患者平均存活时间较mir-329表达水平较高的患者平均存活时间短，更重要的是，单变量和多变量Cox回归分析表明，下调mir-329可能成为宫颈癌患者的独立预后元素。这是首次在宫颈癌中强调mir-329的临床预后意义，它可能是宫颈癌患者的潜在预后标志物。

四、结语

综上所述，mir-329在宫颈癌的发生发展及预测预后方面有着重要作用。尽管目前mir-329在宫颈癌方面的研究尚处于初步阶段，临床明确的相关靶基因也很有限。相信随着后基因组时期的到来，基因组学研究的深入和分析方法的改进，mir-329有望成为宫颈癌早期诊断及临床诊疗的新方向，并为评估宫颈癌患者的临床预后提供新的思路和依据。