藏药抗肿瘤的研究概况

张光云 陈 普

云南中医药大学 云南省傣医药与彝医药重点实验室，云南 昆明 650500

癌症又称为恶性肿瘤，有研究显示中国的癌症成为2010年以来死亡的主要因素，且成为一个主要的公共卫生问题[1]。随着现代人生活环境和生活方式的改变，癌症患病率和死亡率的逐渐升高，严重危害人类的健康。为此，寻找到一种有效且副作用小的抗肿瘤药物已然成为学者们最为关心的迫切问题。近年来，藏药在抗肿瘤方面的应用价值越来越得到学者们的肯定，藏药属于天然药物，因其药用资源丰富，应用价值高，已成为了挖掘新药的重要研究方向。笔者以中国知网文献检索数据库为主，以“藏药/藏医”、“抗肿瘤/癌症”、“作用机制”为检索关键词，以近年来关于抗肿瘤的藏药研究参考文献和书目记载为基础，对藏药在抗肿瘤上的应用概况综述如下。

1 藏药中抗肿瘤活性的成份

藏药中的天然抗肿瘤活性成分是寻找抗肿瘤药物的重点方向，对寻找到一种疗效好且副作用小的抗肿瘤药物具有重要的意义。为此，诸多学者一直在不断的探索抗肿瘤药物中的主要活性成分。如王晓琴[2]通过提取藏药矮兔耳草中的总皂苷，使用其对人胃癌MGC-803细胞的增殖和凋亡进行实验，结果显示：藏药矮兔耳草提取物可以抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖，且抑制作用具有时效和量效关系；此外，且可诱导人胃癌MGC-803细胞系的凋亡。朱小牧等[3]首次研究从巴夏嘎中分离得到的鸭嘴花碱对A549、A2780、HepG2、LLC细胞增殖的抑制作用，结果显示鸭嘴花碱对实验细胞株均有着不同程度的抑制作用，且细胞增殖抑制率与化合物浓度存在量效关系；其中，鸭嘴花碱对LLC的抑制作用最为显著。令狐浪[4]应用从藏药巴朱中分离得到了两种化合物进行诱导肿瘤细胞凋亡实验，结果显示两种化合物均能抑制肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞周期阻滞和细胞凋亡，且可增加促凋亡蛋白Bax的表达，降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。雒艳萍[5]从藏药裸茎金腰分离出DTFG和TTF两种黄酮类化合物，实验结果发现DTFG可以抑制豚鼠的淋巴细胞活性，TTF对胃癌细胞SGC-7901及白血病耐药细胞K562/ADM的增殖具有抑制作用；且可诱导胃癌细胞SGC-7901发生凋亡，体外可促进豚鼠EOS活性。CHANDRAN U等[6]研究发现三果汤在抗肿瘤上有较好的作用，其作用机制是通过藏药三果汤散中的槲皮素、鞣花酸等13个生物活性成分与24种癌症中的17个靶蛋白相互作用；而ZHAO Y等[7]在2018年的体外细胞试验也证实了三果汤散能对妇科肿瘤细胞发挥较好的促凋亡作用和抑制作用，能有效的抑制人子宫内膜癌HEC-1-B细胞、人卵巢癌人宫颈癌HeLa细胞和SK-OV-3细胞的增殖，且有剂量相关性。刘波[8]对藏药湿生扁蕾中口山酮类化合物(Compound 1-4)进行抗癌活性筛选发现，Compound 1-4对HepG2和HL-60细胞均有较强的细胞毒性，且能够引起两种细胞不同程度的发生凋亡；其中Compound 2的抗癌活性最强，但高浓度时会造成对DNA的损伤。大量的研究证实藏药余甘子抗肿瘤活性成分是没食子酸、表儿茶素和鞣花酸[9-11]。李艳等[12]对藏药寨卡有效部位的分离进行鉴定及研究其抗肿瘤活性，结果显示藏药寨卡抗肿瘤的有效部位主要为硫代葡萄糖苷，并对小鼠S180和CT-26实体瘤的生长存在明显的抑制作用。张芳芳等[13]进行镰形棘豆提取物抗肿瘤活性的体外实验发现镰形棘豆抗肿瘤活性的主要部位是镰形棘豆的挥发油和总黄酮，它们均可不同程度地抑制人癌细胞株的增殖，并呈现出一定的量效关系。

2 藏药抗肿瘤机制研究

2.1 抑制肿瘤细胞的生长和增殖 细胞增殖是生命体维持生长、发育、繁殖和遗传的生命体征，而肿瘤细胞增殖则会对人体的生命健康产生危害作用；因此，从抑制肿瘤细胞增殖方向出发，去寻找能显著抑制肿瘤细胞的药物就显得更有价值。普布多吉等[14]采用MTT法研究藏药大花绿绒蒿内生真菌次级代谢对乳腺癌肿瘤细胞株MDA-MB-435的抑制活性，结果显示抑制率大于80%内生菌菌株有17株，抑制率介于50%～80%之间的内生菌菌株13株，抑制率小于50%的内生菌菌株有10株；抑制率大于80%内生真菌菌株有9个种属。结果表明，大多数大花绿绒蒿内生真菌具有良好的抗乳腺癌肿瘤活性。傅永红[15]使用藏药甘青乌头生物碱抑制人源肝癌细胞HepG-2和鼠源肺癌细胞Lewis的增殖，结果表明甘青乌头脂溶性生物碱和水溶性生物碱对肝癌细胞HepG-2和肺癌细胞Lewis均具有一定的抑制作用，且水溶性生物碱比脂溶性生物碱的抑制作用更加明显，而抑制作用会随着作用时间的延长和药物浓度的增加而增强。顾青等[16]从藏药镰形棘豆中分离出7-甲氧基二氢黄酮( 7-methoxy flavanone，1)，7-羟基二氢黄酮 ( 7-hydroxy flavonone，2)，2'，4'-二羟基査耳酮(2'，4'-dihydroxy chalcone，3)，2'，4 '-二羟基4'-甲氧基查尔酮( 2'，4 'dihydroxy4'-methoxy chalcone，4)，N(2-苯乙基)肉桂酰胺(N2-phenylethyl cinnamamide，5)5中化合物，经过MTT试验发现化合物3(2'，4'-dihydroxy chalcone，3)对人肝癌细胞HepG2、小鼠黑色素瘤细胞B16F10、人肝癌细胞SMMC7721、人肝癌细胞HuH7以及人乳腺癌细胞MDA-MB231的增殖具有明显的抑制作用。程燕等[17]研究藏药柳茶水提物对胃癌耐药细胞 BGC823/5-FU增殖及药物敏感性的影响，发现其可以较好的抑制胃癌耐药细胞株BGC823/5-FU的生长，并在一定程度上逆转其化疗耐药，并且抑制抗凋亡蛋白的表达、激活促凋亡蛋白、诱导耐药细胞发生凋亡可能是其作用的主要机制。吉立宾[18]运用藏药雪灵芝水提取物研究其对胃腺癌细胞MGC-803增殖抑制的影响，得出雪灵芝水提取物对MGC-803细胞增殖具有抑制作用，对MGC-803细胞G1期具有阻滞作用及在细胞凋亡中也具有一定的作用；此外，其可通过下调细胞周期正性调节因子CyclinD1和上调负性调节因子P21和P16的表达，发挥G1期阻滞作用；并且雪灵芝水提取物影响MGC-803细胞凋亡可能是通过降低Bc1-2基因表达和升高Bax的基因表达来完成的。

2.2 诱导细胞凋亡与抑制细胞增殖 肿瘤的生成不仅与细胞不断增殖有关，还与细胞凋亡或死亡受阻关系密切；当细胞凋亡通路受到阻断，就有可能引发肿瘤。因此，人们在研究抗肿瘤的药物中，除了研究怎样抑制肿瘤细胞增殖外，还通过诱导肿瘤细胞的凋亡来治疗肿瘤。杨荣等[19]选用5种不同的人体癌细胞(A549、HepG2、SGC7901、 MM-A375、SHEP1)作为研究对象，为了观察藏药绿萝花抗肿瘤的作用机制，通过MTT分析法筛选出具有显著抑制效果的SGC7901细胞，结果发现绿萝花水煎干膏制剂在体外能通过抑制人胃癌SGC7901细胞增殖和诱导细胞调亡而具有抗肿瘤作用；此外，本实验还发现绿萝花具有增强小鼠机体免疫功能的作用；孙翠翠等[20]研究了绿萝花水溶性多糖诱导腹水瘤S-180细胞、肝癌HepAl-6细胞和白血病L1210细胞凋亡的作用，结果显示不同剂量绿萝花水溶性多糖均具有诱导S-180细胞凋亡的作用，均可上调其早期和晚期凋亡率。有研究显示[21]，余甘子水提物呈剂量依赖性延长荷EAC或DLA细胞腹水癌小鼠生存期及抑制体外培养的L929细胞的生长、抑制DLA细胞诱导的实体瘤的生长,并推测这种抑制作用与细胞周期阻滞有关；此外，余甘子提取物对人肺癌细胞A549和人肝癌细胞HepG2都有一定的抑制作用,而且其抑制作用和顺铂以及阿霉素存在协同效果[22]；陈静等[23]发现余甘子鞣质部位体外对人肿瘤细胞A549、BEL-7402均有明显的生长抑制作用,且这种抑制作用与诱导肿瘤细胞凋亡及细胞G2/M期阻滞有关；此外，余甘子目前在抗肿瘤方面的研究较为成熟，不仅从余甘子药物中的不同单体进行研究，在作用机制方面还具有抑制肿瘤血管生成[24-25]和调节机体免疫力的功效[26]。赵萤[27]研究镰形棘豆和藏医学法炮制马钱子醇提物对肿瘤细胞增殖及凋亡的影响，结果表明镰形棘豆和藏医学法炮制马钱子醇提物均能抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡，且均呈剂量依懒性。从药物作用机制对抗肿瘤的药物进行分析，将有利于进一步明确药物作用于人体的具体靶点，可为今后开展药物作用机制研究提供思路及参考。杨光明等[28]研究藏药镰形棘豆总黄酮的不同剂量作用于SMMC-7721细胞，观察药物对细胞的凋亡情况及其与凋亡相关蛋白的表达情况，发现镰形棘豆总黄酮作用SMMC-7721细胞后可凋亡细胞的比例明显升高; Bcl-2蛋白表达下降，Bax蛋白表达与对照组比较有所降低，但Bcl-2/Bax比值明显减小，说明镰形棘豆总黄酮具有抑制SMMC-772细胞的增殖并诱导细胞凋亡的作用，其分子机制可能与下调Bcl-2基因表达和降低Bcl-2/Bax的比值有关。藏药湿生扁蕾关于抗肿瘤的作用机制较多，有研究报道[29]其对人结肠癌SW480细胞凋亡与调控因子Bcl-2及Bax的mRNA的表达密切相关，藏药湿生扁蕾作用结肠癌SW480细胞24h后，Bcl-2的mRNA表达量减少，Bax的mRNA表达增多，并呈剂量依赖性；王雅莉等[30]观察藏药湿生扁蕾对人结肠癌细胞SW480增殖调控因子CyclinD1、CDK4、PCNA和p21kip1·mRNA表达的影响，结果表明，藏药湿生扁蕾作用结肠癌SW480细胞24h后，与对照组比较，CyclinD1、CDK4、PCNA mRNA的表达减少，p21kip1·mRNA 的表达增多，并有剂量依赖性，说明湿生扁蕾引起结肠癌SW480细胞凋亡可能与其抑制CyclinD1、CDK4、PCNA mRNA的表达和促进p21kip1·mRNA的表达有关；而卢年华[31]从NF-κB信号通路研究藏药湿生扁蕾提取物诱导结肠癌细胞凋亡的作用机制，其发现一定的藏药湿生扁蕾提取物浓度对NF-κB的表达具有下调作用，且能诱导结肠癌SW480细胞的凋亡。李红芳等[32]研究发现藏药中苯酚类衍生物通过上调核转录因子NF-KB 65可能激活凋亡通路从而诱导细胞的凋亡，抑制细胞的增值；此外，细胞内连环蛋白β-catenin 的表达也上调，进而导致细胞间的粘附性增强，从而抑制了肿瘤细胞的转移。王飞[33]研究了余甘子抗癌化学物质组分及作用机制，结果发现余甘子70%乙醇提取物的血浆整体对癌细胞的抑制率较高，特别是对肝癌细胞及宫颈癌细胞的抑制率较好，通过用流式细胞仪对凋亡细胞进行细胞周期测定,发现余甘子能使癌细胞发生S期阻滞，影响细胞周期正常进程；对肝癌细胞SMMC-7721和宫颈癌细胞Hela使用余甘子纯化后总酚酸和总黄酮，结果均表现出较高的抑制率。

2.3 藏药抗肿瘤药物的筛选与新发现 藏药在抗肿瘤方面的研究较多，不仅筛选出多种藏药具有抗肿瘤作用的药物，且还从逆转肿瘤多药耐药方面对藏药进行了研究。如党合群等[34]对21种藏药进行动物实验，以筛选出具有抗肿瘤作用的药物，结果显示在21种藏药的各种制剂中，毛盔马先篙、亚切玛、沙生凤毛菊的醇提物和唐古特乌头生物硷对小鼠肉瘤180，长毛马先篙、五脉录绒篙的醇提物对L615小鼠白血病，禾叶凤毛菊、五脉录绒篙的醇提物对大鼠Walker癌肉瘤256有不同程度的抑制作用。宗玉英等[35]对110 种藏药抗肿瘤体外筛选实验研究，结果显示:五种藏药桃儿七果实、藏木香、裸茎金腰、祁连圆柏、苍耳草均具有较好的抗肿瘤作用。藏药红景天不仅在体外对某些肿瘤细胞有抑制作用，且对机体整体水平也具有抑瘤作用；但红景天抗肿瘤的具有作用机制至今尚不完全清除,因此需要进一步进行深入研究[36]。黄旭峰等[37]通过文献整理与访谈，整理出具有抗肿瘤功效的60种药材和6种复方，发现这些品种中直接抑制肿瘤细胞生长与增殖的药材有27种；诱导肿瘤细胞凋亡的药材有12种；诱导肿瘤细胞分化的药材有2种；增强机体免疫功能的药材有3种；由此可看出，藏药在抗肿瘤上的潜力巨大，将成为今后开展抗肿瘤研究的重要方向。此外，刘庆山等[38]研究藏药“斋毒”中5个创新活性化合物在肿瘤多药耐药的逆转作用，结果发现5个化合物分子具有创新的GsT抑制活性，特别对GST兀、GsTp1-1型活性很高，且活性远远高于阳性药依他尼酸，说明这5个化合物具有逆转肿瘤多药耐药的前景，可能成为未来新的抗癌药和增敏剂来治疗肿瘤，其具有较好的药物开发前景，因此有必要进行进一步整体水平和细胞的研究。

3 小结

藏药是我国传统医药的重要组成部分，药用资源丰富。其在抗肿瘤上的药用价值较广，但目前关于藏药抗肿瘤的研究还不多，因此今后应该加强藏药在抗肿瘤应用价值上的研究，以期为解决抗肿瘤治疗这一世界难题提供更为有效的治疗方案和途径。笔者从收集整理的文献可以看出，目前藏药被研究出具有抗肿瘤效果的药物仍然很少，且存在以下问题：①大部分药物研究主要基于体外的细胞增殖和细胞凋亡这两方面，关于体内的研究报道较少；②研究出来的药物在临床上是否有疗效少有报道；且大部分的药物作用机制不清楚，只是从细胞增殖的抑制和诱导细胞凋亡来进行探索；③药物发挥抗肿瘤的具体成分研究较少，大部分主要集中在水提取物和醇提取物的研究上。因此，为了充分挖掘藏药在抗肿瘤上的应用价值，笔者建议从以下方面进行：①增加动物体内的实验研究，以期为临床的应用奠定基础；②充分利用现代技术对具有抗肿瘤的藏药化学成分进行分离，明确其具体的有效部位或对抗肿瘤有用化合物，再进一步使用有效部分或化合物进行抗肿瘤作用机制的研究；③充分收集整理民间治疗肿瘤疾病有效的单验方，以扩大藏药抗肿瘤的药物库，为寻找到更多有利于治疗肿瘤疾病的药物提供充足资源。