呋喃唑酮代谢物在食品检测中的研究新进展

2019-01-06任峥峰

吉林农业 2019年17期

徐骏，刘坤，李丹，陈晨，任峥峰，张文

（1.吉林省安信食品技术服务有限责任公司；2.吉林省食品所，吉林长春130118）

由于呋喃唑酮便宜、耐性好、抗菌效果好,所以现阶段乱用现象比较明显。为了减少这种乱象的发生,对食品进行呋喃唑酮检测是很有必要的。呋喃唑酮本身对人体没有毒害,而其代谢产物通过毒理学研究表明对人体有毒害作用,这类物质具有致癌、致突变作用。因此，研究呋喃唑酮的检测新进展是很有意义的[1]。

1 食品检测中呋喃唑酮代谢物的研究新进展

据报道，现在研究食品中呋喃唑酮代谢物的检测，比较常用的方法有酶联免疫法、荧光免疫快速检测试剂卡法、胶体金免疫层析法、化学发光检测试剂盒法、酶标抗原直接竞争 ELISA方法、单克隆抗体和胶体金免疫层析试纸条法等。

随着研究的不断深入，对食品检测中的呋喃唑酮代谢物的检测方法也在不断地发展进步，李春生和他的团队建立了一种快速检测呋喃唑酮代谢物残留的方法。试验用呋喃唑酮代谢物的衍生物与牛血清白蛋白的偶联物免疫小鼠，利用单克隆抗体技术制备杂交瘤细胞，用间接和间接竞争ELISA法对阳性克隆进行筛选。单克隆细胞株诱生腹水后，经纯化即为单克隆抗体，用于胶体金标记，制备呋喃唑酮代谢物胶体金免疫层析试纸条。融合后得到2株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株，其中，4G3纯化后的抗体效价达到1:100万，对CPAOZ的 50%抑制质量浓度为 1.7μg/L，亲和常数 Ka=1.6×109L/mol。该抗体制备的胶体金试纸条的检测限为4μg/L，与其他 3种硝基呋喃代谢物的衍生物 CPAHD、CPSEM和CPAMOZ均不存在交叉反应，对样品的检测与高效液相色谱结果一致。他们研制出了抗呋喃唑酮代谢物特异性单克隆抗体，并研制了以单抗为基础的胶体金免疫层析试纸条，能够实现呋喃唑酮代谢物残留的快速、灵敏的检测[2]。

史晓亚等研究了呋喃唑酮代谢物间接竞争酶联免疫的检测方法。他们利用活化酯法将卵清蛋白和半抗原连接成为包被原，对包被原和单克隆抗体的稀释倍数，封闭液浓度、竞争时间、酶标二抗孵育时间和显色反应时间进行优化，得到了较好的指标，并进行了方法学评价，得到的结果较好。结果表明，最佳条件为包被原和单克隆抗体稀释倍数分别为800倍和6400倍，封闭液是 1%脱脂乳，竞争时间是60 min，辣根过氧化物酶标记羊抗鼠二抗孵育时间是45min，显色时间是 15min。这种方法特异性强，准确性、精密度和重现性均良好，可用于动物源性食品中呋喃唑酮代谢物的快速筛查[3]。

赵义良等研究出了免疫荧光检测的技术,他们研发了一种快速检测呋喃唑酮代谢物的试剂卡。具体的研究内容如下：他们利用EDC介导偶联抗体,因为铕荧光微球具有下列优点：持续稳定性好，不易受干扰，强度大，把它作为荧光标记物。通过优化铕荧光微球与单抗之间的用量，改善试剂卡的显色梯度，把试剂卡的灵敏度提高。通过研究他们得到了如下结论：这种试剂卡对呋喃唑酮代谢物的检出限低，存储时间长；检测结果安全可靠。所以，呋喃唑酮代谢物试剂卡可以用来作为食品中呋喃唑酮代谢物的检测，为食品安全提供保障[4]。