胃癌组织中microRNA-214和MGAT5表达及预后的相关性分析*

全细云 ， 李 明 ， 陈栋良，邓 燚，彭 曼

1. 湖南省株洲市中心医院病理科(株洲412000)；2.湖南省株洲市中心医院急诊科(株洲 412000)

胃癌是一种严重危害人们生命健康的恶行肿瘤。随着社会和经济的发展，工业的不断进步，周围环境污染越来越严重，胃癌的患病人数越来越多，严重影响了人们的生活质量[1]。据相关资料显示，胃癌的发病率在消化系统癌症中的发病率越来越高。快节奏的生活使得人们的饮食极其不规律，进而导致胃癌的发病率越来越高，严重影响了人们的生活质量。对于该种疾病不易进行诊断，导致治疗不及时，延误治疗的最佳时期，不利于患者的病情恢复。在临床的诊断过程中，由于癌症病症的特殊性，容易在身体各处进行转移，这样会加大诊断结果的难度，使得医生对患者的病情不能准确了解。患者得不到有效的治疗，导致患者的病情延误[2-3]。microRNA可以调节基因的表达活性，被应用于肿瘤发病机制中。因此，microRNA-214和MGAT5可以调控多个靶细胞来控制疾病的发展与发生。对于microRNA-214和MGAT5的研究尚不透彻，仍有一些问题没有解决，作用的机制尚未明朗。因此该文章就随机选取在我院治疗的80例胃癌患者探究胃癌组织中microRNA-214和MGAT5的表达及预后的相关性分析。

资料与方法

1 一般资料 随机选取2015年6月至2017年6月在我院治疗的80例胃癌的患者作为研究对象，收集其进行手术切除的胃组织标本作为研究对象，患者的胃癌组织作为研究组，患者的癌旁正常胃黏膜组织作为对照组。患者的平均年龄(39.1±6.3)岁；男41例，女39例，<60岁的患者为45例,>60岁的患者为35例；肿块大小>5 cm的患者为55例,肿块大小<5 cm的患者为25例；按WHO国际组织分类标准:管状腺癌(高、中分化型)35例，低分化及未分化型腺癌45例；按国际抗癌联盟(UICC)临床TNM分期:Ⅰ、Ⅱ期30例，Ⅲ、Ⅳ期50例；出现淋巴结转移的患者为45例，未出现淋巴结转移的患者为35例；患者术前均未接受过放化疗及其它针对肿瘤的治疗。

纳入标准：所有的患者在进行手术后病情较为稳定，还有意识，能够配合医生的治疗。没有其他的疾病。排除标准：患有其他的疾病，例如肾功能不全、下肢深静脉血栓、关节脱位、心肺的功能不全以骨折以及有精神方面的问题等等。没有其他的疾病。

2 检验方法 首先，对胃癌患者的胃癌组织以及胃黏膜组织进行切除保存。使用10%的福尔马林液进行固定，使用石蜡进行包裹，制成切片，进而进行后续的病理分析实验。进行病理分析的样本均要经过2名或者以上的高级称职的病理分析师进行相应的病理分析，选取的胃癌患者均未进行放化疗的治疗[4-5]。 免疫组织化学染色及分析的方法：免疫组织化学生物素，亲和素一酶结合物(ABC)法按照说明书上的指示严格执行，将石蜡切片去除蜡之后，进行水化，然后置于3%的过氧化钠溶液中静置10 min 左右，在室温下静置，去除组织中内源性过氧化物酶，将其放入0．01 mol/L柠檬酸盐缓冲液中进行浸泡，并采用微波法对组织进行抗原修复10 min左右；接着在室温下采用5%山羊血清进行封闭处理30 min；加一抗湿盒在4℃下进行孵育过夜；加即用型二抗，在室温条件下进行孵育30 min左右；接着使用二氨基联苯胺(DAB)进行显色3 min左右，使用苏木素进行复染操作，进行封片。对于最后的染色结果由2位高级职称的病理分析师进行读片，得出结果[6-8]。若读片过程中，出现两者不一致的结果时，需要双方进行协商得到最后的结果。免疫组织化学染色结果的判断：在400倍的光镜下对4个不同的视野进行计数，若细胞质中出现棕黄色颗粒，则结果计数为阳性，最终染色的结果要与阳性的细胞数以及染色的强度相结合，进行半定量的分析[9]。

染色强度：阴性(0分)，染色弱但结果高于阴性对照(1分)，染色结果清晰，容易辨认(2分)，染色强(3分)。阳性细胞数：≤25%(1分)，26%～≤50%(2分)，51%～≤75%(3分)，>76%(4分)。MGAT5低表达组为0～8分，MGAT5高表达组为9～12分[10]。

结 果

1 研究组和对照组microRNA-214和MGAT5水平的对比 患者胃癌组织中的microRNA-214和MGAT5表达率要比患者胃黏膜组织中的microRNA-214和MGAT5表达率要明显高(P<0.05)，见表1。

表1 研究组和对照组microRNA-214 和MGAT5水平的对比

2 是否出现淋巴结转移的胃癌患者的的对比 在胃癌中出现淋巴结转移的患者的microRNA-214和MGAT5表达率要比未出现淋巴结转移患者的量要明显的高(P<0.05)， 见表2。

3 胃癌不同的时期患者microRNA-214和MGAT5水平的对比 在胃癌患者中Ⅰ期、Ⅱ期的血清中的microRNA-214和MGAT5表达率要比Ⅲ期的表达率要明显的高(P<0.05)；在胃癌患者中Ⅰ期、Ⅱ期的microRNA-214和MGAT5表达率要比Ⅳ期的水平要明显的高(P<0.05)，在胃癌患者中Ⅲ期的microRNA-214和MGAT5表达率要比Ⅳ期的表达率要明显的高(P<0.05)。见表3。

表2 是否出现淋巴结转移的胃癌患者中 microRNA-214和MGAT5水平的对比

表3 胃癌不同的时期患者microRNA-214 和MGAT5表达率的对比

4 microRNA-214表达率与胃癌患者临床病例因素的相关性 胃癌患者中男性患者的microRNA-214表达率要比女性患者的要低(P<0.05)，<60岁的胃癌患者要比>60岁的患者的microRNA-214表达率要明显低(P<0.05)；肿块大小<5 cm的胃癌患者的microRNA-214表达率要比肿块大小>5 cm的胃癌患者的表达率要明显偏低(P<0.05)；分化程度呈高、中分化的胃癌患者的microRNA-214表达率要比分化程度呈低、未分化的含量要明显偏低(P<0.05)。见表4。

表4 microRNA-214表达率与胃癌患者临床 病例因素的相关性

讨 论

随着社会的不断进步，工业发展越来越快，环境污染越来越严重，最后导致癌症的发病率越来越高[11]。该病症在早期时症状不明显，因此常规的检测并不能及时诊断出。这也就导致了患者病情的延误，错过了最佳治疗时间，导致癌症的病死率增加。该种病症后期会出现病情转移的现象，这就更加加大了临床诊断的困难性。胃癌症要尽早治疗，治疗时间越早，患者的身体恢复情况就越好，对细胞表面糖蛋白的寡糖的改变引起细胞的粘附和迁移行为的显著变化。在编码蛋白的活性的增加可能与侵袭性恶性肿瘤的进展相关[12]。

随着胃癌表达率发病率越来越高，胃癌组织中microRNA-214和MGAT5的表达的研究迫在眉睫，该文章就随机选取2015年6月至2017年6月在我院治疗的80例患胃癌的患者探究胃癌组织中microRNA-214和MGAT5的表达及预后的相关性分析。据研究表明，胃癌患者在治疗过程中microRNA-214和MGAT5的表达不同。患者胃癌组织中的microRNA-214和MGAT5表达率要比患者胃黏膜组织中的microRNA-214和MGAT5表达率要明显高。

肿瘤细胞在患者体内不断地快速增长，体内的血管中的血液运输的营养已经不能维持肿瘤细胞的生长，因此，肿瘤细胞会诱导产生新的肿瘤血管，增加血管中血液运输的速率，为肿瘤细胞提供更多的营养，促进其的生长与浸润。在肿瘤细胞生长过程中，会有淋巴液在身体中移动，进而加快肿瘤细胞的快速转移，以便获取更多的营养物质供自己生长。MGAT5含量的变化与患者身体内的许多病理以及生理变化有关系，当细胞迁移、细胞分化、细胞增殖以及肿瘤的形成时人体内的MGAT5含量会发生相应的变化。在胃癌中出现淋巴结转移的患者的microRNA-214和MGAT5的表达率明显高于未出现淋巴结转移的患者，Ⅲ、Ⅳ期的microRNA-214和MGAT5表达率明显高于Ⅰ期、Ⅱ期患者；细胞表面的糖蛋白会参与肿瘤的一系列过程，在肿瘤发展的不同阶段，患者体内的MGAT5水平会明显不同。MGAT5在人体内的含量与各种病理与生理的过程有关系，例如：细胞分化、细胞的迁移、细胞的增殖以及肿瘤的形成这些过程。MGAT5的改变可以对肿瘤细胞之间的相互作用有一定的调节作用，对肿瘤细胞的运动有一定的促进作用。MGAT5是一种高尔基体糖基转移酶和Ⅱ型跨膜糖蛋白，可以决定复杂型糖链结构。对于蛋白质翻译之后的蛋白质的修饰起着一定的作用。

近年来，随着社会的高速发展，人们的饮食越来越不规律，消化系统的疾病的发病率越来越高，胃癌的发病率在消化系统癌症中越来越高，严重影响了患者的生活质量。胃癌极高的发病率不仅仅危害患者的生命健康，而且对于患者的家庭也带来了沉重的经济和精神负担[13]。 MicroRNAs 是近些年来出现的一种非蛋白质编码 RNAs ，该种物质可以准确的了解到肿瘤的发现进程，为临床上肿瘤的研究开拓了新的途径，成熟的 microRNA 具有调节基因的表达活性的功能。据数据显示， miRNA 的表达水平在不同种类的肿瘤中是不相同的它们会在体内起到抑癌基因和原癌基因的作用。据相应的数据表明， microRNA-214与肿瘤有些密切的联系。microRNA-214可以通过和PTEN 的 3 ’ - 非翻译端结合， 与下调 PTEN 蛋白表达，活化 Akt 通路可以用来诱导细胞继续存活，进而产生顺铂的耐药性[14]。

据相应数据统计可以得到，microRNA-214 该种物质在乳腺癌组织中表达极高，与肿瘤细胞的侵袭性有着密切的联系。microRNA-214在患者体内起到调控的作用，调控患者体内肿瘤细胞。但是目前对于该种物质在胃癌组织中的机理还不太明确，初步研究发现与患者的性别、年龄、肿块的大小、分化的程度有关系。男性胃癌患者的microRNA-214和MGAT5表达率明显低于女性患者；在年龄方面，<60岁的胃癌患者要比>60岁的患者的microRNA-214和MGAT5表达率要明显低，肿块<5cm的胃癌患者的microRNA-214和MGAT5表达率要比肿块>5cm的胃癌患者要明显偏低，分化程度呈高、中分化的胃癌患者的microRNA-214和MGAT5表达率要比分化程度呈低分化的要明显偏低[15]。该实验运用了免疫组化方法，对胃癌患者体内的胃癌组织以及胃黏膜组织进行测定，进而分析microRNA-214与临床病理因素的关系，了解microRNA-214胃癌组织中的表达与哪种因素存在关系。进而应用到临床中，通过调节人体中microRNA-214的水平来达到抑制胃癌的发生。

综上所述，microRNA-214和MGAT5在胃癌组织中高表达，能够预测胃癌的发展、发生以及预后，在临床诊断和治疗过程中会起到一定的预示作用。