刺五加多糖的功能研究及其对荷瘤小鼠的抗肿瘤作用分析

林昌岫 金成华 黄京华

【摘 要】目的：刺五加多糖（ASPS）对Lewis荷瘤小鼠抗肿瘤免疫调节作用及机制的研究；方法：采用C57BL/6模式标准建立Lewis实体瘤模型小鼠80只，随机分为生理盐水组，ASPS高、中、低浓度组，在灌药28天后进行瘤体称重，检测TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平情况；结果：ASPS较生理盐水可显著抑制荷瘤小鼠肿瘤重量，随着药物浓度的增大，肿瘤重量也越小，组间差异具有统计学意义，P<0.05；ASPS较生理盐水可显著升高TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平，随着药物浓度的增大，其水平也越高，组间差异具有统计学意义，P<0.05。结论：刺五加多糖可显著抑制Lewis荷瘤小鼠瘤体大小，提高其免疫功能，值得临床进一步研究。

【关键词】 刺五加多糖；Lewis；荷瘤小鼠；抗肿瘤；免疫调节；机制研究

【中图分类号】R365 【文献标志码】A 【文章编号】1005-0019（2018）17-073-02

肺癌是临床上较为常见的恶性肿瘤，5年生存率较低，抗化疗药物治疗副作用大，易耐药，而中药在抗肿瘤方面具有其独特的优势。刺五加具有益气健脾、安神、通络等功能[1-3]。刺五加多糖是刺五加提取的免疫活性物质，具有抗肿瘤的功效。本研究探讨刺五加多糖对Lewis荷瘤小鼠抗肿瘤免疫调节作用及机制的研究，现汇报如下.

1 资料与方法

1.1 试剂与动物 采用C57BL/6模式标准建立Lewis实体瘤模型小鼠80只，随机分为生理盐水组，ASPS高、中、低浓度组，在灌药28天后进行瘤体称重。ASPS（购自陕西慈缘生物技术有限公司） 纯度85%；无菌生理盐水备用；采用ELISA 检测TNF-α、IL-1β 和 IL-6，试剂盒购自上海普欣生物科技技术有限公司。C57BL /6 小鼠80只，7-8 周龄，体重（18.4±2.7） g， 购自上海实验动物中心。Lewis鼠源性肺腺癌细胞株购自凯学生物科技（上海）有限公司。

1.2 方法

1.2.1 Lewis 实体型荷瘤小鼠构建 Lewis 肺癌细胞株扩大培养，对数期生长Lewis细胞，稀释成106 个 /ml 细胞悬液，接种小鼠右侧腋窝下0. 2 ml 。接种一周后肿瘤平均直径5mm 造模成功。

1.2.2 模型动物 80只Lewis 荷瘤小鼠随机分成4 组，分为生理盐水组、ASPS 低剂量50mg /（ kg·d）、中剂量100 mg /（ kg·d）、高剂量[200 mg /（ kg·d） ]。接种 Lewis细胞后次日开始灌胃，每天观察小鼠毛色、食欲、活动等。连续给药28天后，称量小鼠体重，剥离肿瘤，分离及提取组织液并采用ELISA 检测TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平[4]。

1.3 统计学分析 采用SPSS20.0软件录入数据并进行分析，符合正态分布的计量资料用均数±标准差表示，组间比较分析采用t检验，P<0.05判断差异有统计学意义。

2 结果

2.1 ASPS对Lewis荷瘤小鼠肿瘤重量、相关免疫调节因子水平的情况 ASPS较生理盐水可显著抑制荷瘤小鼠肿瘤重量，随着药物浓度的增大，肿瘤重量也越小，组间差异具有统计学意义，P<0.05；ASPS較生理盐水可显著升高TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平，随着药物浓度的增大，其水平也越高，组间差异具有统计学意义，P<0.05。

3 讨论

刺五加为是一味珍贵的中国传统中药，属于五加科类植物用药[5]。《本草纲目》具有益气健脾、补肾、通经络的疗效，其主要有效活性成分ASPS具有较为广泛的抗肿瘤、调节免疫功能、抗氧化等功能，分为水溶性及碱溶性多糖，在抑制肿瘤增殖、转移方面具有一定的效果。相关研究也提示[6]，ASPS 可激活 NK、巨噬细胞，调节T、B细胞的功能，增强巨噬细胞系统的吞噬功能， 增加荷瘤小鼠巨噬细胞数量。而目前关于ASPS在Lewis荷瘤小鼠抗肿瘤及免疫功能的相关研究报答则较少。

本研究观察ASPS对Lewis荷瘤小鼠抗肿瘤免疫调节作用及机制的研究。其结果显示：ASPS较生理盐水可显著抑制荷瘤小鼠肿瘤重量，随着药物浓度的增大，肿瘤重量也越小，组间差异具有统计学意义，P<0.05；ASPS较生理盐水可显著升高TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平，随着药物浓度的增大，其水平也越高，组间差异具有统计学意义，P<0.05。因此，刺五加多糖可显著抑制Lewis荷瘤小鼠瘤体大小，提高其免疫功能。本研究发现ASPS可显著抑制小鼠瘤体大小，随着药物浓度的增大，抑制越大，这可能与其上调 Bax、p53功能，促进瘤体细胞的凋亡，抑制细胞的增殖。同时也发现，ASPS可显著提高TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平，可增强免疫功能，抑制瘤体细胞的增殖。TNF-α可直接杀灭肿瘤细胞，由单核巨噬细胞分泌，IL-1β、IL-6可调节B、T细胞的增殖，促进体内杀伤细胞的分化及增殖[7-8]。

综上所述，刺五加多糖可显著抑制Lewis荷瘤小鼠瘤体大小，提高其免疫功能，值得临床研究。

参考文献

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[2] 白雪，胡文忠，姜爱丽，等.刺五加主要活性物质及其药理作用的研究进展[J].食品工业科技，2016，37（06）：396-399.

[3] 杨侃侃，边连全，刘显军，等.刺五加多糖的生理功能及在动物生产上的作用[J].中国畜牧兽医，2013，40（03）：237-241.

[4] 朱振鹏，孙晓先，杨彪.刺五加多糖的生物学功能及其在畜禽生产中的应用[J].饲料与畜牧，2013（11）：30-33.

[5] 周丽菁，龙婷婷，周星，等.刺五加多糖对Lewis荷瘤小鼠抗肿瘤免疫调节作用及机制的研究[J].中国免疫学杂志，2017，33（06）：849-853+858.

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