老年急性心肌梗死患者血浆miRNA-423-5p水平与心室重构及预后的相关性

叶 明 方 燕

(宁波市医疗中心李惠利医院，浙江 宁波 315040)

急性心肌梗死(AMI)为心血管疾病中死亡率不断增加的主要原因〔1〕。多项研究显示，AMI后各种严重并发症的病理生理学基础均在于心室的重构，心室重构是导致患者心力衰竭及不良预后的主要原因，而心室重构与多种因素有关〔2,3〕。微小RNA(miRNA)是近年来发现的一组内源性高度保守的非编码单链RNA，其在细胞核内生成，由20～22个核糖核苷酸所组成，可调控上游基因的表达及下游蛋白的翻译过程〔4〕。目前miRNA已经成为医学研究的热点之一，近年学者研究显示，miRNA可能与AMI的发生发展密切相关〔5〕。本研究探讨老年AMI患者血浆miRNA-423-5p水平与心室重构及预后的相关性。

1 资料与方法

1.1临床资料 选择2015年3月至2016年1月宁波市医疗中心李惠利医院收治的急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者143例作为AMI组，男86例，女57例，年龄60～86〔平均(68.31±3.72)〕岁。此外，选择同期在院收治的稳定型心绞痛(SAP)患者60例作为对照组，男39例，女21例，年龄60～83〔平均(67.92±5.24)〕岁。经比较，两组受试者性别、年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经我院伦理委员会批准。

1.2纳入与排除标准 纳入标准：①AMI患者均符合《急性心肌梗死诊断和治疗指南》中相关诊断标准〔6〕；②AMI患者均在发病12 h内成功接受经皮冠状动脉介入术(PCI)；③患者自愿签署知情同意书。排除标准：①合并严重肝、肾功能障碍、血液疾病、感染、外伤、脑卒中、外伤或其他严重疾病者；②近期应用激素患者。

1.3治疗及随访 AMI患者入院后均按照AMI诊疗指南给予抗凝、强化降脂、抑制血小板聚集及改善心肌缺血等治疗，并给予患者PCI治疗。PCI术后给予患者规范化阿司匹林、氯吡格雷治疗，并继续使用他汀类降脂药物、β受体阻滞剂及血管紧张转换酶抑制剂等。患者出院后通过门诊、电话等形式随访12个月，记录AMI患者新发主要心脏不良事件(MACE)发生情况，包括死亡、缺血性心绞痛发作、恶性心律失常、再梗死、急性心力衰竭等。

1.4检测方法

1.4.1血浆miRNA-423-5p检测及分组 外周血浆miRNA-423-5p表达检测采用实时荧光定量PCR法(qRT-RCP)进行检测，提取外周血浆中总RNA，进行反转录，然后使用qRT-RCP法测定miRNA-423-5p表达水平。每个样本作3个复孔，并设置阴性对照，阴性对照孔采用RNase-H2O代替。选择U6A+U6B snRNA作为内参。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆miRNA-423-5p对AMI诊断价值，并计算最佳阈值，低于最佳阈值者作为低表达组，高于最佳阈值者作为高表达组。

1.4.2心室重构指标检测 分别于PCI术后7 d及6个月后采用美国Philips iE33型彩色多普勒超声心动图仪检测患者心室重构相关指标，检测探头频率为1.7～3.4 MHz。检测指标包括左室舒张末期内径(LVEDd)、左室舒张末期容积(LVEDV)、左室收缩末期容积(LVESV)及左室射血分数(LVEF)。

1.5统计学方法 采用SPSS22.0统计学软件进行t及χ2检验，采用ROC曲线分析血浆miRNA-423-5p对AMI诊断价值；相关性采用Spearman相关性分析；采用Kaplan-Meier生存曲线分析不同miRNA-423-5p表达患者无新发MACE生存情况，终点事件为新发MACE，组间生存曲线比较采用Log-rank检验。

2 结 果

2.1ROC曲线分析血浆miRNA-423-5p对AMI诊断价值 AMI组血浆miRNA-423-5p相对表达量显著高于对照组(0.57±0.21 vs 0.31±0.19；t=8.272，P<0.05)。ROC曲线分析血浆miRNA-423-5p对AMI诊断价值，ROC曲线下面积为0.836，见图1。根据ROC曲线，血浆miRNA-423-5p最佳阈值为0.39，将miRNA-423-5p相对表达量≤0.39的AMI患者86例作为低表达组，将miRNA-423-5p相对表达量>0.39的AMI患者57例作为高表达组。

2.2miRNA-423-5p不同表达AMI患者PCI术后心室重构指标比较 PCI术后7 d不同表达AMI组患者心室重构指标均无显著差异(P>0.05)，术后6个月低表达组AMI患者心室重构指标与PCI术后7 d比较无明显变化(P>0.05)，而高表达组LVEDd、LVEDV、LVESV水平较PCI术后7 d显著升高(P<0.05)，LVEF显著降低(P<0.05)，且与高表达组比较，低表达组LEVEDd、LVEDV、LVESV水平明显降低、LVEF明显升高(均P<0.05)。见表1。

图1 ROC曲线分析血浆miRNA-423-5p对AMI诊断价值

组别nLVEDd(mm)术后7 d术后6个月LVEDV(ml)术后7 d术后6个月LVESV(ml)术后7 d术后6个月LVEF(%)术后7 d术后6个月低表达组8650.83±1.2851.02±1.641)121.65±10.94123.18±8.381)55.48±7.8556.17±9.361)48.75±2.2048.12±2.841)t/P值0.847/>0.051.030/>0.050.524/>0.051.626/>0.05高表达组5751.26±1.9254.01±1.67120.74±7.32134.87±9.6454.63±5.9459.84±6.4848.02±1.9346.24±2.03t/P值10.022/<0.0510.826/<0.055.496/<0.055.893/<0.05

与高表达组同时点比较：1)P<0.05

2.3AMI患者miRNA-423-5p水平与心室重构指标的相关性 AMI患者血浆miRNA-423-5p水平与LVEDd、LVEDV及LVESV呈显著正相关(r=0.417,0.328,0.376,均P<0.05)，与LVEF呈显著负相关(r=-0.359,P<0.05)。

2.4血浆miRNA-423-5p不同表达组AMI患者随访无新发MACE事件生存率比较 低表达组无新发MACE事件生存情况显著优于高表达组(χ2=7.260，P=0.007)，见图2。

图2 低表达组与高表达组患者无新发MACE事件生存情况比较

3 讨 论

AMI是临床上常见的一种严重威胁人类健康与生命安全的急症，患者心肌梗死后左室重构对心室功能状态及生存预后有着重要影响，成为目前心血管领域研究中的重要内容〔7〕。目前临床AMI诊断的主要血清生物标志物包括肌钙蛋白、肌红蛋白及肌酸激酶同工酶等，虽然上述血清生物标志物已经在AMI的早期诊断敏感性及特异性上达到一定水平，但研究者对致力于高敏感性及高特异性的新型血清标志物，尤其针对能够有效反映AMI患者预后的良好血清标志物〔8,9〕。数十年来发现的非编码RNA-MicroRNA(miRNA)与多种疾病的发生、发展、预后均有密切的联系，miRNA表达不仅有着良好的组织特异性且其在血液中有着较高的稳定性，因此学者提出可将miRNA作为理想的生物学指标用于AMI的早期诊断、心室重构及临床预后分析〔10,11〕。

目前国内外研究报道显示，miRNA-423-5p在急性心力衰竭及AMI患者中均有显著表达，与心肌的损伤之间具有密切的联系，因此认为miRNA-423-5p可能成为AMI诊断及预后判断的重要生物学指标〔12,13〕。本研究结果显示，AMI患者血浆miRNA-423-5p相对表达量显著高于对照组，诊断价值ROC曲线下面积为0.836。与学者报道结果相似〔14,15〕，提示血浆miRNA-423-5p水平与AMI密切相关，对AMI临床诊断具有一定的应用价值，是临床潜在标志物之一。

本研究分析不同AMI患者血浆miRNA-423-5p表达与治疗后心室重构之间的关系，结果显示，血浆miRNA-423-5p水平与AMI患者心室重构之间具有密切的联系，高表达miRNA-423-5p患者心室重构发生情况较为严重，提示miRNA-423-5p可作为AMI患者PCI术后心室重构预测的一个重要生物学指标〔16,17〕。此外，本文分析临床预后情况结果表明miRNA-423-5p表达与不良心血管事件发生有一定联系。学者推测循环miRNA-423-5p可能来源于缺血坏死心肌细胞的释放，因此患者外周血miRNA-423-5p表达越高，提示心肌缺血坏死越严重且心室重构进展越迅速，从而影响患者临床预后〔18～20〕。