鸡蛋组分蛋白、半乳糖凝集素—3与过敏原IgE抗体联合检测在鸡蛋过敏患儿诊断中的价值

唐川婷

[摘要] 目的 探討鸡蛋组分蛋白、半乳糖凝集素-3与过敏原IgE抗体联合检测在鸡蛋过敏患儿诊断中的价值。 方法 选择2017年2月～2018年4月在四川大学华西广安医院进行过敏反应筛查的47例食物过敏患者作为研究组，另选择同期就诊的20例无过敏史，且静脉抽血化验、鸡蛋血清特异性IgE结果为阴性者作为对照组。对两组研究对象血清鸡蛋组分蛋白、半乳糖凝集素-3与过敏原IgE抗体进行检测。 结果 根据后期随访，研究组47例疑似鸡蛋过敏患儿中有42例为鸡蛋过敏患儿，其他为误诊。研究组sIgE、总IgE水平均高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。研究组食入物IgE阳性率为91.49%，吸入物阳性率为82.98%，食入物与吸入物IgE双阳性率为70.21%。研究组患儿卵白蛋白、卵类黏蛋白、卵转铁蛋白、溶菌酶OD值均显著低于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05），且对照组OD值接近空白孔。研究组患儿半乳糖凝集素-3水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。鸡蛋组分蛋白对鸡蛋过敏患儿诊断的灵敏度、准确性、特异性分别为0.905、0.872、0.601。过敏原IgE对鸡蛋过敏患儿诊断的灵敏度、准确性、特异性分别为0.929、0.894、0.600，联合检测对鸡蛋过敏患儿诊断的灵敏度、准确性和特异性分别为0.976、0.957、0.831。 结论 鸡蛋组分蛋白、半乳糖凝集素-3与过敏原IgE抗体联合检测对鸡蛋过敏患儿诊断的灵敏度、准确性、特异性均较高，具有较高的临床应用价值。

[关键词] 鸡蛋组分蛋白；半乳糖凝集素-3；过敏原IgE；抗体；联合检测；鸡蛋过敏；诊断价值

[中图分类号] R725 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2018）11（b）-0088-04

[Abstract] Objective To investigate the value of combined detection of egg component protein， galactose agglutinin-3 and allergen IgE antibody in the diagnosis of egg allergy. Methods Forty-seven patients with food allergy who were screened in West China-Guang′an Hospital， Sichuan University from February 2017 to April 2018 were selected as study group. Another 20 patients without allergie history and negative results venous blood test and egg serum-specific IgE were selected as the control group. Serum egg component protein， galactose agglutinin-3 and allergen IgE antibody were detected in two groups. Results According to anaphase follow-up， there were 42 cases of egg allergy and the others were misdiagnosed in 47 suspected children with egg allergy. The levels of sIgE and total IgE in the study group were higher than those in the control group， the differences were statistically significant （P < 0.05）. In the study group， the positive rates of IgE and inhales were 91.49% and 82.98%， respectively. The positive rates of ingestion and inhaled IgE were 70.21%. The OD values of ovalbumin， ovomucoid， otransferrin and lysozyme in the study group were significantly lower than those in the control group， the differences were statistically significant （P < 0.05）， and the OD value of the control group was close to the blank hole. The level of galactose agglutinin-3 in the study group was significantly higher than that in the control group， the difference was statistically significant （P < 0.05）. The sensitivity， accuracy and specificity of egg component protein in the diagnosis of children with egg allergy were 0.905， 0.872， 0.601， respectively. The sensitivity， accuracy and specificity of allergen IgE in the diagnosis of children with egg allergy were 0.929， 0.894， 0.600， respectively. The sensitivity， accuracy and specificity of combined detection of egg allergy were 0.976， 0.957， 0.831， respectively. Conclusion The combined detection of egg component protein， galactose agglutinin-3 and allergen IgE antibody is of high sensitivity， accuracy and specificity in the diagnosis of egg allergy， has high value in clinical application.

[Key words] Egg component protein； Galactose agglutinin-3； Allergen IgE； Antibody； Combined detection； Egg allergy； Diagnostic value

鸡蛋是日常饮食的常见蛋白类食物，鸡蛋过敏是目前婴幼儿及儿童较为常见的一种食物过敏[1-2]。临床上，鸡蛋过敏可累及口腔黏膜、呼吸、皮肤、消化系统，部分病情严重患儿的血管也会受到不同程度的损害，部分发生严重速发型反应的患儿可引起过敏性休克、进而导致死亡[3-4]。此外，过敏还会影响婴幼儿及儿童对营养物质的吸收，进而使患儿的发育速度明显慢于正常儿童。部分对鸡蛋过敏的儿童在一段较长时期不食用鸡蛋后，再进行口服激发，可耐受，即对鸡蛋不再过敏，但仍有相当比例的儿童持续对鸡蛋过敏[5-7]。鸡蛋蛋白丰富，且研究表明其主要致敏蛋白存在于蛋清中。已见文献报道的23种糖蛋白中，有4种能与人类血清免疫球蛋白E（IgE）结合并引发过敏反应，他们分别是卵白蛋白、卵类黏蛋白、卵转铁蛋白和溶菌酶。其中卵白蛋白相对分子质量为45 000，约占鸡蛋蛋清总蛋白的54%；卵类黏蛋白的相对分子质量为28 000，约占蛋清总蛋白含量的11%；卵转铁蛋白的相对分子量为80 000，其含量约占蛋清总蛋白含量的12%；溶菌酶的相对分子量为14 000，其含量约占蛋清总蛋白含量的3.4%[8-11]。目前，临床检验鸡蛋过敏患儿的“金标准”为体外抗原（UniCap）检测血液中的特异性IgE，但该方法尚不能有效鉴别过敏儿童是否已进展为鸡蛋耐受。在此背景下，本研究旨在探讨鸡蛋组分蛋白、半乳糖凝集素-3与过敏原IgE抗体联合检测在鸡蛋过敏患儿诊断中的价值，为临床对鸡蛋过敏患儿进行准确诊断提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2017年2月～2018年4月在四川大学华西广安医院（以下简称“我院”）进行过敏反应筛查的食物过敏患者作为研究对象，根据患儿病史、静脉抽血化验、鸡蛋特异性IgE检测结果，以及食物排除方法，筛选47例对鸡蛋过敏且无其他疾病患者作为研究组，其中有男29例，女18例；年龄1个月～10岁，平均（3.42±0.41）岁；临床症状可见过敏性休克、特异性皮炎、慢性荨麻疹、轻度皮炎伴搔痒、过敏性哮喘、过敏性鼻炎、变应性咳嗽。另选择我院同期就诊的20例无过敏史，且静脉抽血化验、鸡蛋血清特异性IgE结果为阴性者作为对照组，其中男13例，女7例；年龄1个月～10岁，平均（3.51±0.43）岁。两组患儿性别、年龄等一般资料差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。本研究方案经我院医学伦理委员会批准，参与研究者及患者家属均签署知情同意书。研究组对象均为经病史、静脉抽血化验、鸡蛋特异性IgE检测确诊为疑似鸡蛋过敏患者，且排除其他疾病；对照组入组对象均排除鸡蛋过敏可能，且不伴有其他疾病。

1.2设备与试剂

全自动过敏原膜条操作仪（北京海瑞祥天生物科技有限公司，J121220061），过敏原IgE抗体检测试剂盒（7项吸入物，20150712；7项食入物，20161102），购自杭州浙大迪迅生物基因工程有限公司。

1.3 检测方法

1.3.1 过敏原IgE检测 采集两组患儿空腹静脉血，室温静置30 min，使用80-2电动离心机（常州翔天实验仪器厂）离心分离血清，放置于-20℃保存，进行集中检测，应用酶联免疫吸附法对所采集标本同时检测食入物、吸入物过敏原sIgE抗体，总IgE抗体，7项食入物包括蛋清/蛋黄、牛奶、鳕鱼/蛙鱼/鲈鱼、虾/蟹/扇贝、牛肉/羊肉、芒果、花生，7项吸入物包括屋尘螨/粉尘螨、屋尘、柏树、豚草、点青霉、猫/狗毛皮屑、虫类/飞蛾和蜜蜂。所有实验操作均严格按照试剂盒操作说明书进行，结果使用过敏原膜条判读软件系统进行判读。

1.3.2 鸡蛋组分蛋白检测 采用酶联免疫吸附法检测患者血清中卵白蛋白、卵类黏蛋白、卵转铁蛋白、溶菌酶含量，在450 nm处测定OD值。

1.3.3 半乳糖凝集素-3水平测定 采用酶联免疫吸附法检测血清中半乳糖凝集素-3的含量，试剂盒购自杭州浙大迪迅生物基因工程有限公司，所有操作严格按照说明书进行。

1.4 结果判定

1.4.1 过敏原IgE结果判定 食入物、吸入物过敏原sIgE抗体≥0.35 U/mL即可判定为阳性，<0.35 U/mL则为阴性。年龄<3岁的患者，总IgE≥20 U/mL为阳性；年龄3～<6岁的患者，总IgE≥35 U/mL为阳性；年龄6～20岁时，总IgE≥51 U/mL则可判定为阳性，反之则判定为阴性[12]。

1.4.2 血清半乳糖凝集素-3结果判定 参考相关文献[13]，当血清半乳糖凝集素-3水平≥5 ng/mL时即为阳性，反之则为阴性。

1.4.3 诊断效能判断 根据资料性质，以四格表进行相关性诊断评价。以实验室检测指标结合后期随访最终确诊结果为“金标准”，敏感度=真阳性/（真阳性+假阴性）×100%，准确度=（真阳性+真阴性）/总例数×100%，特异度=真阴性/（假阳性+真阴性）×100%。

1.5 统计学方法

采用SPSS 22.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组过敏原IgE水平及IgE阳性率分析

根据后期随访，研究组47例疑似鸡蛋過敏患儿中有42例为鸡蛋过敏患儿，其他为误诊。研究组sIgE、总IgE水平均高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05），见表1。研究组食入物IgE阳性率为91.49%，吸入物阳性率为82.98%，食入物与吸入物IgE双阳性率为70.21%。

2.2 两组鸡蛋组分蛋白、半乳糖凝集素-3水平比较

研究组患儿卵白蛋白、卵类黏蛋白、卵转铁蛋白、溶菌酶的OD值均显著低于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05），且对照组各项指标的OD值接近空白。研究组患儿半乳糖凝集素-3水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。见表2。

2.3不同诊断方法对鸡蛋过敏患儿的诊断结果

以鸡蛋组分蛋白诊断的40例鸡蛋过敏患儿中有2例为阴性，以过敏原IgE诊断的41例鸡蛋过敏患儿中有2例为阴性，联合检测诊断的42例鸡蛋过敏患儿中有1例为阴性，见表3。由表4可以得出联合检测诊断的灵敏度、准确性和特异性均最高。

3讨论

食物过敏是临床常见的过敏性疾病之一，临床调查显示，在发达国家约有1/3的儿童至少有1次食物过敏史经历。根据报告，美国每年约发生超过30 000例次食物引起的严重过敏反应，其中约有150例会因此而失去生命。鸡蛋营养价值高，在日常食物中占有一定的比例，因此在众多食物过敏中有着特殊的地位和意义。作为一种常见的食物过敏原，鸡蛋不仅是各类蛋白制品的来源，而且也作为多种副食的添加辅料，除此之外，蛋清还是绝大多数婴幼儿疾病疫苗培养基的主要成分。当鸡蛋过敏患儿摄入以上制品时，可引起呼吸、皮肤以及消化系统过敏症状，部分患儿甚至出现多系统过敏性症状及过敏性休克。鸡蛋过敏不仅对患儿的营养吸收功能和生长发育产生影响，且由于患儿进食障碍可引起父母及其他监护人心理焦虑，对整个家庭的生活也会产生不同程度的影响。临床对鸡蛋过敏患儿的诊断目前主要依靠血清过敏性IgE抗体水平，但临床实践发现其诊断存在一定的误诊率，因此寻找一种高灵敏度、高准确性、高特异性的诊断鸡蛋过敏患儿的方法具有重要意义。在此背景下，本研究旨在探讨鸡蛋组分蛋白、半乳糖凝集素-3與过敏原IgE抗体联合检测在鸡蛋过敏患儿诊断中的价值。

有研究表明，在鸡蛋过敏患者体内，血清半乳糖-3凝集素表达水平明显高于健康人群，且其表达水平与鸡蛋特异性IgE含量呈显著正相关[14-16]。对于临床表现为过敏性哮喘、过敏性鼻炎以及慢性荨麻疹的鸡蛋过敏患者，其血清中的半乳糖凝集素-3水平也明显升高。因此，目前临床认为血清半乳糖凝集素-3水平可在一定程度上反映鸡蛋过敏的程度[15-16]。本研究结果也显示，研究组患儿半乳糖凝集素-3水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。此外，鸡蛋组分蛋白是目前公认的蛋清过敏原，主要有4类，分别为卵类黏蛋白、卵白蛋白、卵转铁蛋白和溶菌酶。有研究表明临床鸡蛋过敏患者体内以卵类黏蛋白、卵白蛋白阳性居多[17-18]。本研究结果显示，研究组患儿卵白蛋白、卵类黏蛋白、卵转铁蛋白、溶菌酶的OD值均显著低于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05），且对照组OD值接近空白，上述结果提示鸡蛋组分蛋白可作为诊断鸡蛋过敏患儿的一个指标。

本研究分别分析了鸡蛋组分蛋白、半乳糖凝集素-3及过敏原IgE抗体对鸡蛋过敏患儿的诊断价值，结果显示，以鸡蛋组分蛋白诊断的40例鸡蛋过敏患儿中有2例为阴性，以过敏原IgE诊断的41例鸡蛋过敏患儿中有2例为阴性，联合检测诊断的42例鸡蛋过敏患儿中有1例为阴性。鸡蛋组分蛋白对鸡蛋过敏患儿诊断的灵敏度、准确性、特异性分别为0.905、0.872、0.601。过敏原IgE对鸡蛋过敏患儿诊断的灵敏度、准确性、特异性分别为0.929、0.894、0.600，联合检测对鸡蛋过敏患儿诊断的灵敏度、准确性和特异性分别为0.976、0.957、0.831。从上述结果可以看出，联合检测对鸡蛋过敏患儿诊断具有较高的准确性和特异性。

综上所述，可以得出结论：鸡蛋组分蛋白、半乳糖凝集素-3与过敏原IgE抗体联合检测对鸡蛋过敏患儿诊断的灵敏度、准确性、特异性均较高，具有较高的临床应用价值。

[参考文献]

[1] 杨珍，陈同辛，周纬.上海地区720例特应质儿童食物过敏临床分析[J].临床儿科杂志，2009，27（5）：458-461.

[2] 王丽，程茜.儿童食物过敏现状及影响因素分析[J].中国全科医学，2009，12（16）：1484-1485，1498.

[3] 中华医学会儿科学分会儿童保健学组，《中华儿科杂志》编辑委员会.婴幼儿食物过敏诊治建议[J].中华儿科杂志，2011，62（49）：344-348.

[4] Finkelman FD，Khodoun MV，Strait R. Human IgE-independent systemic anaphylaxis [J]. J Allergy Clin Immunol，2016，137（6）：1674-1680.

[5] 孙晋波，李在玲.白细胞介素10在儿童食物过敏和口服免疫耐受中的作用[J].中国实用儿科杂志，2012，27（12）：946-949.

[6] 周雪莲，赵晓东.特异性口服免疫耐受治疗食物过敏的研究进展[J].世界华人消化杂志，2012，20（16）：1433-1438.

[7] 江米足，舒小莉，刘梅，等.儿童食物过敏[J].世界华人消化杂志，2012，20（16）：1415.

[8] 刘珂，熊丽姬，高金燕，等.加工对鸡蛋中四种主要过敏原结构的影响[J/OL].食品科学，2012，33（2）：1-11.

[9] 罗燕，佟平，彭婷婷，等.三种蛋清过敏原蛋白的活性及其活性肽的研究进展[J].食品工业科技，2015，36（20）：396-399.

[10] 肖娜，刘育颖，刘熙文，等.鸡蛋过敏原表位研究进展[J].食品工业科技，2016，37（3）：394-399.

[11] 王丽娟，吴子健，刘露，等.鸡卵类黏蛋白过敏原性的在体与离体实验[J].食品科学，2018，39（5）：247-251.

[12] 邓兆享，徐龙.过敏原IgE抗体检测在儿童常见过敏性疾病中的临床意义[J].中国热带医学，2015，15（6）：730-733.

[13] 张书辰，杨林，胡林涛，等.鸡蛋过敏患者外周血清中半乳糖凝集素-3的表达及与鸡蛋特异性IgE的相关性[J].中国医药导报，2018，15（1）：64-67.

[14] Bambouskova M，Polakovicova I，Halova I，et al. New regulatory roles of Galectin-3 in high-affinity IgE receptor signaling [J]. Mol Cell Biol，2016，36（9）：1366-1382.

[15] 张书辰，杨林，胡林涛，等.鸡蛋过敏患者外周血清中半乳糖凝集素-3的表達及与鸡蛋特异性IgE的相关性[J].中国医药导报，2018，39（1）：64-67.

[16] 孙利强，陈杰，李恩，等.急性冠脉综合征患者血清半乳糖凝集素-3和C反应蛋白水平的变化[J].郑州大学学报：医学版，2014，49（3）：397-400.

[17] Saccon F，Gatto M，Ghirardello A，et al. Role of Galectin-3 in autoimmune and non-autoimmune nephropathies [J]. Autoimmun Rev，2017，16（1）：34-47.

[18] Riccio AM，Mauri P，Ferrari LD，et al. Galectin-3：An early predictive biomarker of modulation of airway remodeling in patients with severe asthma treated with omalizumab for 36 months [J]. Clin Transl Allergy，2017， 7（1）：6.

[19] 张书辰，祝戎飞，杨林，等.鸡蛋组分蛋白对临床诊断儿童鸡蛋过敏的价值[J].中华临床免疫和变态反应杂志，2017，11（2）：149-155.

[20] Zimmer J，Vieths S，Kaul S. Standardization and regulation of allergen products in the European Union [J]. Curr Allergy Asthma Rep，2016，16（3）：21.

（收稿日期：2018-06-06 本文编辑：任 念）