辐射对伊立替康的体内代谢影响※

乔一杰，杨建鑫，杨 梦，周雪姣，辛元尧，年永琼，朱 琳，李向阳*

(1.青海大学医学院，青海 西宁 810016；2.青海大学生态环境工程学院，青海 西宁 810016)

辐射在造福人类的同时，对人们的健康也带来了不同程度的损害。在辐射条件下，研究药物代谢的特点，以及如何对受辐射人群进行合理有效的用药将是未来研究的热点。

辐射影响药物代谢的研究虽在CYP450酶及其相关药物方面取得一定的研究成果，但目前仍处于探索阶段，存在很大的研究空间[1]。本研究采用HPLC法测定大鼠体内伊立替康(Irinotecan，CPT-11)血浆药物浓度，并对其药代动力学参数特点进行初步研究，探讨CPT-11的生物体内代谢特征，为其临床应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

SD大鼠[合格证号：SCXK(甘)2017-0501]12只，雌雄各半，体重(200±20)g，饲养于青海大学动物实验中心(23℃±2℃，光照明暗12h交替)，实验前一天禁食。

1.2 仪器与试剂

1.2.1 仪器

Agilent 1200高效液相色谱仪和色谱工作站(美国Aglient)；Sartorius电子分析天平(德国赛多利斯科学仪器公司)；23EX医用电子直线加速器(美国VaRian)；TGL-16B高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器)；BT224S电子秤(上海医大仪器厂)；低速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)；常低温冰箱(Thermo，美国)；XW-80A漩涡混合器(上海医大仪器厂)；KQ-250DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；YDS-30东亚液氮容器(乐山市东亚机电工贸有限公司)。

1.2.2 药品和试剂

注射用盐酸伊立替康(批号：17011012，纯度>98%，山东齐鲁制药)；盐酸伊立替康对照品(批号：100737-2017102，北京百灵威科技有限公司)；甲醇(批号：2016083104，色谱纯，山东禹王实业有限公司)；磷酸氢二钾、高氯酸、DEPC水(分析纯，天津市百世化工有限公司)。

1.3 试验方法

1.3.1 动物分组及给药

大鼠分为对照组和实验组(X射线一次性全身照射后24h)，每组6只，雌雄各半。实验组按人体每天伊立替康注射剂量350 mg·m-2换算，大鼠注射盐酸伊立替康的剂量为30 mg·kg-1，通过股静脉一次性给药。

1.3.2 大鼠辐射造模

用自制的模具将实验组大鼠整齐地排列在电子加速器视野中央(视野为40cm×40cm)，源皮距100 cm。辐射的吸收剂量率为300 cGy·min-1，照射剂量为1 Gy。

1.3.3 样品采集

对照组和实验组大鼠给药后经股静脉注射CPT-11。从眼眶静脉取血，分别取2、5、15、30、60、180、360、600、960、1440 min时的全血约300 μL于涂有EDTA抗凝剂的离心管中。

1.3.4 样品预处理

全血离心(4000r·min-1)10 min后，吸取上清液置于新的离心管中。加入25%高氯酸50 μL，离心(16000r·min-1)10 min，吸取上清液，待进样检测。

1.3.5 色谱条件设立

2 结果

2.1 血药浓度-时间曲线图

对照组和实验组CPT-11的血药浓度-时间曲线图见图1。

图1对照组和实验组CPT-11的血药浓度-时间图(n=6，μg·mL-1)

Figure1PlasmaDrugConcentration-TimeCurveofCPT-11inControlandExperimentalGroup(n= 6，μg·mL-1)

表1CPT-11的药代动力学参数(n=6)

Table 1Pharmacokinetics Parameters of CPT-11(n=6)

*：与对照组比较，P<0.05；**：与对照组比较，P<0.01.

2.2 药代动力学参数

使用DAS2.0软件计算药代动力学参数，对照组和实验组CPT-11的药代动力学参数见表1。

结果表明，与对照组比较，实验组的AUC(0-t)显著降低15.59 %，AUC(0-∞)显著降低10.82%。AUMC(0-t)、AUMC(0-∞)、MRT(0-t)、K也有所下降，但无统计学意义。MRT(0-∞)、t1/2、CL、V略微升高。该结果提示X射线辐射后，CPT-11的体内吸收减少。

3 讨论

本实验采用X射线对大鼠一次性全身照射造模，文献大多采用钴60进行辐射模型的制备。医用直线加速器由于能量范围宽、操作简便、稳定性高等特点已成为当今放射治疗的主要手段，故本实验采用医用直线加速器产生的X射线对大鼠进行造模。

本研究发现，大鼠辐射后，CPT-11的药动学参数发生了显著的改变，AUC(0-t)显著减小，MRT(0-t)和t1/2无显著差异。Hsieh等[2]利用医用直线加速器探讨了盆腔辐射对大鼠5-氟尿嘧啶药物动力学特征的影响，结果发现2 Gy的γ射线辐射使AUC和MRT分别下降22%和32%，CL升高28%，t1/2和Cmax无显著性变化，与本实验研究结果基本一致。顺铂的研究表明[3]，大鼠盆腔接收0.5 Gy和2 Gy的γ射线辐射24 h 后，血浆AUC分别升高80%和87%，t1/2分别延长77%和68%，MRT分别延长101%和89%，Cmax升高36%和32%，而CL分别降低45%和47%，与本实验研究结果相反。Hsieh等[4]也研究了腹腔辐射对大鼠5-氟尿嘧啶药物动力学特征的影响，结果发现0.5 Gy和2 Gy的γ射线辐射分别使其血浆AUC降低21%和32%，MRT分别下降14%和31%，CL分别升高36%和51%。本研究为X射线全身辐射，不同部位的辐射能否得到类似研究结果还需进一步去探讨。

Song[5]利用医用直线加速器研究了γ射线辐射对抗辐射药物18-β-甘草酸代谢动力学特征的影响，发现3 Gy的γ射线辐射小鼠24 h后，AUC和Cmax分别降低75%和54%，活性代谢物18β-甘草次酸的AUC和Cmax分别降低了70%和66%，提示γ射线辐射加快甘草酸的体内代谢。本研究采用X射线辐射研究了CPT-11的药代动力学的特征变化，结果发现，X射线辐射后，CPT-11的体内代谢加快，提示在辐射条件下特别是临床化疗和放疗同时进行时，应适当增加CPT-11的给药剂量。

由于CPT-11的代谢途径多种多样，其代谢产物除了活性产物SN-38，还有多种副产物。另外，CPT-11在动物和人体内的代谢水平略有差别，本研究实验动物为大鼠，人体能否得到相同的研究结果还有待进一步去证实。