血清半乳甘露聚糖抗原水平在真菌性鼻窦炎患者诊断中的应用价值
2018-12-12涂澄宇
涂澄宇
(南昌大学第四附属医院耳鼻喉科,江西 南昌 330003)
真菌性鼻窦炎(FRS)又称霉菌性鼻窦炎,指因患者的鼻窦黏膜组织、骨质受到真菌侵袭所引发的感染性疾病。随着临床抗生素应用病种范围的增多、使用频率与使用量的增加,使得真菌耐药性得以提高,从而导致真菌性鼻窦炎发病率呈现出逐年升高的趋势[1]。有资料显示,上颌窦真菌感染属于真菌性鼻窦炎的主要类型,同时感染病菌主要为曲霉菌[2]。在真菌性鼻窦炎患者中,CT检查病变鼻窦中钙化率仅为51%,同时非真菌性鼻窦炎也可能发生钙化,其发生率为3%左右,而当患者不存在典型的体征症状以及CT影像学特征时,为其开展检查则可能出现漏诊或误诊[3]。本次研究就选取2016年1月至2017年1月本院耳鼻喉科收治的住院患者134例,探讨真菌性鼻窦炎患者血清半乳甘露聚糖抗原水平及其临床意义,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 临床资料 选取2016年1月至2017年1月本院耳鼻喉科收治的疑似真菌性鼻窦炎住院患者134例,其中男71例,女63例,年龄18~56岁,平均年龄(41.3±5.6)岁。本次研究经医院伦理委员会批准通过。依据病理学检查可知,62例患者被确诊为真菌性鼻窦炎,将其设定为观察组;72例患者被确诊为非真菌性鼻窦炎,将其设定为对照组。纳入标准:临床资料完整;对本次研究内容知情同意。排除标准:入组前1~2天应用血液制品、真菌类制品、中药注射液以及生脉注射液进行治疗的患者;多发性骨髓瘤患者;应用半合成青霉素进行治疗的患者;真菌性肺炎及真菌性阴道炎患者;透析治疗患者;毛霉菌及隐球菌感染患者。
1.2 方法 首先采集患者的静脉血3 ml,将其置于不含添加剂的真空采血管中,对血清进行分离,每5例患者作为一个检测批次,采用试剂盒配备的血清A管、阳性对照B管、阴性对照C管和等待检测的患者血清D1~5管各300μl和100 μl血清处理液进行振荡混匀,将其置于水浴锅中进行孵育,水浴锅内温度为100℃,时间为3 min,然后放入离心机中进行离心,离心速度为每分钟12 000转,时间10 min,取上清液备用。采用辣根过氧化物酶标记的抗GM单克隆抗体EB-A2共50 μl,置入到已经完成包被的EB-A2微孔板内,采集已经完成制备的上清液50 μl,将其放入到微孔板中,对微孔板采用黏合膜进行密封;将微孔板放置在37℃环境下进行孵育,孵育时间为90 min,然后采用Tris-NaCl洗液对微孔板进行反复冲洗,冲洗次数为5次。采用200 μl含四甲基联苯胺的作用底物进行加入,将其放置在避光环境中,在室温下作用30 min,采用100 μl反应终止液进行加入。采用自动定量酶标仪(上海普科光学仪器设备有限责任公司,型号HKD5500)进行光度值测量,波长设定为450/620 nm;在开展实验的过程中,参照标准血清A值均值为0.3~0.8,阳性质控GM值超过2,阴性质控GM值低于0.4作为质控。
1.3 观察指标 比较两组GM值水平,以病理检查结果作为金标准,观察GM试验诊断真菌性鼻窦炎的敏感度、特异度、阴性预测值以及阳性预测值。GM诊断结果判定:阳性,2次GM值超过0.5或单次GM值超过0.8;阴性,GM值低于0.5[4]。敏感度为真阳性患者在总患者人数中百分比;特异度为真阴性患者在患者中的百分比;阴性预测值为真阴性患者占阴性患者中的百分比;阳性预测值为真阳性患者在阳性患者中的百分比。
1.4 统计学方法 统计学软件为SPSS 17.0,计量资料采用“±s”表示,组间比较采用t检验;计数资料用例数(n)表示,计数资料组间率(%)的比较采用χ2检验;以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组GM试验诊断结果比较 观察组阳性率高于对照组,阴性率低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),见表1。
表1 两组GM试验诊断结果比较[n(%)]Table 1 Comparison of two groups of GM diagnostic Results[n(%)]
2.2 GM试验诊断真菌性鼻窦炎的准确性 通过检测可知,GM试验诊断真菌性鼻窦炎的灵敏度为0.29(95%CI为0.12~0.44);GM试验诊断真菌性鼻窦炎的特异度为0.91(95%CI为0.82~0.96);阳性预测值为0.74(95%CI为0.50~0.97);阴性预测值为0.59(95%CI为0.46~0.72);诊断符合率为0.64(95%CI为0.52~0.75);阳性似然比为3.47;阴性似然比为0.78。
3 讨论
GM试验在对真菌性鼻窦炎进行诊断的原理是通过对曲霉菌的半乳聚糖抗原进行检测,但在真菌菌丝发生生长的过程中,曲霉菌的半乳聚糖抗原会有菌丝发生脱落,经由试剂盒所提供的抗体出现反应,所以半乳聚糖的检测结果和患者机体中所含有的真菌量呈现为正比,也可以对患者的病情严重程度进行一定反应,同时GM试验结果也可以作为临床治疗疗效的指标[5]。但GM试验检测的细菌种类主要为曲霉菌,而在对其他种类的真菌开展检测时,GM试验则可能发生假阴性[6]。本次研究结果显示,在开展病理检查后可知,本次研究中观察组的62例患者的致病菌均为曲霉菌。本次研究中观察组中GMS染色表现为阳性的患者中,其GM试验的结果与GMS染色结果相符,分析其原由,主要是由于真菌对患者机体黏膜和血管造成侵袭有关,曲霉菌抗原从菌丝发生脱落,进入到机体血液中,所以能够被有效检测。由于侵袭性真菌型鼻窦炎患者的机体受到真菌的侵袭,使得其机体黏膜和血管均遭受较大的破坏,从而导致机体血液中所含有的抗原数量众多,所以本次研究结果中观察组中只有18例患者表现为GM阳性[7]。由于在机体中,曲霉菌抗原存在周期较短,会在较短时间内被机体清除,因此当患者发生真菌球型鼻窦炎后,其机体内真菌菌丝会出现相互缠绕,从而导致实性肿物的出现,也就是真菌球,真菌在机体内主要以聚集的方式进行生长,所以曲霉菌抗原不容易从菌丝上发生脱落,因此机体血液中的曲霉菌抗原数量较少[8]。本次研究结果显示,观察组中仅44例患者表现为GM阴性。并且在对照组中,GM试验表现为阳性的患者为6例,虽然本次研究设立了严格的纳入及排除标准,对近期采用半合成青霉素进行疾病治疗的患者进行排除,但通过术后对患者进行随访可知,6例患者在日常生活中均喜爱饮用牛奶和蛋白类食物,在手术治疗后15天,为患者开展GM试验复查可知,结果均表现为阴性,通过开展鼻内镜检查可知,患者受累鼻窦具有光滑黏膜,同时未出现异常分泌物。
通过本次研究可知,GM试验的检测敏感度为0.29,特异度为0.91,阴性预测值为0.59,阳性预测值为0.74,诊断符合度为0.64。敏感度虽较低,但特异度较高,尤其是在对侵袭型真菌性鼻窦炎进行诊断时准确率极高。分析其原由,可能是由于本次研究观察组中鼻窦炎患者均为曲霉菌感染,而GM试验即对曲霉菌抗原开展检测,因此其具备较高的特异度。临床上在对真菌性鼻窦炎开展治疗时,治疗方案不会由于真菌种类不同而有所差异,因此GM检测可通过检测曲霉菌抗原而为真菌性鼻窦炎的诊断提供参考依据,从而使患者的疾病得到有效诊断。
综上所述,GM试验可作为真菌性鼻窦炎的早期诊断方法,其具备较高的特异度,值得进一步推广应用。