软枣猕猴桃组培繁殖中不定芽诱导技术研究

顾福明 沈晴 建德锋

【摘 要】 本试验以软枣猕猴桃的腋芽作为外植体，采用不同配方进行愈伤组织诱导培养，通过比较得出MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L为最佳愈伤组织诱导配方；然后将愈伤组织切块进行不定芽诱导，得出配方MS+6-BA 0.4mg/L分化率最高，所以该配方为最佳配方。

【关键词】 不定芽；软枣猕猴桃；组培

[Abstract] In this study， axillary buds of actinidia chinensis of soft date were used as explants for callus induction culture using different formulas. By comparison， MS+ 6-ba 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L were obtained as the optimal callus induction formula. Then， adventitious bud induction was performed on the cut of callus， and the formula MS+ 6-ba 0.4mg/L had the highest differentiation rate， so this formula was the best one.

[Keywords] adventitious buds； Chinese gooseberry； seed

软枣猕猴桃，猕猴桃科猕猴桃属，又称软枣子，学名Actinidia arguta （Sieb. & Zucc） Planch. ex Miq.。该植物为一高大藤本，长达30cm，叶宽卵形或椭圆形，长5-15cm，宽3-10cm，顶端突尖，基部圆形或微心形，叶缘锐锯齿，叶背面绿色；花白色，3-6朵腋生，花径2cm，花药暗紫色；果球形至椭圆形，径约2.5cm；花期6-7月，果期9-10月。软枣猕猴桃的果实可生食，具有强壮、解热、收敛之效，也可酿酒或制成果酱、果脯食用，此外，该植物也可应用于园林绿化中，作为棚架及立体绿化材料。目前苗圃中软枣猕猴桃常用的繁殖方法为扦插繁殖，但扦插繁殖会受到季节的限制，另外生根率并不高。因此本实验尝试采用组培繁殖技术进行繁殖，但在组培繁殖中，中间繁殖体的获得极为关键，该试验试以软枣猕猴桃的腋芽作为外植体，诱导其形成愈伤组织，再进一步诱导愈伤组织形成不定芽，然后以这些不定芽为中间繁殖体进行扩繁。

1 材料与方法

1.1 試验材料

该试验2018年5月～2018年9月于吉林农业科技学院花卉组培实验室进行。试验前选取生长良好、无病虫害的软枣猕猴桃植株1棵（吉林农业科技学院校园内），作为外植体采集来源母树，进行重点看护，在开始接种前，到母树上采取带腋芽茎段若干备用。

1.2 试验方法

1.2.1 培养及配方 愈伤组织诱导培养基采用4个配比，基本培养基均采用MS，其中添加不同配比的6-BA和NAA，分别记作：A1：MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1mg/L；A2：MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L；A3：MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.1mg/L；A4：MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L。不定芽诱导培养基设置5个配方，采用在MS基本培养基中添加不同配比的6-BA，分别记作：J1：MS+6-BA 0.2 mg/L；J2：MS+6-BA 0.4 mg/L；J3：MS+6-BA 0.6 mg/L；J4：MS+6-BA 0.8 mg/L；J5：MS+6-BA 1.0mg/L。

1.2.2培养过程 将采集回来的带腋芽茎段截成2～3cm长的小段，先用流水冲洗20min，然后先后用75%的酒精浸泡10min、0.1%的升汞溶液浸泡3s，最后用无菌水冲洗3～5次后备用。超净台内接种时将腋芽剥离后切割为0.5cm大小，接种到4个愈伤组织诱导培养基配方上，待形成愈伤组织并等其生长结构致密后，切成0.5cm小块，接种到4种不定芽诱导培养基配方中，每瓶接3块，每配方接20瓶。整个培养期间注意观察和记录各种实验数据，培养过程中控制温度25℃-28℃，光照2000～3000 Lx，光照时间8～12h，湿度80%～85%。

2 结果与分析

2.1 愈伤组织诱导情况 见表1。

由表1可见，4种愈伤组织诱导培养基中均诱导出了愈伤组织，说明选用6-BA和NAA两种激素是正确的。4种培养基中，A1愈伤组织出现时间最晚，并且愈伤组织诱导率最低，A4出现愈伤组织的时间最早，但是愈伤组织诱导率不是很大。从第25d诱导率统计结果来看，随着NAA添加量的增加，A3诱导率达到最大，A4诱导率出现下降，说明6-BA添加量少，有利于生成愈伤组织，但并不是越少就越好。A3配方的瓶中，虽然第12d形成愈伤组织，但这些愈伤组织长势非常旺盛，并且质量最好。可见，在4个配方中，愈伤组织诱导的最佳配方为A3：MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.1mg/L。

2.2 不定芽诱导分化情况

2.2.1 不同培养基上分化系数 愈伤组织转接到不定芽分化培养基上，均分化形成了不定芽，到转瓶第30d统计每个配方的分化率，见图1。

由图1可知，在5个不定芽分化培养基中，均分化出了不定芽。但5个配方中的分化情况存在一定的差异，J2培养基中分化率最高，达到75%，其次为J3、J4、J1、J5。综合比较得出J2分化效果最好。

2.2.2 已分化培养基上分化情况 见表2。

由表2可知，J2、J4形成不定芽的时间比较早，从平均分化出不定芽的个数来看，J2配方最多，其次为J4配方。结合图1，可以得出J2、J4配方较优，形成不定芽的时间较早、分化不定芽的数量多。综合得出，在5个不定芽分化培养基中，J2（MS+6-BA0.4mg/L ）、J4（MS+6-BA 0.8mg/L）配方均适合软枣猕猴桃愈伤组织块进行不定芽的诱导，但J2不定芽分化率较高，所以J2（MS+6-BA0.4mg/L ）配方最为适合。

3 结论与讨论

通过软枣猕猴桃组培繁殖中不定芽诱导技术研究，得出MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L配方适合诱导愈伤组织，配方MS+6-BA 0.4mg/L适合不定芽的分化。软枣猕猴桃种子数量多、取种容易，而且发芽率很高，但是幼苗对水分要求高，所以只要满足湿度条件就能大量繁殖砧木苗【4】。现今，软枣猕猴桃园林应用还没有被大规模的使用，果实开发的力度还不够，苗圃育苗仅为少量，关于其组培快速繁殖方面的研究也比较少，本试验利用腋芽进行组织培养，得出了愈伤组织、不定芽两个阶段的最佳培养方式，希望该试验的结论能为整个软枣猕猴桃的离体快繁提供依据。

参考文献：

[1] 朴一龙，赵兰花. 软枣猕猴桃研究进展[J]. 北方园艺，2008， （1）：45-48.

[2] 李 强. 软枣猕猴桃组培快繁体系的建立[J].辽宁林业科技， 2018（7）：112-115.

[3] 陈 晶. 软枣猕猴桃种苗快速繁育技术研究[J].现代农业科 技，2016（6）：78-80.

[4] 黄圆博，姜丹，李旭，等. 软枣猕猴桃苗木繁育技术研究[J]. 延边大学农学学报，2017（1）：29-34.