不同产地南五味子药材质量评价△

李筱玲，邓寒霜

(商洛学院 生物医药与食品工程学院，陕西 商洛 726000)

五味子始载于《神农本草经》，列为上品，具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心之功效，有2000多年的药用历史[1]。五味子有南北之分，北五味子为木兰科植物五味子Schisandrachinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果实，习称五味子[2]66；南五味子为木兰科植物华中五味子SchisandrasphenantheraRehd.et Wils.的干燥成熟果实[2]244。长期以来南、北五味子同作五味子入药[3]。经过长期实践人们认识到其差别，自2000年起，《中华人民共和国药典》将南五味子与五味子分开收录[4-5]。现行药典分别以五味子酯甲、五味子醇甲作为南、北五味子质量控制的指标性成分。南、北五味子有效成分不尽相同，功能主治略有差异，但在临床使用过程中，存在两种五味子混用现象。笔者所在商洛市位于陕西南部山区，地处秦岭南麓东段，为南五味子主产区，近年来有文献报道该地区所产南五味子品质较优[6-8]。本文对陕南及周边地区药材市场南五味子质量进行了初步调查、评价，以期为南五味子药材质量控制及指导临床合理用药提供参考。

1 试剂与材料

1.1 试剂与仪器

LC-20A型高效液相色谱仪(日本岛津)，四元泵，自动进样器，PDA检测器；安五脂素对照品(中国食品药品检定研究院，批号：111844-201001)；南五味子对照药材(中国食品药品检定研究院，批号：121118-200502)；五味子酯甲对照品(中国食品药品检定研究院，批号：111529-200503)等。

1.2 实验材料

南五味子药材样品，随机从药材市场或药店采购，共计14份，详见表1。

2 方法与结果

按照2015版《中华人民共和国药典》第一部及第四部相关项下要求，对收集到的样品进行性状、鉴别、检查、含量测定等分析，评价南五味子药材质量。

2.1 性状

南五味子药材呈扁球形或球形，直径4～6 mm，表面颜色为棕红色至暗棕色不等，果肉常贴于种子上且干瘪皱缩，果肉气微，味酸，种子1～2粒，肾形，表面棕黄色有光泽，种皮薄而脆，破碎后香气弱，味辛，微苦。各样品性状见图1。

表1 南五味子药材样品来源

经观察可知，5号与11号药材样品表面显暗紫红色、皱缩油润、果肉柔软，符合北五味子药材性状特征；其他样品表面棕红色至暗棕色、皱缩干瘪、果肉紧贴种子上，符合南五味子药材性状特征。

2.2 微鉴别

取样品适量，粉碎，过四号筛，以水合氯醛装片，用显微镜先以10倍镜调至清晰找到物像，再转至40倍镜下调试观察。结果见表2、图2。

图1 南五味子药材样品性状

样品号种皮外层石细胞种皮内层石细胞果皮表皮细胞导管1、2、3、4、6、7、8、9、10、12、13、 14多角形、长多角形,腔内含棕色物,纵面观为长方形,外侧壁无突起,壁孔及孔沟不明显长圆形、类圆形,壁孔及孔沟明显类多角形,表面有角质线纹,表皮中散有油细胞,垂周壁不呈连珠状增厚螺纹、梯纹导管5、11表面观呈多角形、长多角形,壁厚,孔沟极细密,细胞腔内含深棕色物多角形,类圆形,不规则,壁稍厚,纹孔较大类多角形,垂周壁呈连珠状增厚,表面有角质线纹,表皮中散有油细胞螺纹导管

注：a，b南五味子果皮表皮细胞；c，d 北五味子果皮表皮细胞；e 南五味子螺纹导管；f 南五味子种皮外层石细胞；g 南五味子种皮外层石细胞纵面观；h 南五味子种皮内层石细胞。图2 药材样品显微鉴别结果

南、北五味子药材显微鉴别特征类似，主要区别在于表皮细胞是否垂周壁呈连珠状增厚[9]。由表2、图2可知，5号与11号样品表皮细胞垂周壁明显呈连珠状增厚，而其他样品未发现此类情况。由此，可以初步判断5号与11号样品应为北五味子，其他样品为南五味子。本次实验使用水合氯醛装片，未观察到淀粉粒。

2.3 薄层鉴别

照《中华人民共和国药典》(2015版，一部)南五味子鉴别项下有关规定进行，实验结果如图3所示。

注：1.安五脂素对照品；2.南五味子对照药材；3.样品；4.样品。图3 药材样品薄层鉴别结果

由图3可知，5号、11号样品薄层色谱与南五味子对照药材相比有明显差异，且5号与11号样品色谱图中未出现安五脂素斑点，由此可以进一步判断5号、11号2个样品应为北五味子；其余12个样品均在与对照药材和对照品相应的位置上，显相同颜色的深蓝色斑点，符合南五味子薄层鉴别特征。

2.4 检查项目

取南味子药材样品适量，照《中华人民共和国药典》有关规定，进行杂质、水分、总灰分检查，详细结果见表3。

表3 药材样品检查项测定结果

注：《中华人民共和国药典》规定，本品杂质不得过1%，水分不得过12.0%，总灰分不得过6.0%。

由表3可知，全部样品杂质、水分、总灰分平均含量分别为0.61%、10.69%、4.25%；利用SPSS 13.0对3组数据进行单样本t检验得知，所有样品杂质、总灰分含量显著低于药典要求(P<0.01)，水分含量与药典标准比较无显著差异(P=0.107)。

2.5 含量测定

2.5.1 色谱条件 以十八烷基键合硅胶为填充剂，检测波长为254 nm，以四氢呋喃-水(38∶62)为流动相，流速0.8 mL·min-1，柱温40 ℃，按五味子酯甲色谱峰计算其理论塔板数应不低于3000。

2.5.2 样品前处理 对照品溶液的制备 精密称取五味子酯甲对照品5.8 mg于5 mL容量瓶中，加入少量甲醇，加热使其溶解，待冷却至室温后以甲醇定容至刻度，即得浓度为1.16 mg·mL-1的对照品溶液。

供试品溶液的制备 精密称取药材粉末(过三号筛)0.5 g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定重量，在250 W、40 kHz的条件下超声处理30 min，放冷至室温，再次称定重量，以甲醇补足减失重量，摇匀，过滤，收集续滤液，即得供试品溶液[10-12]。

2.5.3 线性关系考察 分别精密吸取五味子酯甲对照品溶液0、1、2、3、4、5，置5 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，进样分析。以峰面积对浓度(mg·mL-1)进行回归分析，得五味子酯甲回归方程Y=3.0×107X+61 214，r=0.999 9，表明五味子酯甲在浓度0～1.16 mg·mL-1范围内与峰面积呈良好线性关系，详细结果见图4。

图4 五味子酯甲标准曲线

2.5.4 供试品含量测定 取前述方法所得供试品溶液20 μL，照2.5.1项下的色谱条件进样分析，计算五味子酯甲含量。实验结果见表4，标准品及样品色谱图见图5。

表4 五味子酯甲含量测定结果

注：《中华人民共和国药典》规定，本品按干燥品计算，含五味子酯甲不得少于0.20%。

注：1.五味子酯甲标准品；2.南五味子样品；3.北五味子样品。图5 高效液相检测色谱图

由图5可知，五味子酯甲保留时间在18.7 min左右，南五味子样品色谱图中可明显看到五味子酯甲色谱峰；北五味子样品中未检出五味子酯甲。由表5可知，全部南五味子样品五味子酯甲平均含量为0.63%，显著高于《中华人民共和国药典》标准(P<0.01)；其中2号样品含量最低，9号样品含量最高，全部样品有效成分含量在药典标准的2.5～3.9倍之间，表明陕南及周边地区所产南五味子品质较优。

3 讨论与分析

中药五味子根据来源不同有南北之分，具有收敛固涩，益气生津，补肾宁心的作用。被称为南五味子的植物较多，有长梗南五味子KadsuralongipedunculataFinet et Gagnep.[13]、异形南五味子Kadsuraheteroclita(Roxb.)Craib.[14]、内南五味子KadsurainteriorA.C.Smith[15]等，上述3种南五味子与华中五味子同科不同属，且药用部位为根及藤茎，因此不常作为五味子伪品出现。陕南地区药材市场上流通的五味子主要是华中五味子的干燥成熟果实，其主要成分为木质素类，如五味子酯甲、五味子甲素、安五脂素等[16]。因近年来北五味子向南引种及外地药材流入等原因，在销售及使用过程中存在部分南、北五味子混用的情况。两种五味子在2015版《中华人民共和国药典》中收录的性味归经、功能主治等内容完全相同，但因南、北五味子有效成分有明显差异，临床上仍习惯将二者区别使用。

本文调查发现，部分药店人员不能正确区分五味子药材，将两种五味子同等销售，在药品监督管理过程中应引起注意。本文共收集五味子药材样品14份，其中5号、11号2份样品在性状及显微鉴别中呈现明显北五味子特征；在薄层色谱鉴别中该2份样品与南五味子对照药材有明显差异，且未检出安五脂素；在利用高效液相色谱法进行含量测定过程中，上述2份样品色谱图亦表现出与其他样品的显著差异且未检出五味子酯甲，由此可以判断5号及11号样品应为北五味子。

所有南五味子样品中，除少数样品水分或总灰分含量未达到药典标准外，其他指标均符合药典要求，且有效成分含量均达到药典标准2倍以上，说明陕南地区出产的南五味子药材品质较为优良。部分药材样品中混有果梗、树枝等非药用部位，应是药材采收、收购、加工时未经严格操作而引入的杂质，虽未超出药典规定范围，但也影响了药材质量。部分样品水分含量超标，影响了用量准确性，同时更易使药材发生霉变。总灰分的限度要求对于保证中药的品质和洁净程度，有一定的意义，个别样品总灰分超标也对药材质量带来隐患。在以后的生产、销售过程中应注意加强产地初加工管理，严格按照《中药材生产质量管理规范》(GAP)要求操作，规范药材净制、干燥等环节，防止非药用部位及其它杂质混入，有效控制药材含水量、杂质及总灰分，进一步提高南五味子药材品质。