不同精粗比日粮对绵羊瘤胃微生物蛋白浓度和细菌数的影响

2018-11-29永荣姜向宏

四川畜牧兽医 2018年11期

永荣，姜向宏

（1.内蒙古鄂尔多斯市动物卫生监督所，内蒙古鄂尔多斯 017000；2.内蒙古鄂托克旗家畜改良工作站，内蒙古鄂托克 010018）

反刍动物的瘤胃是一个庞大的发酵罐，饲料中大部分有机物质、纤维物质和淀粉的消化都是依靠瘤胃微生物来完成的[1]。瘤胃微生物在反刍动物营养代谢方面起着举足轻重的作用。本试验拟通过饲喂3种不同纤维水平的日粮来研究日粮结构对瘤胃微生物蛋白和瘤胃细菌数量的影响，并通过相关性分析来研究瘤胃细菌浓度、细菌数量与微生物蛋白浓度间的相关关系。

1 材料与方法

1.1 试验设计选择体况良好、体重50kg左右的鄂尔多斯细毛羊30只，统一驱虫，安装永久性瘤胃瘘管和十二指肠瘘管进行试验。试验羊随机均分为3组（1组、2 组和 3组），分别饲喂精粗比为 1∶9、3∶7、5∶5 的日粮。

1.2 试验日粮日粮配制参照中国美利奴羊饲养标准[2]，绵羊的能量维持需要为 450kJ/kg·BW0.75，蛋白质需要为350mgN/kg·BW0.75，饲喂水平为1.3倍的维持需要。

1.3 饲养管理通过控制采食量来控制各试验组绵羊对营养成分的摄入量。试验羊采食的青干草从呼伦贝尔市购进，经打草机一次性打碎备用。试验日粮一次备齐，分别于7：00和19：00饲喂，自由采食，自由饮水，单圈饲养。

1.4 测定指标及方法

1.4.1 瘤胃微生物蛋白测定进入正式试验后连续采样3 d，分别在以下时间点上采样：早晨饲喂后0、2、4、8、12h，每次采集瘤胃液约 50mL。瘤胃液用 2 层纱布过滤后，滤液于4000r/min离心15 min，取上清液测定瘤胃微生物蛋白含量。所有上清液样品均在-20℃下冷冻保存，待测。

将不同采样时间点的冷冻上清液样品解冻，用移液管移取20.0mL，在高速冷冻离心机上以12000r/min离心30min，取沉淀用0.9%氯化钠溶液冲洗2遍，每次冲洗后均以12000r/min离心30min，弃掉上清液，将沉淀小心无损地转移到消化管中，用凯氏定氮法测定含氮量，然后折算出菌体蛋白含量。

1.4.2 瘤胃细菌计数分别于饲喂后0、2、4、8、12 h用采样管从瘤胃不同部位快速吸取瘤胃液50mL左右，装入事先预热到39℃并通入二氧化碳气体的小瓶中，密封，39℃保温，取回后迅速匀浆15s，用两层纱布过滤，滤液用来进行细菌计数。

1.5 数据分析数据采用SAS软件和Excel2003软件进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 不同精粗比日粮对绵羊瘤胃微生物蛋白浓度的影响结果见表1。

表1 不同精粗比日粮对绵羊瘤胃微生物蛋白浓度的影响 mg/100mL

由表1可见，不同精粗比日粮对绵羊瘤胃微生物蛋白浓度的影响无显著差异（P＞0.05），但数值上呈现一定趋势，即：3组＞2组＞1组。从瘤胃微生物蛋白浓度的动态变化来看，3个组的变化趋势相同，均是饲喂前微生物蛋白浓度最高，饲喂后4h最低。

影响瘤胃微生物蛋白浓度的因素很多，日粮中精料比例、饲喂频率、饲喂水平、取样时间以及动物的个体差异等都会对其产生影响。本试验各组之间差异不显著可能就是多种因素影响的结果。

2.2 不同精粗比日粮对瘤胃细菌数量的影响结果见表2。

表2 不同精粗比日粮对瘤胃细菌数量的影响

由表2可见，随着日粮中精料比例的增加，瘤胃细菌数量有增加的趋势，说明日粮精料比例高能够促进瘤胃细菌生长。从不同处理组各时间点的平均值可以看出，3组的瘤胃细菌数量（11.00×109个/mL）高于1 组（8.73×109个/mL）和 2 组（9.22×109个/mL），但经统计分析差异不显著（P＞0.05）。

由图1细菌变化趋势图可见，各组瘤胃细菌数量的动态变化规律基本一致。瘤胃细菌浓度在饲喂前最高，而后随着饲喂时间的变化呈现一定的波动，基本上在2h或4h时最低。在饲喂后2h或4h时细菌数量最少，以后逐渐上升，8h时出现峰值，之后又开始下降直到第2次饲喂前。1组瘤胃细菌数量的变化较明显，在第2次饲喂前出现最低值，但变化趋势与其他各组一致。说明不同精粗比日粮对瘤胃细菌的影响有一些相似性。各组最高值和最低值出现的时间点不一致，说明不同精粗比日粮对瘤胃细菌的生长周期是有一定影响的。

结合表1和表2来看，同一试验组的瘤胃微生物蛋白浓度和细菌数的动态变化趋势基本一致。同一试验组在不同精粗比日粮条件下，瘤胃微生物蛋白浓度和细菌数的动态变化呈现出相同的趋势：饲喂前最高，饲喂后2h出现最低值，以后逐渐上升，在10h或12h出现第2次峰值。这跟前人报道的结果一致[3-4]。

图1 瘤胃细菌浓度和数量间的关系

2.3 瘤胃细菌浓度和细菌数量间的相关关系关于瘤胃细菌浓度和细菌数量间的相关性研究结果见图1。由图1可见，瘤胃细菌浓度与瘤胃细菌数量呈现很高的相关性（y=0.4209x，R2=0.9972）。说明对于同一动物来说，细菌浓度就是衡量细菌数量的一个很好的指标，今后可以只通过测定细菌浓度即可知晓细菌数量的变化规律。

2.4 瘤胃微生物蛋白浓度与细菌浓度间的相关性结果见图2。由图2可见，瘤胃微生物蛋白浓度与细菌浓度之间的相关性很低（R2=0.2271）。说明瘤胃微生物蛋白与瘤胃细菌菌群之间没有很高的相关性。原因可能是：（1）有许多研究表明，实验室条件下可培养的细菌数量只占到瘤胃细菌数量的1%～10%，这对结果的分析具有一定的影响；（2）本试验测定的微生物蛋白是粗蛋白含量，包括了活的细菌蛋白和部分已经死了的菌体蛋白，这对微生物蛋白浓度产生了一定的影响；（3）微生物分离过程中存在误差；（4）试验动物数量也会对试验结果产生影响。