细菌内毒素 降钙素原 C反应蛋白联合检测对下呼吸道感染的诊断意义

张纯林 程运涛 常 青 胡志刚

下呼吸道感染常见病原菌有G+菌、G-菌、支原体和病毒等，早期采用足量广谱抗菌药物的总有效率60%～80%，耐药率10%～30%，5%～15%可导致病情进展，预后较差[1-2]。孔繁荣等[3]研究指出，血浆内毒素早期诊断及鉴别诊断细菌感染性疾病的准确性优于C反应蛋白(C reactive protein，CRP)和降钙素原(procalcitonin，PCT)。杨辉等[4]研究检测血清PCT、CRP和内毒素水平有利于鉴别G-菌和G+菌感染所致脓毒症，敏感度和特异度较高。施永新等[5]研究PCT和内毒素在老年下呼吸道感染病原诊断中具有一定价值，二者联合检测可提高鉴别感染类型的特异度，其动态变化可用来评估抗菌药物的疗效，进一步验证病原菌类型。基于此，该研究将进一步分析联合检测内毒素、PCT和CRP对下呼吸道感染的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 连续选择2017年1月至2018年1月入江苏省无锡市第八人民医院诊断下呼吸道感染患者200例。纳入标准：①根据临床症状和体征以及影像学表现考虑下呼吸道感染，下呼吸道感染为气管隆突以下左右气管分支、段和叶支气管以及肺组织和间质组织部位感染；②经细菌培养确诊病原菌种类；③临床资料完善，患者知情同意。排除标准：①合并上呼吸道感染、全身感染、感染性休克等；②合并支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病或呼吸衰竭；③严重肝肾等功能障碍；④妊娠或哺乳期妇女，器官移植者。

经细菌培养确诊G+菌感染90例、G-菌感染70例、非细菌感染40例，3组间性别、年龄和病程比较差异无统计学意义(P>0.05)。详见表1。

表1 3组患者基线资料比较

注：G+菌感染组肺炎链球菌45例，金黄色葡萄球菌35例，表皮葡萄球菌10例； G-菌感染组铜绿假单胞菌17例，肺炎克雷伯菌25例，大肠埃希菌16例，鲍曼不动杆菌6例，流感嗜血杆菌6例；非细菌感染组支原体肺炎20例，衣原体肺炎7例，病毒性肺炎13例。

1.2 研究方法 所有患者在入院24 h内，应用抗菌药物前，采集空腹静脉血6～8 mL，其中2 mL加入含1 mL 1号处理液的去热原无菌试管中，离心分离血浆，采用BET-24A细菌内毒素分析仪，鲎试验动态比浊法测定血浆内毒素水平，试剂盒购自江苏南京碧云天科技有限公司；另取2 mL离心分离血浆，采用Omlipo特定蛋白分析仪，动态浊度法测定血浆CRP水平，试剂盒购自北京中杉金桥生物有限公司；另取2 mL血清样品进行离心后，取上层血清，采用M-2000化学发光仪，免疫比浊法定量测定血清PCT水平，试剂盒购自美国Sigma公司。均严格按照试剂盒说明书进行操作。内毒素水平≥0.35 EU/mL，CRP≥5 mg/L，PCT≥0.5 μg/L为阳性。采用BACTECTM9120 全自动血培养仪进行细菌培养，VITEK II 微生物全自动鉴定仪进行病原菌菌种鉴定。

1.3 观察指标 比较组间内毒素、PCT和CRP水平以及阳性率，分析内毒素、PCT和CRP诊断细菌感染和病原菌种类的准确性、敏感性和特异性，并采用受试者工作曲线(ROC)分析联合诊断的价值。

2 结果

2.1 内毒素、PCT和CRP水平以及阳性率比较 G-菌感染组内毒素、PCT水平和阳性率高于G+菌感染组，非细菌感染组最低，差异有统计学意义(P<0.05)。G-菌感染组和G+菌感染组CRP水平和阳性率高于非细菌感染组(P<0.05)，但G-菌感染组和G+菌感染组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。详见表1。

2.2 内毒素、PCT和CRP分别诊断细菌感染和病原菌种类的价值 内毒素和PCT诊断细菌感染和病原菌种类的准确性、敏感性和特异性均高于CRP，差异有统计学意义(P<0.05)，内毒素和PCT间比较差异无统计学意义(P>0.05)。详见表2。

表1 3组对象内毒素、PCT和CRP水平以及阳性率的比较

注：PCT为降钙素原，CRP为C反应蛋白；与非细菌感染组比较，#P<0.05；与G+菌感染组比较，*P<0.05

表2 内毒素、PCT和CRP分别诊断细菌感染和病原菌种类的价值(%)

注：PCT为降钙素原，CRP为C反应蛋白；与CRP诊断细菌感染和病原菌种类的准确性、敏感性和特异性比较，#P<0.05

2.3 ROC分析联合诊断的价值 以内毒素、PCT和CRP联合检测为诊断指标，以下呼吸道细菌感染为诊断结果，纳入ROC分析得出：联合诊断的敏感性为95.6%、特异性为93.7%、准确性为0.896；以G-菌感染为诊断结果得出：联合诊断的敏感性为90.3%、特异性为87.6%、准确性为0.833。见图1。

图1 联合检测诊断下呼吸道细菌感染和G-菌感染的价值

3 讨论

下呼吸道感染的临床症状和体征各异，严重者可致脓毒血症和休克。临床诊治多以经验性抗感染为主，结合细菌培养和药敏试验进行药物调整。早期采用足量广谱抗菌药物的总有效率有限，且易出现耐药，导致病情进展，预后较差。早期检测敏感性和特异性的炎症标志物对判断病情、指导用药、评估效果和预后均有十分重要的价值。

本研究发现，G-菌感染组内毒素、PCT水平和阳性率明显高于G+菌感染组，非细菌感染组最低。G-菌感染组和G+菌感染组CRP水平和阳性率明显高于非细菌感染组。内毒素的主要成分是G-菌细胞壁的脂多糖，细菌快速繁殖或死亡时可释放大量内毒素入血，导致内毒素早期明显升高，且峰值越高，细菌感染越重[6-7]。内毒素有致热原性和炎症诱导性，是重要的促炎症紊乱反应的核心活性分子之一，可增加血管通透性，血压下降，严重者可导致播散性血管内凝血，危及生命[8-9]。而G+菌细胞壁无此成分。G-菌在内毒素和细胞因子的双重诱导下使PCT释放明显增加。孔繁荣等[3]研究指出，血浆内毒素早期诊断及鉴别诊断细菌感染性疾病的准确性优于CRP和PCT。

PCT主要由甲状腺C细胞生成，在细菌感染的早期可明显升高，对诊断细菌性感染有较好的敏感性和特异性[10-11]。但是PCT的表达往往需要多种诱导因子，如细菌内毒素、肿瘤坏死因子及白细胞介素-6等，细菌内毒素具有较强的诱导PCT表达和释放作用[12]。施永新等[5]研究证实，PCT和内毒素在老年患者下呼吸道感染病原诊断中具有一定价值，二者联合检测可提高鉴别感染类型的特异度，其动态变化可用来评估抗菌治疗的疗效，进一步验证病原菌类型。CRP是肝脏合成的非特异性急性炎症标志物之一，对早期识别炎症性反应有较好的敏感性，但特异性较差，不仅在细菌性感染，在病毒性感染、心脑血管等非细菌性感染中也可异常表达[13-14]。杨辉等[4]研究也认为，检测血清PCT、CRP和内毒素水平有利于鉴别G-菌和G+菌感染所致脓毒症，敏感度和特异度较高。

本研究得出，内毒素和PCT诊断细菌感染和病原菌种类的准确性、敏感性和特异性均高于CRP，提示内毒素和PCT在细菌性感染中的诊断价值优于CRP。ROC分析得出，联合检测内毒素、PCT和CRP诊断下呼吸道细菌感染和G-菌感染的敏感性、特异性和准确性均较高，优于单一指标，对指导临床应用提供了重要参考依据。

综上所述，联合检测内毒素、PCT和CRP对判断下呼吸道细菌感染和病原菌种类有较好的应用价值。