绵羊瑞香狼毒中毒病理组织学观察

王兴桂，莫重辉

(1.青海省湟中县畜牧兽医工作站，青海湟中 811600；2.青海大学农牧学院，青海西宁 810016)

瑞香狼毒(Stellera chamaejasme)为瑞香科(Thymelaeaceae)狼毒属(Stellera)有毒植物，在我国广泛分布于西北、西南、东北、华北各省[1]。由于瑞香狼毒具有较强的适应能力和再生能力，目前已成为天然草原上的优势种，有些草原上瑞香狼毒优势度达72.77%，对草地生态和畜牧业造成严重危害[2]。许多学者认为，瑞香狼毒主要有毒成分为异狼毒素、狼毒素、新狼毒素、甲基狼毒素等黄酮类化合物[3-7]。由于瑞香狼毒全株有毒，且成株茎叶中含有萜类成分，家畜一般不采食，但在早春放牧时，家畜由于处于饥饿状态或贪青而误食引起中毒。家畜瑞香狼毒中毒后表现为呕吐，腹泻，粪便带血，卧地不起，全身痉挛，严重时虚脱或惊厥而死亡，母畜可导致流产[8-9]。陈永辉等[10]报道了绵羊瑞香狼毒中毒病例，但瑞香狼毒对羊毒性的研究报道较少，特别是瑞香狼毒中毒羊病理组织学观察尚未见报道。本试验进行了不同剂量瑞香狼毒对试验羊病理组织学观察，以期为羊瑞香狼毒中毒机制研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 瑞香狼毒 采集于青海省湟中县土门关乡，正值瑞香狼毒盛花期，阴干粉碎。

1.1.2 试验用动物 临床健康试验羊8 只，购于自由市场，雌雄兼有。临床观察1周，确认临床健康后手术植入永久性瘤胃瘘管，待伤口痊愈后进行编号，随机分为瑞香狼毒低剂量组和高剂量组。

1.1 方法

1.2.1 攻毒 试验前所有试验绵羊空腹称重定为原始体重，每天清晨空腹，高剂量和低剂量组分别按2.5 g/kg体重和5 g/kg体重的剂量经瘤胃瘘管一次投服，然后使其自由采食青干草和自由饮水。每天观察试验羊饮食、精神状态、运动情况、中毒症状及中毒症状出现的时间。连续饲喂32 d停止投服瑞香狼毒粉，

1.2.2 病理组织学观察 连续投服瑞香狼毒粉32 d后，每组挑选2只中毒症状明显的试验羊进行剖检，观察病理变化，同时采集心、肝、肺、肾、淋巴结、大脑、胃肠等组织，HE染色石蜡包埋，光学显微镜下进行病理组织学观察。

2 结果

2.1 临床观察结果

所有试验羊在试验期间食欲正常，饮水量增加，试验第18天试验羊出现不同程度的腹泻症状，高剂量组试验羊腹泻较严重，粪便稀软不成形，试验第19天和第23天，低剂量组和高剂量组分别死亡1只试验羊，试验第32天停止投服瑞香狼毒粉后，所有试验羊逐渐停止腹泻，精神好转。

2.2 试验羊剖检变化

两组试验羊病理变化基本相同，试验羊极度消瘦，腹腔有清亮腹水；胃肠表面黄染，瘤胃壁薄，真胃黏膜出血，瓣胃黏膜脱落，肠壁充血，肠臌气；肺气肿；心包有清亮的积液，心室血凝不良，心房肥大；脾脏稍肿大，边缘变薄，质地柔软，切面呈淡褐色且有颗粒状白色突起；肝脏呈土黄色，肿大，边缘钝圆，质脆易碎；肾脏肿大，皮质部较薄。

2.3 病理组织学变化

两组试验羊病理组织学变化基本相似，心肌纤维变性肿胀，结构紊乱，横纹消失，心肌纤维间有渗出液(图1A和图2A)；肝细胞肿大，窦状隙狭窄或阻塞，中央静脉极度扩张，无血液充盈，肝细胞颗粒变性，有色素沉积(图1B和图2B)；脾小梁断裂不完整，皮质部淋巴细胞明显减少，髓质部结构疏松，有浆液性渗出和淋巴细胞的坏死(图1C和图2C)；肺内细支气管扩张，血管充血明显，肺泡壁毛细血管扩张充血，肺泡壁增厚，个别部位肺泡壁断裂(图1D和图2D)；肾小球毛细血管上皮细胞增生明显，肾小球明显肿大，肾球囊间隙变窄，肾小管上皮细胞肿胀、变性，肾小管管腔狭窄或阻塞，部分肾小管上皮细胞破裂崩解，细胞核消失(图1E和图2E)；大脑神经细胞变性坏死，出现噬神经元现象(图1F和图2F)。

A.心肌纤维变性肿胀，结构紊乱，横纹消失，肌纤维间有渗出液；B.肝细胞肿大，窦状隙狭窄或阻塞，肝细胞颗粒变性，有色素沉积；C.脾小梁断裂，皮质部淋巴细胞减少，髓质部结构疏松；D.肺内细支气管扩张，血管充血，肺泡壁毛细血管充血，肺泡壁增厚；E.肾小球肿大，肾球囊间隙变窄，肾小管上皮细胞肿胀，变性；F.大脑神经细胞变性坏死，出现噬神经元现象。

A.Myocardial fibrosis and swelling, disordered structure, disappearance of horizontal lines, and exudation between muscle fibers；B.Hepatocyte swelling, sinus space stenosis or obstruction, hepatocyte granulosis, pigmentation；C.Splenic trabeculae broken, lymphocytes of cortex decreased, and medullary structure loose；D.pulmonary bronchiole dilatation, vascular congestion, pulmonary alveolar capillary congestion, and thickening of alveolar wall；E.Glomerular enlargement, capsule of glomerulus space narrowing, swelling and degeneration of renal tubular epithelial cells；F.Brain nerve cell degeneration and necrosis, the appearance of neuronphagocytosis.

图1低剂量组病理组织学变化(HE染色，40×10)

Fig.1 Histopathological lesions of low-dose group (HE,40×10)

3 讨论

宋晓平等[11]报道，将提取的瑞香狼毒总黄酮给家兔按700 mg/kg体重灌胃后出现腹痛、腹泻和体温下降等症状,认为瑞香狼毒中的总黄酮对家兔肠管运动具有明显的抑制作用，说明家畜瑞香狼毒中毒时出现腹痛、腹泻等症状，是由于瑞香狼毒中的有毒成分直接刺激胃肠道，造成胃肠道功能紊乱。常建军等[12]报道，从瑞香狼毒中提取的粗黄酮类化合

A.心肌纤维变性肿胀，结构紊乱，横纹消失，肌纤维间有渗出液；B.肝细胞肿大，窦状隙狭窄或阻塞，肝细胞颗粒变性，有色素沉积；C.脾小梁断裂，皮质部淋巴细胞减少，髓质部结构疏松；D.肺内细支气管扩张，血管充血，肺泡壁毛细血管充血，肺泡壁增厚；E.肾小球肿大，肾球囊间隙变窄，肾小管上皮细胞肿胀，变性；F.大脑神经细胞变性坏死，出现噬神经元现象。

A.Myocardial fibrosis and swelling, disordered structure, disappearance of horizontal lines, and exudation between muscle fibers；B.Hepatocyte swelling, sinus space stenosis or obstruction, hepatocyte granulosis, pigmentation；C.Splenic trabeculae broken, lymphocytes of cortex decreased, and medullary structure loose；D. Pulmonary bronchiole dilatation, vascular congestion, pulmonary alveolar capillary congestion, and thickening of alveolar wall；E.Glomerular enlargement, capsule of glomerulus space narrowing, swelling and degeneration of renal tubular epithelial cells；F.Brain nerve cell degeneration and necrosis, the appearance of neuronphagocytosis.

图2高剂量组病理组织学变化(HE染色，40×10)

Fig.2 Histopathological lesions of high-dose group (HE,40×10)

物，给试验家兔灌服后，表现精神沉郁，不愿运动，喜卧，腹泻等症状，最后因呼吸衰竭而死亡。沈明华等[13]研究了狼毒对试验绵羊的毒性，结果表明瑞香狼毒对绵羊具有一定的毒性作用。从本研究试验羊临床表现来看，每天分别按2.5 g/kg体重和5 g/kg体重的剂量给试验羊投服瑞香狼毒后，所有试验羊在试验期间出现饮水量增加和腹泻等症状，且高剂量组试验羊腹泻较为严重，最后出现神经症状而死亡，与上述学者报道的临床症状相似，说明瑞香狼毒总黄酮是引起试验羊瑞香狼毒中毒的主要有毒成分，而且随着剂量的增加而中毒症状加重。

常建军等[12]报道，给家兔灌服瑞香狼毒粗黄酮类化合物后，胃肠、心、肝、脾、肾等实质器官均有不同程度的损伤。本试验中试验羊剖检变化主要表现为极度消瘦，肠壁充血，胃壁薄，黏膜脱落、出血，肺气肿，心室血凝不良，肝边缘变钝，质脆易碎，肾肿大，皮质部变薄等病理变化，与常建军等报道的试验家兔病理变化相似，说明瑞香狼毒主要有毒成分对试验羊胃肠、心、肝、脾、肺、肾等脏器也具有一定的毒性作用。

当心肌受损时，心肌收缩力减弱或心力衰竭，全身血液回流受阻，各组织器官内的血管扩张，造成胃肠道、肝、肺、肾等脏器淤血。特别是肺淤血，使肺泡扩张，导致呼吸功能障碍，各组织器官缺氧，加剧血管扩张和淤血，促进心力衰竭[14]。肝脏是动物机体的主要解毒器官，动物机体在代谢过程中产生的氨在肝脏内代谢成尿素排出体外[15]。因此，当瑞香狼毒中有毒成分进入动物体内后，对心肌具有一定的损伤作用，导致各脏器淤血，同时在肝脏解毒和肾脏排泄时，对肝脏和肾脏也有一定的损伤作用。病理组织学观察发现，两组试验羊心肌纤维均出现肿胀、变性，结构紊乱，横纹消失等变化；肺主要表现为细支气管扩张，肺泡壁毛细血管扩张充血等现象；肾小球明显肿大，肾小球毛细血管内皮细胞增生明显，肾球囊间隙变窄，肾小管上皮细胞肿胀，变性，肾小管管腔狭窄或阻塞，部分肾小管上皮细胞破裂崩解，细胞核消失；肝细胞肿大，窦状隙狭窄或阻塞，中央静脉极度扩张，肝细胞颗粒变性，有色素沉积；大脑血管充血明显，局部有出血，神经细胞变性坏死，出现噬神经元现象，说明给试验羊投服瑞香狼毒时，瑞香狼毒中有毒成分对心、肺、肝、肾和神经系统具有明显的损伤作用，从而在临床上出现瑞香狼毒中毒症状，这与宋晓平等[11]的报道相似。